"NCI-H1838 Adherent人非小細胞肺癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題,客戶遇到的問題從細胞生長角度來說,針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因,我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因:細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多,細胞老化;2)細胞的接種量:接種量過低,細胞生長緩慢;3)細胞傳代時間過晚:細胞中毒,影響傳代后的細胞生長;4)胰酶消化時間過長或過短:時間過長,細胞死亡;時間過短,細胞未完全分離而成團,細胞死亡;5)細胞的凍存與復蘇:慢凍速融。污染:1)支原體污染;2)霉菌污染;培養(yǎng)基或血清:1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證;2)選擇的培養(yǎng)基是否合適;3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤;培養(yǎng)環(huán)境:1)CO2供應是否正常;2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確;解決方法:根據(jù)以上四個方面的可能原因,做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài):如傳代次數(shù)、接種量等;2)避免產生污染(用正規(guī)、合法、可溯源的血清);3)要用合適的血清或培養(yǎng)基,經(jīng)過驗證;4)注意實驗室的環(huán)境;二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因:1)培養(yǎng)箱內無CO2;2)培養(yǎng)箱內溫度波動太大;3)細胞凍存或復蘇過程中損傷;4)培養(yǎng)液滲透壓不正確;5)培養(yǎng)液中有毒代謝產物堆積;解決方法:1)檢測培養(yǎng)箱內CO2;2)檢查培養(yǎng)箱內溫度;3)取新的保存細胞種;4)檢測培養(yǎng)液滲透壓;5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
NCI-H1838 Adherent人非小細胞肺癌細胞系
細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細胞(絕大部分1min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續(xù)這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化;什么算是消化好了呢?不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細胞與培養(yǎng)基質材料的附著已經(jīng)消失了,細胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性,無論死活的細胞都是如此,你可以嘗試,準備100%的單個細胞懸液,貼壁后觀察細胞,仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑,這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質上脫離下來,這個時候即使是成片的(比如Calu-3細胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個細胞左右),是正常的,不要試圖再去延長消化時間,或者像有的同學那樣吹打1h,等待單細胞懸液出現(xiàn)。
Hs821T細胞系相關產品:ATC241細胞、HCC2279細胞、MZ-CRC-1細胞
GOTO細胞系相關產品:MTC-TT細胞、OV 1063細胞、KRC-Y細胞
Mahlavu細胞系相關產品:Sp2/0-Ag14細胞、MB468細胞、HO-1-N-1細胞
細胞傳代方法:1:3-1:4傳代;每周換液2次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
G-402細胞系相關產品:FU-MMT-1細胞、NCI-H2141細胞、MGH-U1 (EJ)細胞
PL9細胞系相關產品:Centre Antoine Lacassagne-78細胞、CAKI1細胞、MDA-MB-231-GFP細胞
