"GP2d Adherent人結(jié)腸癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
傳代的操作步驟注意事項:1)操作前要洗手,進入超凈臺后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。2)點燃酒精燈,操作在火焰附近進行,耐熱物品要經(jīng)常在火焰上燒灼,金屬器械燒灼時間不能太長,以免退火,并冷卻后才能夾取組織,吸取過營養(yǎng)液的用具不能再燒灼,以免燒焦形成碳膜。3)操作動作要準確敏捷,但又不能太快,以防空氣流動,增加污染機會。4)不能用手觸已消毒器皿的工作部分,工作臺面上用品要布局合理。5)瓶子開口后要盡量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。貼壁細胞傳代的操作步驟:1)吸除培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液。2)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許,以能覆滿瓶底為限。3)置溫箱中2-5分鐘,當發(fā)現(xiàn)細胞質(zhì)回縮,細胞間隙增大后,立即終止消化。4)吸除消化液,向瓶內(nèi)注入Hanks液數(shù)毫升,輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶,把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細胞時,動作要輕,以免把已松動的細胞沖掉流失,如用胰蛋白酶液單獨消化,吸除胰蛋白酶液后,可不用Hanks液沖洗,直接加入培養(yǎng)液。5)用吸管吸取營養(yǎng)液輕輕反復(fù)吹打瓶壁細胞,使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。6)計數(shù)板計數(shù)后,把細胞懸液分成等份分裝入數(shù)個培養(yǎng)瓶中,置溫箱中培養(yǎng)。懸浮細胞傳代的操作步驟:1)吸出細胞培養(yǎng)液,放入離心管中,離心1000rpm5分鐘。2)吸掉上清液,加入適量之新鮮培養(yǎng)基,混和均勻后,依稀釋比例轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中,以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
GP2d Adherent人結(jié)腸癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
很多朋友討論細胞培養(yǎng)問題,見到很多很好的經(jīng)驗總結(jié),這里說一些我個人的經(jīng)驗,因為一些比較特殊的原因,我自己培養(yǎng)接觸過近300種細胞,常用于做實驗的,累積有百余種,可以說遇到過許多各式各樣古怪的細胞。這里挑細胞消化開始做我的篇專題,并不是因為細胞消化最重要,而是近期看到大家頻繁討論這個話題,我就拋磚引玉,下面幾點拙見,可能與其它朋友總結(jié)的一些經(jīng)驗有點出入,僅供大家參考。許多同學對細胞消化做了許多研究,得出了很多有價值的經(jīng)驗,也見到很多人的困惑。其實細胞培養(yǎng),尤其是細胞系的培養(yǎng),就消化而言,不是太難,做得多了,善于總結(jié)經(jīng)驗,就能把細胞越養(yǎng)越好。一般的程序步驟,細節(jié)操作,我這里就不講了,只講一些基本操作背后的知識,如果不對之處,歡迎指正,總結(jié)下來,細胞培養(yǎng)中消化很重要,但其實消化并不是細胞培養(yǎng)的關(guān)鍵所在(雖然很重要),關(guān)鍵所在是細胞來源,血清質(zhì)量和水源(自己配制溶液的話)。我看到版上許多人養(yǎng)細胞遇到各種各樣的問題,很多時候bottleneck沒有找到,雖然通過其它方法有所改善,但仍然是事倍功半。因為人們往往注意自己的操作,總覺得自己沒有經(jīng)驗,而忽視試劑,溶液尤其是細胞的質(zhì)量,后者其實才是許多細胞培養(yǎng)實驗室常見的問題。
UACC-893細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HGC27細胞、NCIH810細胞、NB19細胞
PC-3M 2B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE510細胞、Reuber-H-35 hepatoma細胞、Transformed Human Liver Epithelial-2細胞
NCI-441細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SGC-996細胞、HCC-1569細胞、A 253細胞
細胞傳代方法:1:2—1:3傳代,每周換液2—3次
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
Medical University of Graz-Chordoma 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEH2細胞、CA46細胞、B95-8細胞
Anip 973細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OE21細胞、CCD-966SK細胞、Co 115細胞
Co320細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOMEC細胞、H-508細胞、SU-DHL1細胞
細胞生長特性:貼壁生長
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細胞形態(tài)特性:上皮細胞
養(yǎng)了幾年細胞,說一點自己培養(yǎng)細胞方面的看法:1)培養(yǎng)細胞前,可以看看細胞特點說明書,包括細胞正常生長的狀態(tài)圖、傳代、培養(yǎng)基的類型等;2)不同細胞生長周期不同,有的生長很快,比如說MDA-MB-231,傳代的時候取離心懸液的十分之一就已經(jīng)足夠了,有的又是特別慢,等的人心焦,BT474就是,傳代是一分二,復(fù)蘇起始的時候兩周多才能長滿,所以就要在培養(yǎng)細胞的過程中多多摸索了;3)對于嬌弱的細胞,就得細心呵護了,胰酶消化不能過久,吹得時候要輕柔,離心時候也要注意轉(zhuǎn)速和時間,每天都要去看一下細胞,肉眼觀察培養(yǎng)基狀況、顯微鏡下觀察細胞生長狀況;4)凍存細胞復(fù)蘇后第二天更換一次培養(yǎng)基;5)培養(yǎng)箱隔一段時間徹底用酒精棉擦洗一次;6)養(yǎng)細胞的教訓(xùn):不能偷懶!細胞虐我千百遍,我待細胞如初戀。1)不管買的細胞、惠贈的細胞,剛拿到手趕緊做兩件事:檢測是否有支原體污染; 迅速擴增凍存;2)發(fā)現(xiàn)有污染迅速處理掉,特別是當你養(yǎng)了很多種細胞時; 細菌污染,真菌污染很容易發(fā)現(xiàn),支原體污染的話,細胞會長的慢,買個支原體檢測的kit定期檢測一下;3)傳代細胞日常的值日清潔是必須的,此外還要定期熏蒸;4)細胞的傳代一定要規(guī)律,保持相同的confluency和傳代時間間隔,不要隨心所欲或者拖延;5)注意個人衛(wèi)生。
