"H4 Adherent人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:H4細(xì)胞系建系于1973年。它衍生于一個(gè)患神經(jīng)膠質(zhì)瘤的37歲病人的腦組織。該細(xì)胞的致瘤特性己經(jīng)被屏蔽,細(xì)胞接種動(dòng)物一般不產(chǎn)生腫瘤結(jié)節(jié)。該細(xì)胞具有修復(fù)MNNG損傷5型腺病毒的能力。
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
懸浮細(xì)胞不容易轉(zhuǎn)染:懸浮細(xì)胞是指細(xì)胞生長(zhǎng)不依賴支持物表面,在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長(zhǎng),如淋巴細(xì)胞。在實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常會(huì)遇到懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染,其和貼壁細(xì)胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理,先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物,散布在細(xì)胞周圍,然后通過細(xì)胞的內(nèi)吞作用,將目的基因?qū)爰?xì)胞內(nèi),而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細(xì)胞的接觸機(jī)會(huì)比懸浮細(xì)胞高出很多倍,所以,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時(shí)懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細(xì)胞。其次,脂質(zhì)體試劑的毒性較大,這就使得懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外,懸浮細(xì)胞不易培養(yǎng),易死亡,也給細(xì)胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提高懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率,可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑,如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法,針對(duì)懸浮細(xì)胞等難轉(zhuǎn)染細(xì)胞還是挺不錯(cuò)的,電擊對(duì)細(xì)胞有一定的損傷,選用具有細(xì)胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑,可以將電擊對(duì)細(xì)胞的傷害降到最低,懸浮細(xì)胞不易轉(zhuǎn)染,選對(duì)試劑及良好的細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
H4 Adherent人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
常規(guī)的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)(增殖,凋亡,遷移,分化之類的),受消化影響不是很大,如果不用胰酶去孵育而使用潤(rùn)洗的方法消化的話(難消化細(xì)胞例外)。但少數(shù)實(shí)驗(yàn),比如病毒包裝,對(duì)細(xì)胞代數(shù),對(duì)細(xì)胞狀態(tài)要求極高。這個(gè)時(shí)候,胰酶消化,就是潤(rùn)洗,都會(huì)對(duì)細(xì)胞包裝病毒的能力有影響,傳代次數(shù)一多,細(xì)胞包裝能力就會(huì)逐漸下降(當(dāng)然也有其它因素影響包裝效率)。這個(gè)時(shí)候都不用胰酶消化,用一些鹽溶液(不是EDTA液)即可。這些鹽溶液通過影響ECM相關(guān)酶的活性,來使得細(xì)胞脫離基質(zhì)附著表面,但不切割任何蛋白;EDTA的作用。許多人不用胰酶,只用EDTA,或者用trypsin/EDTA聯(lián)合作用。這里要明白,trypsin切割ECM的一些負(fù)責(zé)粘連和附著的蛋白,而EDTA通過螯合Ca離子,作用于Integrin的活性,所以EDTA的作用更加溫和。有的人在trypsin里添加一些EDTA,或者對(duì)付特別難消化的細(xì)胞,添加多一些EDTA,就是這個(gè)道理。一般不要試圖延長(zhǎng)消化時(shí)間(如果10min還消化不徹底的話),而應(yīng)該想其它辦法;PBS洗滌。消化之前用PBS洗滌,是常見的操作,因?yàn)镾erum含有抑制trypsin的蛋白。但這里面也有學(xué)問可以講,對(duì)于一些難消化細(xì)胞,那么可以配制不含Ca,Mg離子的PBS,因?yàn)檫@些離子也會(huì)抑制trypsin的活性。但對(duì)于絕大部分胰酶或者EDTA溶液潤(rùn)洗即可消化的細(xì)胞,不需要配制如此溶液。
NSH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:THC-8307細(xì)胞、LA-N-6細(xì)胞、HEK 293 EBNA細(xì)胞
MOLM16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:16-HBE14o細(xì)胞、CEM-CCRF細(xì)胞、HSF細(xì)胞
hUC-MSC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH378細(xì)胞、CHO-ori細(xì)胞、MXI細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:3傳代,每周換液2-3次。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC/CAR細(xì)胞、HEM-L細(xì)胞、HuH6細(xì)胞
PL11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHK細(xì)胞、Madin Darby Canine Kidney細(xì)胞、PF-382細(xì)胞
NTERA2-cloneD1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GL-261細(xì)胞、MB49細(xì)胞、SUNE 1細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
H4 Adherent人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣
體內(nèi)細(xì)胞培養(yǎng)及其操作步驟:【瘤細(xì)胞懸液接種】1)無菌選取生長(zhǎng)良好(有光澤,淡紅色)瘤組織或?qū)?shù)生長(zhǎng)期培養(yǎng)瘤細(xì)胞;2)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨,經(jīng)80~100目篩網(wǎng)過濾成細(xì)胞懸液;3)培養(yǎng)細(xì)胞應(yīng)用PBS洗兩遍;4)計(jì)數(shù)并調(diào)整細(xì)胞濃度至107~108/ml;5)常規(guī)消毒后,于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細(xì)胞懸液(0.1ml/部位,>106細(xì)胞)。初次接種成功率低,細(xì)胞數(shù)盡可能多一些;6)次日注意觀察動(dòng)物一般情況。初次接種一般有一段較長(zhǎng)的潛伏期,以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短,最后固定為一個(gè)相對(duì)穩(wěn)定的時(shí)間?!靖顾龅慕⑴c腹水瘤的接種】將實(shí)體瘤細(xì)胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位,引起腹水,腹水中含有瘤細(xì)胞,將這種腹水反復(fù)傳代,即可成為腹水瘤。初次傳代時(shí),腹水常呈血性(含大量紅細(xì)胞),反復(fù)傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過程如下。1)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細(xì)胞離心和洗滌,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù);2)消毒動(dòng)物,左下腹穿刺接種106腹水瘤細(xì)胞;3)接種腹水瘤細(xì)胞后約7~12d,待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部,用9號(hào)針頭抽取腹水,也可行腹部解剖后,用滴管吸取。每只小鼠可抽3~5ml;4)抽取的腹水經(jīng)3000rpm離心15min,收集上清,分裝凍存?zhèn)溆谩?/span>