GM02131細胞系相關產品:NCTC-3960細胞、Rat Fetal Lung-6細胞、LICR-HN6細胞
細胞生長特性:貼壁生長
NCI-H1838 Adherent人非小細胞肺癌細胞系
細胞形態(tài)特性:上皮細胞
【細胞培養(yǎng)中支原體、黑蛟蟲、真菌的污染情況總結】支原體:黑色的,好象多為多形,培養(yǎng)液一般培養(yǎng)液一般會渾濁,原體感染,國內血清很多都沒有做支原體陰性檢測,而支原體是牛血清中最常見的微生物之一。而且它不能用過濾的辦法除去。支原體感染細胞以后,細胞病變不很明顯,只是慢慢死去。用泰樂菌素,獸用支原體病的藥,但可用于細胞培養(yǎng),無任何不良反應。如果作為常用的抗生素的話, 建議用8ug/ml的濃度;黑蛟蟲:可以穿透濾膜,也可以通過空氣傳播,低倍下為黑色點狀,高倍下可看見黑色的小蟲游來游去,培養(yǎng)液也是不渾的,一般不會太影響,細胞還是可以用的。常常是細胞生長狀態(tài)良好,且觀測到的運動物無明顯增多,且培養(yǎng)液顏色、透明度無明顯變化,可在同一批號的血清養(yǎng)的細胞中發(fā)現(xiàn)類似現(xiàn)象。對細胞生長狀態(tài)不會有明顯影響,在細胞增殖旺盛之后會自然消失,除更換血清外無須特殊處理。建議如果細胞有可能是此種污染的話,可以增加細胞的種板密度,以提高細胞的生存率;真菌:一般培養(yǎng)液清亮,不變色,鏡下有絲狀物,有些真菌開始很像死細胞碎片,只是它很多很多的小塊很清楚,象珊瑚狀,不象細胞碎片分不清,慢慢的會長出很細的黑色絲狀物。真菌生長的比較慢,不象細菌那么容易被發(fā)現(xiàn),但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細胞就被污染了,也很難救活了。
RGM-1細胞系相關產品:RCC_7860細胞、MDA436細胞、HCC-1143細胞
OCI-Ly 18細胞系相關產品:8305C細胞、F81細胞、P-3J細胞
HCS-2/8細胞系相關產品:293 c18細胞、PVEC細胞、GM03570細胞
RBL 2H3細胞系相關產品:NCIH2023細胞、UPCI-SCC-90細胞、C4-2細胞
B16 F10細胞系相關產品:A-704細胞、253JBV細胞、LNCaP subline C4-2細胞
Human Embryonic Skin細胞系相關產品:BeWo細胞、UMUC3細胞、SUDHL1細胞
HEK293T/17細胞系相關產品:SKNSH細胞、University of Arizona Cell Culture-893細胞、SUM149PT細胞
P388.D1細胞系相關產品:SKHEP1細胞、BT 549細胞、U-87MG ATCC細胞
JB-6 Cl 30細胞系相關產品:U-343 MG細胞、EC-109細胞、V79細胞
HT-29/CX-1細胞系相關產品:231-luc細胞、PC-3/M細胞、HL60細胞
SKHEP-1細胞系相關產品:SNT-8細胞、NCI-H1436細胞、Human Microvascular Endothelial Cell line-1細胞
SK-SH-SY5Y細胞系相關產品:QGY-7701細胞、SKO007細胞、RS4;11細胞
NCI-H2087細胞系相關產品:SW962細胞、2B4細胞、KYSE30細胞
NCI-H1838 Adherent人非小細胞肺癌細胞系
HAC-84細胞系相關產品:Panc-3_27細胞、KNS62細胞、Hs-729-T細胞
NCI-H1563細胞系相關產品:HO-8910PM細胞、U87MG細胞、FHCRC-11細胞
GM-215細胞系相關產品:H2286細胞、KP-N-YN細胞、MonoMac 6細胞
GM-215細胞系相關產品:H2286細胞、KP-N-YN細胞、MonoMac 6細胞
CHG-5細胞系相關產品:SW1573細胞、A375.S2細胞、CL 1-5細胞
SUSM-1細胞系相關產品:NCIH2073細胞、Hs604T細胞、MKN45細胞
SF 295細胞系相關產品:MDA-MB 453細胞、SW-1116細胞、HuP-T3細胞
BC-028細胞系相關產品:FHC細胞、H446細胞、IAR20細胞
H1437細胞系相關產品:C918細胞、THP1細胞、HGC27細胞
Bowes melanoma cells細胞系相關產品:HCC-1187細胞、Panc327細胞、QGY-7701細胞
CoCL2細胞系相關產品:HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細胞、143BTK-細胞、J774A.1細胞