Suzhou Human Glioma-44細胞系相關(guān)產(chǎn)品:52PE細胞、H-157細胞、B16 melanoma F10細胞
Neuro-2a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBSMC細胞、IOSE80細胞、Madin Darby Bovine Kidney細胞
BC-021細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Highly Aggressively Proliferating Immortalized細胞、BRL細胞、MDA-MB 453細胞
CORL88細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1819細胞、Vx2細胞、MESSA/Dx5細胞
MonoMac1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC-3細胞、95C細胞、C38細胞
H676B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM T4細胞、AN3細胞、ROS1728細胞
SNK-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Turbot Embryonic Cell line細胞、HepaRG細胞、HL1細胞
OCILY3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Madison細胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞、HEK AD293細胞
GM03190細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1092細胞、H69細胞、WiDr/S細胞
SK-Mel 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GMK,BSC-1細胞、YAC細胞、Tb 1 Lu細胞
A549/ATCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DU-4475細胞、ReNcell CX細胞、CCD-841CoTr細胞
3T6-Swiss albino細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-9/S1細胞、STC-1細胞、G361細胞
MSB1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LIPF178C細胞、HGC-27細胞、KPL1細胞
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HOCF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Psi2-DAP細胞、RPMI1788細胞、Clone Y1細胞
NCIH441細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ASH-3細胞、HA細胞、A-204細胞
NCI-H929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:S3-HeLa細胞、Glioma 261細胞、NCI-H865細胞
NCI-H929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:S3-HeLa細胞、Glioma 261細胞、NCI-H865細胞
C28/I2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO/dhFr-細胞、Hos TE-85細胞、526 mel細胞
HDQP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tissue Culture-1細胞、HuP-T4細胞、Ect1/E6E7細胞
OCUM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-157細胞、NCI-H1666細胞、HEK (AD293)細胞
143BTK-細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H9細胞、NCIH1770細胞、HCEC細胞
SNU-484細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T.T細胞、KTC-1細胞、EBNA293細胞
H1623細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCILY7細胞、HO-8910PM細胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞
SKOV-433細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1703細胞、Hs 729.T細胞、MC-26細胞
SUM 149細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Detroit-562細胞、CHL1細胞、HT(H9)細胞
NALM 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-1386細胞、BT-549細胞、EC-109細胞
NCI-H522細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SJCRH30細胞、RIN-m 14B細胞、H2170細胞
OCILY10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLF-a細胞、RSMC細胞、C3H10T1/2 clone8細胞
IPLB-SF-21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Z-138細胞、COLO320 DM細胞、786O細胞
H2227細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARPE19細胞、TW01細胞、COLO 741細胞
McCoy B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU16細胞、NCIH1373細胞、BEL-7405細胞
BNL.CL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TFK-1細胞、MA-104細胞、NCIH244細胞