JB6 Cl 30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-435細(xì)胞、HEY-A8細(xì)胞、NCIH1184細(xì)胞
SK-MES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:624-mel細(xì)胞、BBE細(xì)胞、MPP 89細(xì)胞
WM2664細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-172 MG細(xì)胞、P3J HR1-K細(xì)胞、KYSE 50細(xì)胞
hFOB 1.19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTR8細(xì)胞、MiaPaCa2細(xì)胞、THP-1(ATCC)細(xì)胞
P3-X63Ag8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC 2185細(xì)胞、Reuber H35細(xì)胞、H460細(xì)胞
H-498細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NHRF細(xì)胞、SNU368細(xì)胞、COLO 320 DM細(xì)胞
MCF-7/AdrR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI no 8226細(xì)胞、NCIH28細(xì)胞、HBE135-E6E7細(xì)胞
SW-780細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-251 MG細(xì)胞、Kasumi 1細(xì)胞、ID8細(xì)胞
FM88細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BaF3細(xì)胞、NCTC-1469細(xì)胞、SKO007細(xì)胞
HT-115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:32D.3細(xì)胞、HSMC細(xì)胞、A-172 MG細(xì)胞
CCC-HSF-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:McArdle RH-7777細(xì)胞、UMNSAH-DF-1細(xì)胞、2780細(xì)胞
SJSA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PECAPJ34細(xì)胞、HAC-84細(xì)胞、MDA.MB.435細(xì)胞
DU 145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fetal Human Lens-124細(xì)胞、McA-RH 8994細(xì)胞、U118-MG細(xì)胞
H4 Adherent人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系
COLO-357細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU449細(xì)胞、S91細(xì)胞、MM1.S細(xì)胞
NCI-H2030細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞、H-2591細(xì)胞、BIU-87/Adr細(xì)胞
SHEE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO320/DM細(xì)胞、SBC5細(xì)胞、Jurkat (clone E6-1)細(xì)胞
SHEE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO320/DM細(xì)胞、SBC5細(xì)胞、Jurkat (clone E6-1)細(xì)胞
SK-NMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Swiss 3T6細(xì)胞、PAI細(xì)胞、MAEC細(xì)胞
MCF-7/ADR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 62細(xì)胞、CRFK細(xì)胞、SCC9細(xì)胞
P3/ag細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HECCL-1細(xì)胞、NCI-HUT-292細(xì)胞、B-cell with DC Morphology細(xì)胞
U118-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SV-HUC細(xì)胞、brain-derived Endothelial cells.3細(xì)胞、GH 3細(xì)胞
NCTC 929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc02.03細(xì)胞、HPMEC細(xì)胞、S3 HeLa細(xì)胞
HSC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2081細(xì)胞、Nb2細(xì)胞、HUCEC細(xì)胞
MJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RN細(xì)胞、NCI-SNU-119細(xì)胞、Jurkat-FHCRC細(xì)胞
Hs895.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BMU-S1細(xì)胞、D10細(xì)胞、H1395細(xì)胞
NCI660細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:87 MG細(xì)胞、NCI-H23細(xì)胞、MV 4;11細(xì)胞
COLO 320F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:G-402細(xì)胞、IAR-20細(xì)胞、Immortalized Human Hepatocytes細(xì)胞
H727細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCM-1細(xì)胞、A2780/CP70細(xì)胞、NCI-H358細(xì)胞
SK-RC-42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LoMeT-ccRcc細(xì)胞、U87細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細(xì)胞
BHK-21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:QGP 1細(xì)胞、U266-B1細(xì)胞、SUM-190細(xì)胞
HB611細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTR8/SVneo細(xì)胞、Human Kidney-2細(xì)胞、HCFB(HCF)細(xì)胞