HUASMC細胞系相關產品:HC11細胞、SKLU01細胞、hTERT-HME1細胞
Co-115細胞系相關產品:RIN Cl-5F細胞、HCT-FET細胞、MDAMB415細胞
373 MG細胞系相關產品:OEC19細胞、MAVER1細胞、NCIH295R細胞
50.B1細胞系相關產品:TOV21G細胞、WIL2 S細胞、SW579細胞
DMS-53細胞系相關產品:HPDEC細胞、Hs 695.T細胞、HL-7702細胞
NCIH1963細胞系相關產品:C1498細胞、NR-8383細胞、ES2細胞
TE13細胞系相關產品:H1944細胞、GM05372細胞、CT26.CL25細胞
293 Ad5細胞系相關產品:MO59J細胞、639V細胞、NCIADR.RES細胞
Doubling time: ~50 hours (ATCC).細胞系相關產品:OV1/P細胞、HFL細胞、RBSMC細胞
NCIH2405細胞系相關產品:H-865細胞、SHG 44細胞、143TK-細胞
NRK 49F細胞系相關產品:MCA205細胞、YAC-1細胞、T-CAM2細胞
PM6細胞系相關產品:H-1694細胞、hEEC細胞、HCT116細胞
KYSE410細胞系相關產品:PTK-1細胞、HOS (TE85, Clone F5)細胞、WPE-int細胞
RH30SJ細胞系相關產品:End1/E6E7細胞、TCC-SUP細胞、HT22細胞
OCILY-10細胞系相關產品:P3-X63-Ag8-653細胞、WM 239A細胞、Cor L51細胞
MCF-12A細胞系相關產品:LSC-1細胞、SKHEP-1細胞、EB-2細胞
SUP-M2細胞系相關產品:SW1271細胞、D283MED細胞、Baby Hamster Kidney-21細胞
WM 115細胞系相關產品:FU-OV-1細胞、N-2a細胞、BT325細胞
U2OS細胞系相關產品:Hela-Ap-1細胞、BIU-87細胞、KLN-205細胞
Hs675細胞系相關產品:H-1755細胞、Calf Pulmonary Artery 47細胞、Panc 1細胞
RPTEC/TERT1細胞系相關產品:PTK-2細胞、H1819細胞、NT2細胞
Caki-1細胞系相關產品:NPA-87細胞、NCIH929細胞、GM-3573細胞
HCT/Taxo1細胞系相關產品:NTERA2-D1細胞、RKN細胞、NW-MEL-38細胞
KOPN8細胞系相關產品:HCC 94細胞、OE-19細胞、BS-C-1細胞
INS-1細胞系相關產品:BALL1細胞、22Rv1細胞、COLO 206細胞
SUD-4細胞系相關產品:CHOK1細胞、H4-II-E-C3細胞、CHL-IU細胞
HS 1.Tes細胞系相關產品:MCFs細胞、NCI-747細胞、NCI-H-69細胞
SJ-Rh 30細胞系相關產品:LLC PK1細胞、H716細胞、RKN細胞
HTR8/SVneo細胞系相關產品:COS7細胞、P19細胞、Hela-Ap-1細胞
MDA2B細胞系相關產品:WC00079細胞、LC1/Sq細胞、NCTC clone 1469細胞
MAD109細胞系相關產品:Karpas422細胞、S16細胞、Hs-940細胞
NCI-H1838 Adherent人非小細胞肺癌細胞系
MFE296細胞系相關產品:SU-DHL1細胞、CCD-841CoTr細胞、HBL1細胞
HCT-FET細胞系相關產品:KYSE 50細胞、H3255細胞、HCT-8細胞
BHT-101細胞系相關產品:MSTO211H細胞、DV-90細胞、JeKo 1細胞
NCI H82細胞系相關產品:SP2/0 Ag-14細胞、SNU668細胞、Clone Y-1細胞
HSC 3細胞系相關產品:P1-Raji細胞、YES2細胞、SNU368細胞
TM-4細胞系相關產品:OAC-P4C細胞、HEC-1-B細胞、CCD966SK細胞
HEK 293-F細胞系相關產品:TR 146細胞、Chang liver細胞、RPMI No. 1846細胞
639-V細胞系相關產品:PA-TU-8988S細胞、CAL27細胞、NCI-H1435細胞
COR-L105細胞系相關產品:HSC1細胞、NCIH1435細胞、Tca-8113細胞
NCI-H2141細胞系相關產品:KTA-7細胞、Panc2_03細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細胞
MZ-CRC-1細胞系相關產品:H2030細胞、M-O7e細胞、HO8910細胞
HCPEpiC細胞系相關產品:PT-67細胞、U-343-MG細胞、Kit-225細胞
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