"Kuramochi Adherent人卵巢癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞培養(yǎng)更好經(jīng)驗(yàn)詳解:1)收到細(xì)胞,首先要鏡檢:觀察細(xì)胞形態(tài)是否正常,對(duì)于貼壁細(xì)胞則要注意看貼壁情況是否很好,觀察細(xì)胞密度,有疑議及時(shí)咨提供細(xì)胞的技術(shù)人員。 由于運(yùn)輸?shù)臅r(shí)間或者溫度的變化,很多貼壁細(xì)胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里生長(zhǎng)的狀態(tài)和平時(shí)會(huì)有點(diǎn)不一樣,主要是貼壁牢固問題。比如293T,平時(shí)貼壁就不是很牢,在裝滿的培養(yǎng)基瓶子里面,會(huì)發(fā)生大片的脫落,細(xì)胞聚集在一起,但是細(xì)胞生長(zhǎng)還是正常的,通過(guò)離心收集,加以胰酶的消化,重新打散,又可以正常的貼壁生長(zhǎng)。2)當(dāng)通過(guò)上一步的觀察,細(xì)胞初步?jīng)]有問題時(shí),進(jìn)行下一步操作。當(dāng)收到的細(xì)胞密達(dá)到80%左右時(shí),則處理如下:棄除瓶中大部分培養(yǎng)基,僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基;或更換新鮮的培養(yǎng)基,置于培養(yǎng)箱中,隨后每天觀察。 細(xì)胞在低于正常生長(zhǎng)溫度情況下,會(huì)調(diào)整為靜止期,或者慢速生長(zhǎng)期,恢復(fù)37度的環(huán)境至少3個(gè)小時(shí)左右,才能重新調(diào)整到接近對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的狀態(tài),在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期進(jìn)行細(xì)胞的傳代會(huì)大大增加傳代的成功率,和細(xì)胞的存活率。3)如果經(jīng)步觀察發(fā)現(xiàn)細(xì)胞密度超過(guò)90%,并且細(xì)胞狀態(tài)很好時(shí),則復(fù)溫后2個(gè)小時(shí)需要立即傳代。傳代的比例應(yīng)依據(jù)不同的細(xì)胞而定。對(duì)于生長(zhǎng)比較快,狀態(tài)穩(wěn)定,不易受外界影響的細(xì)胞可以一次多傳幾瓶;對(duì)于生長(zhǎng)較慢,細(xì)胞比較薄,狀態(tài)容易波動(dòng)的細(xì)胞類型,一次少傳些,每瓶細(xì)胞密度大些,便于穩(wěn)定生長(zhǎng)。至于一些比較陌生的細(xì)胞,次處理也可以依照第二種情況。
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
Kuramochi Adherent人卵巢癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代培養(yǎng)(消化法)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程【原理】細(xì)胞在培養(yǎng)瓶長(zhǎng)成致密單層后,已基本上飽和,為使細(xì)胞能繼續(xù)生長(zhǎng),同時(shí)也將細(xì)胞數(shù)量擴(kuò)大,就必須進(jìn)行傳代(再培養(yǎng))。傳代培養(yǎng)也是一種將細(xì)胞種保存下去的方法。同時(shí)也是利用培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行各種實(shí)驗(yàn)的必經(jīng)過(guò)程。懸浮型細(xì)胞直接分瓶就可以,而貼壁細(xì)胞需經(jīng)消化后才能分瓶。【材料和試劑】1)無(wú)菌生理緩沖液(PBS);2)胰酶-EDTA溶液(0.05%胰酶-0.53mM EDTA-4Na): 以10ml分裝于15 ml無(wú)菌離心管中,保存于–20℃,使用前放在37℃水槽回溫;3)新鮮培養(yǎng)基;4)無(wú)菌吸管/離心管/培養(yǎng)瓶【傳代前準(zhǔn)備操作】1)預(yù)熱培養(yǎng)用液:把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱;2)用75%酒精擦拭經(jīng)過(guò)紫外線照射的超凈工作臺(tái)和雙手;3)正確擺放使用的器械:保證足夠的操作空間,不僅便于操作而且可減少污染;4)點(diǎn)燃酒精燈:注意火焰不能太?。唬?準(zhǔn)備好將要使用的消毒后的空培養(yǎng)瓶;6)取出預(yù)熱好的培養(yǎng)用液,用酒精棉球擦拭好后方能放入超凈臺(tái)內(nèi);7)從培養(yǎng)箱內(nèi)取出細(xì)胞:注意取出細(xì)胞時(shí)要旋緊瓶蓋,用酒精棉球擦拭顯微鏡的臺(tái)面,再在鏡下觀察細(xì)胞;8)打開瓶口:將各瓶口一一打開,同時(shí)要在酒精燈上燒口消毒。
KNS42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV4II細(xì)胞、HCC0095細(xì)胞、NCI-H526細(xì)胞
NCIH460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc02-H0細(xì)胞、COLO-357細(xì)胞、NCIH292細(xì)胞
Hs 281.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-320-DM細(xì)胞、NCM460細(xì)胞、ARH-77細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:10傳代;每周換液2-3次
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
VM-CUB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC4細(xì)胞、MSCs(mUCMSCs)細(xì)胞、SW-948細(xì)胞
251MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-578T細(xì)胞、IMCD-3細(xì)胞、HN 4細(xì)胞
QGY-7701細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT 93細(xì)胞、CAL 12T細(xì)胞、U20S細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
Kuramochi Adherent人卵巢癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣
【細(xì)胞培養(yǎng)中原蟲的污染情況總結(jié)】原蟲:培養(yǎng)液可輕微渾濁,顯微鏡下那些細(xì)小的點(diǎn)狀物數(shù)量非常多,輕微活動(dòng),細(xì)胞雖然可以生長(zhǎng)但繁殖速度卻明顯減慢,而且細(xì)胞狀態(tài)不好,邊緣不清楚,細(xì)胞不透亮。他們與細(xì)胞可共生但會(huì)與細(xì)胞爭(zhēng)奪營(yíng)養(yǎng)。這種共生是非常普遍的,但他們的數(shù)量小,細(xì)胞站優(yōu)勢(shì)所以不會(huì)影響到細(xì)胞的正常生長(zhǎng),只有當(dāng)他們到達(dá)一定的數(shù)量時(shí)就會(huì)影響到細(xì)胞的生長(zhǎng),最終形成惡性循環(huán)。污染的可能原因:可能原因很多比如配液消毒問題、操作問題、環(huán)境問題等等關(guān)于培養(yǎng)基的無(wú)菌狀況,取培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶中(不加細(xì)胞),37度試培養(yǎng)一段時(shí)間后觀察。如果沒有細(xì)菌生長(zhǎng)就是操作的問題。也可以在培養(yǎng)基中事先加入雙抗(酸鏈霉素和芐青霉素)。但雙抗有時(shí)會(huì)影響細(xì)胞的狀態(tài),所以在做轉(zhuǎn)染、檢測(cè)細(xì)胞某項(xiàng)指標(biāo)前一定要撤去雙抗,以避免影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。1)孵箱應(yīng)定期用三氧機(jī)消毒或者紫外光照射,并用酒精和新潔爾滅試擦孵箱同時(shí)孵箱內(nèi)的水應(yīng)是三蒸水;2)超凈臺(tái)\取材\器材\培養(yǎng)液\培養(yǎng)瓶\操作等因素;3)超凈臺(tái)的風(fēng)機(jī)不能過(guò)大,風(fēng)機(jī)到6-8格。否則也可能能致霉菌污染;4)無(wú)菌室經(jīng)甲醛熏蒸消毒后,可用同等量的噴灑中和,約幾小時(shí)即可進(jìn)入操作。
Clone 15 HL-60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-578Bst細(xì)胞、CW-2細(xì)胞、KU-19-19細(xì)胞
hTERTHME1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-3細(xì)胞、PaCa2細(xì)胞、LY-R細(xì)胞
LS 123細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS1034細(xì)胞、GRSL細(xì)胞、YTMLC-90細(xì)胞
HCEC-B4G12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AX-Mel細(xì)胞、MNNG細(xì)胞、H-1975細(xì)胞
Transformed Human Liver Epithelial-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OKT3細(xì)胞、MOLM-13細(xì)胞、RAW264細(xì)胞
H647ell細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SMMC-7721細(xì)胞、C3H10T1/2細(xì)胞、OCIAML4細(xì)胞
Fetal Human Lens-124細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:bEnd.3[BEND3]細(xì)胞、A375-S2細(xì)胞、A-431細(xì)胞
SCC-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN 28細(xì)胞、SK-MEL-1細(xì)胞、OB2細(xì)胞
HS 1.Tes細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCFs細(xì)胞、NCI-747細(xì)胞、NCI-H-69細(xì)胞
C518細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES-SA/Dx-5細(xì)胞、SV40 MES 13細(xì)胞、HLE-SRA-01/04細(xì)胞
NOR10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-387細(xì)胞、SL-29細(xì)胞、UM-UC14細(xì)胞
Vx2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:697細(xì)胞、NCIH2196細(xì)胞、Psi-2 DAP細(xì)胞
Sup T-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA-2 cl.D1細(xì)胞、MC116細(xì)胞、SK-MEL-MeWo細(xì)胞
Kuramochi Adherent人卵巢癌細(xì)胞系
HCC-1187細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:High 5細(xì)胞、Wistar Institute-38細(xì)胞、OCI-Ly8細(xì)胞
