"BT-483 Adherent人乳腺導管癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
懸浮細胞不容易轉染:懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面,在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長,如淋巴細胞。在實驗室經(jīng)常會遇到懸浮細胞的轉染,其和貼壁細胞轉染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質體類的轉染試劑,脂質體轉染是基于電荷吸引原理,先形成脂質體-DNA復合物,散布在細胞周圍,然后通過細胞的內吞作用,將目的基因導入細胞內,而脂質體復合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞高出很多倍,所以,脂質體轉染時懸浮細胞的轉染效率要明顯低于貼壁細胞。其次,脂質體試劑的毒性較大,這就使得懸浮細胞的轉染更為困難了。另外,懸浮細胞不易培養(yǎng),易死亡,也給細胞轉染造成了一定的困難。為了提高懸浮細胞的轉染效率,可以使用非脂質體的轉染試劑,如納米材料的。也可以使用電轉染方法,針對懸浮細胞等難轉染細胞還是挺不錯的,電擊對細胞有一定的損傷,選用具有細胞膜修復功能的電轉染試劑,可以將電擊對細胞的傷害降到最低,懸浮細胞不易轉染,選對試劑及良好的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關鍵。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
BT-483 Adherent人乳腺導管癌細胞系
細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
常規(guī)的細胞實驗(增殖,凋亡,遷移,分化之類的),受消化影響不是很大,如果不用胰酶去孵育而使用潤洗的方法消化的話(難消化細胞例外)。但少數(shù)實驗,比如病毒包裝,對細胞代數(shù),對細胞狀態(tài)要求極高。這個時候,胰酶消化,就是潤洗,都會對細胞包裝病毒的能力有影響,傳代次數(shù)一多,細胞包裝能力就會逐漸下降(當然也有其它因素影響包裝效率)。這個時候都不用胰酶消化,用一些鹽溶液(不是EDTA液)即可。這些鹽溶液通過影響ECM相關酶的活性,來使得細胞脫離基質附著表面,但不切割任何蛋白;EDTA的作用。許多人不用胰酶,只用EDTA,或者用trypsin/EDTA聯(lián)合作用。這里要明白,trypsin切割ECM的一些負責粘連和附著的蛋白,而EDTA通過螯合Ca離子,作用于Integrin的活性,所以EDTA的作用更加溫和。有的人在trypsin里添加一些EDTA,或者對付特別難消化的細胞,添加多一些EDTA,就是這個道理。一般不要試圖延長消化時間(如果10min還消化不徹底的話),而應該想其它辦法;PBS洗滌。消化之前用PBS洗滌,是常見的操作,因為Serum含有抑制trypsin的蛋白。但這里面也有學問可以講,對于一些難消化細胞,那么可以配制不含Ca,Mg離子的PBS,因為這些離子也會抑制trypsin的活性。但對于絕大部分胰酶或者EDTA溶液潤洗即可消化的細胞,不需要配制如此溶液。
NFS 60細胞系相關產品:CHO細胞、NCI-SNU-761細胞、Malme3M細胞
CCRF/CEM細胞系相關產品:M-1細胞、PL 5細胞、DHBE細胞
NCI522細胞系相關產品:MDA-kb2細胞、Epithelioma Papulosum Cyprini細胞、OCI-LY-19細胞
細胞傳代方法:1:2傳代,2—3天換液一次
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
HEK-293A細胞系相關產品:ECV-304細胞、U-373 MG細胞、KPL-4細胞
HEK-293A細胞系相關產品:ECV-304細胞、U-373 MG細胞、KPL-4細胞
SCC9細胞系相關產品:NCI-H2135細胞、CCD-841-CoTr細胞、NIH:OVCAR-10細胞
細胞生長特性:貼壁生長
BT-483 Adherent人乳腺導管癌細胞系
細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣
體內細胞培養(yǎng)及其操作步驟:【瘤細胞懸液接種】1)無菌選取生長良好(有光澤,淡紅色)瘤組織或對數(shù)生長期培養(yǎng)瘤細胞;2)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨,經(jīng)80~100目篩網(wǎng)過濾成細胞懸液;3)培養(yǎng)細胞應用PBS洗兩遍;4)計數(shù)并調整細胞濃度至107~108/ml;5)常規(guī)消毒后,于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細胞懸液(0.1ml/部位,>106細胞)。初次接種成功率低,細胞數(shù)盡可能多一些;6)次日注意觀察動物一般情況。初次接種一般有一段較長的潛伏期,以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短,最后固定為一個相對穩(wěn)定的時間?!靖顾龅慕⑴c腹水瘤的接種】將實體瘤細胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位,引起腹水,腹水中含有瘤細胞,將這種腹水反復傳代,即可成為腹水瘤。初次傳代時,腹水常呈血性(含大量紅細胞),反復傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過程如下。1)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細胞離心和洗滌,進行細胞計數(shù);2)消毒動物,左下腹穿刺接種106腹水瘤細胞;3)接種腹水瘤細胞后約7~12d,待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部,用9號針頭抽取腹水,也可行腹部解剖后,用滴管吸取。每只小鼠可抽3~5ml;4)抽取的腹水經(jīng)3000rpm離心15min,收集上清,分裝凍存?zhèn)溆谩?/span>
Dysplastic Oral Keratinocyte細胞系相關產品:ACC2細胞、SK-RC-42細胞、SKMEL1細胞
CACO2細胞系相關產品:PCI:SG231細胞、HFB細胞、GBCSD細胞