UT7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MEG01細(xì)胞、TE-671細(xì)胞、T/GHA-VSMC細(xì)胞
SUDHL5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T98-G細(xì)胞、NEC-8細(xì)胞、KP 4細(xì)胞
SUSM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2073細(xì)胞、Hs604T細(xì)胞、MKN45細(xì)胞
H-220細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Cor L51細(xì)胞、SV-HUC-1細(xì)胞、PK 15細(xì)胞
SK-MEL-2-LUC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VE細(xì)胞、CORL105細(xì)胞、B16-F10細(xì)胞
KHYG-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y3細(xì)胞、GM00346細(xì)胞、BALB 3T3 clone A31細(xì)胞
SKGIIIA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Strain L-929細(xì)胞、MDAMB415細(xì)胞、H1672細(xì)胞
G361mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VP 267細(xì)胞、HCC-202細(xì)胞、HPB/ALL細(xì)胞
SUM-149細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAMOS2G64C10細(xì)胞、HMEC-1細(xì)胞、KYSE-150細(xì)胞
Sf-21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KAT5細(xì)胞、MiaPaca.2細(xì)胞、PC10細(xì)胞
BT-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos (RA 1)細(xì)胞、H-1694細(xì)胞、MC-4細(xì)胞
NCI-H1672細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BL2141細(xì)胞、Turbot Embryonic Cell line細(xì)胞、OVCA432_Bast細(xì)胞
LA-795細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NR 8383細(xì)胞、HTori 3細(xì)胞、DHL6細(xì)胞
PC.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-NM-C細(xì)胞、AZ 521細(xì)胞、SK-NM-C細(xì)胞
D283MED細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lu99A細(xì)胞、HEK293S細(xì)胞、DoTc2細(xì)胞
OCI Ly10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL-1細(xì)胞、HD-LM-2細(xì)胞、A2780-CP細(xì)胞
TSU-Pr1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1568細(xì)胞、COLO-829細(xì)胞、R.K.13細(xì)胞
BEAS 2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA-2細(xì)胞、MM1.S細(xì)胞、NCI-HUT-125細(xì)胞
Japanese Tissue Culture-39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT-8細(xì)胞、Human Embryo Lung-1細(xì)胞、LLC-PK(1)細(xì)胞
8402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMCUB1細(xì)胞、BMDC細(xì)胞、WM 2664細(xì)胞
OCILY-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63-Ag8-653細(xì)胞、WM 239A細(xì)胞、Cor L51細(xì)胞
H1048細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IGROV1細(xì)胞、HT55細(xì)胞、NL20細(xì)胞
NCI-H1618細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3396細(xì)胞、H-1417細(xì)胞、SNU-1細(xì)胞
BC-021細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Highly Aggressively Proliferating Immortalized細(xì)胞、BRL細(xì)胞、MDA-MB 453細(xì)胞
H4 Adherent人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系
Human Melanoma Cell Bowes細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jeko1細(xì)胞、hEM15A細(xì)胞、Ca 9-22細(xì)胞
Mv1.Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-361細(xì)胞、H1975細(xì)胞、P3X63細(xì)胞
NCI-H676B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J82細(xì)胞、CPAE細(xì)胞、A-427細(xì)胞
OV3121細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BCP-1細(xì)胞、NCI-BL1339細(xì)胞、Hs294細(xì)胞
HCC-9204細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MNNGHOS細(xì)胞、Sp2/0-Ag-14細(xì)胞、FTC-133細(xì)胞
KLN-205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCS細(xì)胞、H1437細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-51細(xì)胞
H2228細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ocular Choroidal Melanoma-1細(xì)胞、N87細(xì)胞、210RCY3-Ag1.2.3細(xì)胞
LS513細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI Ly1細(xì)胞、A-10細(xì)胞、NCI-H102細(xì)胞
293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPA87細(xì)胞、HT-144細(xì)胞、A875細(xì)胞
P388D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF7ADR細(xì)胞、A549/ATCC細(xì)胞、MOVAS-1細(xì)胞
Hs 729T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA175細(xì)胞、BLO 11細(xì)胞、NCIH28細(xì)胞
WM2664細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-172 MG細(xì)胞、HSMC細(xì)胞、HM1900細(xì)胞
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