SAOS 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EO771細(xì)胞、SU.86細(xì)胞、Toledo細(xì)胞
BCECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC403細(xì)胞、MCF-7/ADR-RES細(xì)胞、MDA-MB 468細(xì)胞
HSC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc3_27細(xì)胞、NCI-H498細(xì)胞、HuTu-80細(xì)胞
CEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細(xì)胞、HEK-293H細(xì)胞、H740細(xì)胞
Nthy-ori 3-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 636 T細(xì)胞、LYR細(xì)胞、L 929細(xì)胞
U373-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Melanoma Cell Bowes細(xì)胞、HCC1954細(xì)胞、Me-Wo細(xì)胞
JROECL 33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOCF細(xì)胞、BHK細(xì)胞、C3H10T1/2CL8細(xì)胞
SUM 102細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Swiss-3T3細(xì)胞、ID8/MOSEC細(xì)胞、NFS60細(xì)胞
HSC-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H69細(xì)胞、Co 205細(xì)胞、HKC細(xì)胞
U20-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-12F細(xì)胞、OPM-2細(xì)胞、HuT-102細(xì)胞
KPNRTBM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:32D clone3細(xì)胞、H 9細(xì)胞、CP-70細(xì)胞
DLD-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1419細(xì)胞、BGC-823細(xì)胞、LS1034細(xì)胞
CT26-clone 25細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRCV細(xì)胞、Hce8693細(xì)胞、SF 539細(xì)胞
MRC-V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Pancreatic Duct Epithelial細(xì)胞、HSC 3細(xì)胞、HO8910細(xì)胞
UMNSAH-DF 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EOL1細(xì)胞、SK.MEL.2細(xì)胞、H2052_MM細(xì)胞
MDA-MB-134 VI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:G292細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-33細(xì)胞、Plaepi 34細(xì)胞
OVCAR 432細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ME16C細(xì)胞、Sarcoma OSteogenic-2細(xì)胞、HEI193細(xì)胞
FAT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Dunn LM8細(xì)胞、IPLB-SF 21AE細(xì)胞、H1650_CO細(xì)胞
HuTu-80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Alpha Mouse Liver 12細(xì)胞、3T3-L1 ad細(xì)胞、Vero from pool #76細(xì)胞
HFLS-RA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Evsa-T細(xì)胞、J774 A.1細(xì)胞、RAW 264.7細(xì)胞
HCoEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P36細(xì)胞、C8D1A細(xì)胞、HONE-1細(xì)胞
MDA MB 453細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-G63細(xì)胞、T47D:A細(xì)胞、C32-mel細(xì)胞
Panc-05.04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1353細(xì)胞、WEHI164細(xì)胞、EVSA/T細(xì)胞
HL60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MT-3 [Human leukocytes]細(xì)胞、Farage細(xì)胞、MDA MB 436細(xì)胞
SKMEL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-20細(xì)胞、GC-2spd(ts)細(xì)胞、BAC1.2F5細(xì)胞
Normal Rat Kidney-49F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-172MG細(xì)胞、Tu177細(xì)胞、HCC-1419細(xì)胞