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RPMI-6666細胞系相關產品:SKG3A細胞、MC-116細胞、Madin-Darby Bovine Kidney細胞
BC-025細胞系相關產品:Ramos G6.C10細胞、Human Microglia Clone 3細胞、NCI-H748細胞
BTI-Tn-5B1-4細胞系相關產品:RMC細胞、H1581細胞、OKT 3細胞
MDA-330細胞系相關產品:SPC-A-1細胞、H87細胞、10RGB細胞
NOK細胞系相關產品:Biologics Standards-Cercopithecus-1細胞、RPMI 1846細胞、DoHH2細胞
Panc 04.03細胞系相關產品:Mono-Mac-1細胞、T2(174 x CEM.T2)細胞、L428細胞
NK92MI細胞系相關產品:KYSE 450細胞、Biologics Standards-Cercopithecus-1細胞、Lu99A細胞
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SUNE1細胞系相關產品:GM06141B細胞、NCIH1930細胞、NCIH446細胞
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SNU739細胞系相關產品:CF-PAC1細胞、149 PT細胞、SNU-484細胞
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HEp-2細胞系相關產品:Jurkat-E6細胞、HCC38細胞、beta TC6細胞
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H647ell細胞系相關產品:SMMC-7721細胞、C3H10T1/2細胞、OCIAML4細胞
Namalva細胞系相關產品:Nakata-1細胞、FF-WT-BJ細胞、Tca-83細胞
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BE2M17細胞系相關產品:LLC-PK-1細胞、KU 19-19細胞、Ketr-3細胞
Line 870 Emory University-4細胞系相關產品:CCD841CoTr細胞、U343細胞、Wien-133細胞
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Hs606細胞系相關產品:JHH7細胞、HDMEC細胞、Panc 8.13細胞
H-1703細胞系相關產品:Porcine Kidney-13細胞、IOSE 80細胞、U343MG細胞
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JROECL 21細胞系相關產品:KATOIII細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-231細胞、MeT5A細胞
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NS-1細胞系相關產品:MADB 106細胞、MLOY4細胞、KYSE-140細胞
NCIH1693細胞系相關產品:C4-2 B細胞、Metastatic Variant-522細胞、COLO-320DM細胞
TI-73細胞系相關產品:Hep 3B2.1-7細胞、KS-SLK細胞、P3J.HR1K細胞
H-2227細胞系相關產品:HT1197細胞、HUT 125細胞、J.E6-1細胞
BJA-B-1細胞系相關產品:GES1細胞、OVCAR-10細胞、SLMT-1細胞
NCI-H711細胞系相關產品:P3/X63/Ag8細胞、BEL-7405細胞、EoL-1-cell細胞
MNNG細胞系相關產品:I90細胞、Clone 929細胞、SW 839細胞
RAW264.7細胞系相關產品:SK MEL 5細胞、U-266細胞、Panc02-H0細胞
Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細胞系相關產品:PG-4細胞、MESSA-DX5細胞、RCC4細胞
CCD-841-CoN細胞系相關產品:DOK細胞、SK MEL 28細胞、LK 2細胞
SW-780細胞系相關產品:U-251 MG細胞、Kasumi 1細胞、ID8細胞
IMR32細胞系相關產品:Tu686細胞、TE8細胞、266 Bl細胞
LA-N-6細胞系相關產品:NCIH1781細胞、HLEC-SRA 01/04細胞、KLN 205細胞
AMO-1細胞系相關產品:Th17細胞、SSP-25細胞、VP303細胞
NCIH1993細胞系相關產品:3AA細胞、KPL4細胞、HUV-EC-C細胞
Me Wo細胞系相關產品:MDAMB453細胞、SUM 159PT細胞、SW 1417細胞
RCM1細胞系相關產品:J-82細胞、RMS 1598細胞、Laboratory of Allergic Diseases 2細胞
STO細胞系相關產品:NCIH1092細胞、WEHI3B細胞、H-146細胞
H-64細胞系相關產品:IOSE-80細胞、RDES細胞、HPASMC細胞
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Vero 76 clone E-6細胞系相關產品:SK HEP 01細胞、JEKO細胞、SKNSH細胞
SUDHL16細胞系相關產品:NK92-MI細胞、ARO81-1細胞、NCIH146細胞
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NPA87細胞系相關產品:DU 145細胞、Sc-1細胞、SHEP1細胞
UMNSAH-DF1細胞系相關產品:PC10細胞、BE(2)-M17細胞、CAL-12T細胞
HRCEC細胞系相關產品:Calu3細胞、McArdle RH-7777細胞、OCI-Ly 10細胞
MCM細胞系相關產品:P-36細胞、C3H 10T1/2細胞、MFE280細胞
HF-91細胞系相關產品:TE-7細胞、10T1/2細胞、Ramos-RA1細胞
Transformed Human Liver Epithelial-3細胞系相關產品:NRCC細胞、108CC15細胞、PF382細胞
CWR22R細胞系相關產品:EAhy926細胞、CCRF/CEM-C7細胞、MHCC97L細胞
Swiss 3T3細胞系相關產品:JROECL 19細胞、LLC-MK2細胞、FD-LSC-1細胞
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