HEI-193細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HNSC細胞、NIH:OVCAR-5細胞、NCI-H1819細胞
SK-N-BE(2)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2023細胞、NEC8細胞、CALU 1細胞
SNU484細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs819T細胞、NCIH64細胞、OV-2008細胞
Cates-1B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHK 21細胞、AAV-293細胞、DC 2.4細胞
T1-73細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PM6細胞、C12細胞、CL MC/9細胞
MDA-MB-231 #4175細胞系相關(guān)產(chǎn)品:REC 1細胞、EBNA293細胞、ROS17/28細胞
MOLT-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞、HT 144細胞、NCIH1437細胞
E.G7-OVA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EOC20細胞、CAKI 1細胞、AD-293細胞
Michigan Cancer Foundation-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM-239細胞、Hs 888Lu細胞、SW-13細胞
hTERT-HME-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293-EBNA細胞、HGF-1細胞、KOPN-8細胞
SK-NSH細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV-362細胞、HCC 38細胞、C4-1細胞
NCI-H2172細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pt K1細胞、NPC-TW 039細胞、Detroit 562細胞
SK Hep1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-324MED細胞、Murine Lung Epithelial-12細胞、CCD841CoTr細胞
NCI-H82細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VSC4.1細胞、PT67細胞、H2108細胞
C166細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細胞、NCI-SNU-601細胞、NCI-H847細胞
WISH細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OLN 93細胞、OVCA433細胞、SW-1116細胞
MDA-MB-231 #4175細胞系相關(guān)產(chǎn)品:REC 1細胞、EBNA293細胞、ROS17/28細胞
IEC 18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H865細胞、alpha-TC1-6細胞、CL-40細胞
CCD-33Co細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMC細胞、SKNEP-1細胞、SBC3細胞
DHL10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1793細胞、TB-1 Lu細胞、32D CL3細胞
NCI660細胞系相關(guān)產(chǎn)品:87 MG細胞、NCI-H23細胞、MV 4;11細胞
HSC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC 61 5.3細胞、HLMVEC細胞、HT1376細胞
H-711細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03570細胞、SNK1細胞、NIT-1細胞
GP2d Adherent人結(jié)腸癌細胞系
HemECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Beta-TC-6細胞、H-1184細胞、COS-7細胞
NK-10A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63細胞、EFO 27細胞、LL/2(LLc1)細胞
MC-CAR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NSH細胞、SKLU1細胞、BE2M17細胞
He La細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C81-61細胞、EST50細胞、M210B4細胞
NK92-MI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPP 89細胞、CHP 126細胞、BRL3A細胞
AR4-2J細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Epithelioma Papulosum Cyprini細胞、HNEpC細胞、HS0578T細胞
High5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C2BBe 1細胞、Kit225 K6細胞、BrCL15細胞
Kato-III細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos 1細胞、Mel-RM細胞、ME180細胞
VeroE6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HANK細胞、SF 767細胞、A-20細胞
FAK+/+細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1869細胞、SLK細胞、KHYG1細胞
NCIH187細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J774.A1細胞、HO-8910細胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細胞
BC-021細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Highly Aggressively Proliferating Immortalized細胞、M14細胞、DV90細胞
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