Hs832.Tc細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero 76細(xì)胞、MDAMB231細(xì)胞、NCI-A549細(xì)胞
NCIN87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1876細(xì)胞、NCIH841細(xì)胞、NCI-H2405細(xì)胞
HC-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hca-F細(xì)胞、BT-483細(xì)胞、KATO 3細(xì)胞
HDF-a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-330細(xì)胞、HCC-38細(xì)胞、MILE SVEN 1細(xì)胞
Hs683T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1836細(xì)胞、PBL細(xì)胞、HTori3細(xì)胞
L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC-12細(xì)胞、HCC2108細(xì)胞、CHP 100細(xì)胞
Potorous tridactylus Kidney 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caco-2BBe細(xì)胞、Eca-109細(xì)胞、H157細(xì)胞
HS-294T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HF-91細(xì)胞、Hep 2細(xì)胞、LIXC002細(xì)胞
MCF10A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H647細(xì)胞、GP5d細(xì)胞、CV-1.K細(xì)胞
HS-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293-F細(xì)胞、HEK293細(xì)胞、TN5B14細(xì)胞
NB19-RIKEN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MODE-K細(xì)胞、NCI-H2342細(xì)胞、IPEC-J2細(xì)胞
Rat podocyte細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM 239-A細(xì)胞、HCC2185細(xì)胞、CHL-1細(xì)胞
3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Me-Wo細(xì)胞、WERIRb1細(xì)胞、Line 207細(xì)胞
H-2291細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SuDHL 4細(xì)胞、BCaP-37細(xì)胞、HeLa/DDP細(xì)胞
Pa14C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DLD 1細(xì)胞、HL7702細(xì)胞、RPMI no. 8226細(xì)胞
Kuramochi Adherent人卵巢癌細(xì)胞系
H2.35細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNT-229細(xì)胞、CCD1112Sk細(xì)胞、Karpas 299細(xì)胞
22Rv1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA.MB.231細(xì)胞、GM04680細(xì)胞、UT-7細(xì)胞
HEI-193細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HNSC細(xì)胞、NIH:OVCAR-5細(xì)胞、NCI-H1819細(xì)胞
PSN-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BJ1細(xì)胞、NB-19細(xì)胞、293E細(xì)胞
SO-Rb 50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293/EBNA細(xì)胞、H-1385細(xì)胞、RASMC細(xì)胞
DHBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW900細(xì)胞、Suzhou Human Glioma-44細(xì)胞、Hep 3B2_1-7細(xì)胞
D-407細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTR-8細(xì)胞、138 MG細(xì)胞、SNU1040細(xì)胞
EST50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-1095Sk細(xì)胞、GLRK 13細(xì)胞、SKES1細(xì)胞
DSL6A/C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC-4細(xì)胞、SW 900細(xì)胞、LK-2細(xì)胞
Rat 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMrSV5細(xì)胞、RCC-JF細(xì)胞、RCC23細(xì)胞
A704細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VP229細(xì)胞、RSC 96細(xì)胞、SKOV-433細(xì)胞
LS 123細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS1034細(xì)胞、NCIH1436細(xì)胞、WM-266-mel細(xì)胞
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