"SW1417 Adherent人結腸腺癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
懸浮細胞不容易轉染:懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面,在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長,如淋巴細胞。在實驗室經常會遇到懸浮細胞的轉染,其和貼壁細胞轉染還是有很大不同的。目前大多數實驗室用的是脂質體類的轉染試劑,脂質體轉染是基于電荷吸引原理,先形成脂質體-DNA復合物,散布在細胞周圍,然后通過細胞的內吞作用,將目的基因導入細胞內,而脂質體復合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞高出很多倍,所以,脂質體轉染時懸浮細胞的轉染效率要明顯低于貼壁細胞。其次,脂質體試劑的毒性較大,這就使得懸浮細胞的轉染更為困難了。另外,懸浮細胞不易培養(yǎng),易死亡,也給細胞轉染造成了一定的困難。為了提高懸浮細胞的轉染效率,可以使用非脂質體的轉染試劑,如納米材料的。也可以使用電轉染方法,針對懸浮細胞等難轉染細胞還是挺不錯的,電擊對細胞有一定的損傷,選用具有細胞膜修復功能的電轉染試劑,可以將電擊對細胞的傷害降到最低,懸浮細胞不易轉染,選對試劑及良好的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關鍵。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
SW1417 Adherent人結腸腺癌細胞系
細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細胞(絕大部分1min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續(xù)這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化;什么算是消化好了呢?不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經可以了,很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細胞與培養(yǎng)基質材料的附著已經消失了,細胞之間的附著也已經消失了,細胞已經獨立分布了(雖然沒有呈現很廣的離散分布)。這個時候應該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性,無論死活的細胞都是如此,你可以嘗試,準備100%的單個細胞懸液,貼壁后觀察細胞,仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑,這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質上脫離下來,這個時候即使是成片的(比如Calu-3細胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個細胞左右),是正常的,不要試圖再去延長消化時間,或者像有的同學那樣吹打1h,等待單細胞懸液出現。
GM0637細胞系相關產品:SUM149細胞、TOV112D細胞、Leukemic 1210細胞
H2452細胞系相關產品:BrCL12細胞、PTK2細胞、EB2細胞
SH-SY5Y Parental細胞系相關產品:KYSE-70細胞、YD38細胞、Calu6細胞
細胞傳代方法:1:2—1:4傳代,每周換液1-2次
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系
L(TK-)細胞系相關產品:MC57G細胞、SUNE-1細胞、RKO-AS-45-1細胞
HIBEpiC細胞系相關產品:HEK 293A細胞、Normal Rat Kidney-52E細胞、H2107細胞
CMT.64細胞系相關產品:Mv.1.Lu細胞、NCI-H2135細胞、Mel-RM細胞
細胞生長特性:貼壁生長
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細胞形態(tài)特性:上皮細胞
【細胞培養(yǎng)中原蟲的污染情況總結】原蟲:培養(yǎng)液可輕微渾濁,顯微鏡下那些細小的點狀物數量非常多,輕微活動,細胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢,而且細胞狀態(tài)不好,邊緣不清楚,細胞不透亮。他們與細胞可共生但會與細胞爭奪營養(yǎng)。這種共生是非常普遍的,但他們的數量小,細胞站優(yōu)勢所以不會影響到細胞的正常生長,只有當他們到達一定的數量時就會影響到細胞的生長,最終形成惡性循環(huán)。污染的可能原因:可能原因很多比如配液消毒問題、操作問題、環(huán)境問題等等關于培養(yǎng)基的無菌狀況,取培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶中(不加細胞),37度試培養(yǎng)一段時間后觀察。如果沒有細菌生長就是操作的問題。也可以在培養(yǎng)基中事先加入雙抗(酸鏈霉素和芐青霉素)。但雙抗有時會影響細胞的狀態(tài),所以在做轉染、檢測細胞某項指標前一定要撤去雙抗,以避免影響實驗結果。1)孵箱應定期用三氧機消毒或者紫外光照射,并用酒精和新潔爾滅試擦孵箱同時孵箱內的水應是三蒸水;2)超凈臺\取材\器材\培養(yǎng)液\培養(yǎng)瓶\操作等因素;3)超凈臺的風機不能過大,風機到6-8格。否則也可能能致霉菌污染;4)無菌室經甲醛熏蒸消毒后,可用同等量的噴灑中和,約幾小時即可進入操作。
Hs-600-T細胞系相關產品:H-1781細胞、TMK1細胞、FM88細胞
COLO 738細胞系相關產品:T 98 G細胞、Hs 688(A).T細胞、P560細胞
Caco-2/BBe細胞系相關產品:TB-1 Lu細胞、NB4細胞、TE 671細胞
MPC 11細胞系相關產品:KLE細胞、H1105細胞、SEG-1細胞
NCIH292細胞系相關產品:HS 683T細胞、Beta-TC-6細胞、BRL細胞
PL12細胞系相關產品:16HBE140細胞、PA-TU-8988S細胞、HIBEpiC細胞
Malme3M細胞系相關產品:NCIH1993細胞、MDCK2細胞、HEP3B2細胞
Caov-4細胞系相關產品:IR983F細胞、Cor L51細胞、SW13細胞
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Malme-3 M細胞系相關產品:KNS-62細胞、NS1-Ag 4/1細胞、SRS-82細胞
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C-33 A細胞系相關產品:ST2細胞、KRC-Y細胞、VP 229細胞
High-5細胞系相關產品:NCIH446細胞、CL-40細胞、HCC-1359細胞
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MD Anderson-Metastatic Breast-436細胞系相關產品:GLRK 13細胞、EJ1細胞、HTR-8/SVneo細胞
MCF 10A細胞系相關產品:OCI-Ly01細胞、HBdSMC細胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞
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NOZAWA細胞系相關產品:ME180細胞、NCI-SNU-878細胞、HepaRG細胞
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CAL33細胞系相關產品:RPMI-1846細胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細胞、F-81細胞
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B16細胞系相關產品:Panc-08.13細胞、CCD33Co細胞、Panc-8_13細胞
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SKNBE(1)細胞系相關產品:WERI-Rb 1細胞、HCC-1588細胞、NBL_S細胞
HECV細胞系相關產品:CCD 19Lu細胞、NCTC 3960細胞、PANC-28細胞
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CHO K1細胞系相關產品:CAL 78細胞、NCIH1623細胞、NCI-H82細胞
Mc Ardle 7777細胞系相關產品:PLC-PRF-5細胞、MBMEC細胞、SUDHL-6細胞
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H838細胞系相關產品:E.G7-OVA細胞、Hs 600.T細胞、AML-2細胞
PC-3M 2B4細胞系相關產品:KYSE510細胞、Reuber-H-35 hepatoma細胞、Transformed Human Liver Epithelial-2細胞
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McCoy B細胞系相關產品:SNU16細胞、MMAc.SF細胞、HCC0095細胞
Caco-2/BBe細胞系相關產品:TB-1 Lu細胞、PLC-PRF-5細胞、E6-1細胞
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