"COS-7 AdherentSV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:此細(xì)胞株源自CV-1細(xì)胞株,經(jīng)轉(zhuǎn)染起始點(diǎn)缺失的SV40病毒突變體得到;編碼表達(dá)野生型T抗原,所以該細(xì)胞適合作為需要SV40T抗原表達(dá)的載體的轉(zhuǎn)染宿主。該細(xì)胞表達(dá)T抗原,允許SV40病毒的溶解性生長(zhǎng),支持40℃時(shí)溫度敏感性A209病毒的復(fù)制,支持起始區(qū)域缺陷的SV40突變體的復(fù)制。因含有SV40病毒的DNA序列,該細(xì)胞需要在2級(jí)生物安全柜中操作。
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
預(yù)防細(xì)胞污染的注意事項(xiàng):實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前,超凈臺(tái)用紫外燈照射30-60min,然后用75%酒精擦拭超凈臺(tái)臺(tái)面,并開(kāi)啟超凈臺(tái)風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)10min左右再開(kāi)始實(shí)驗(yàn)操作。實(shí)驗(yàn)用品用75%酒精擦拭后才能放入超凈臺(tái)內(nèi);實(shí)驗(yàn)用品用完應(yīng)移出超凈臺(tái),以利于氣流的流通。實(shí)驗(yàn)完成后用75%酒精擦拭超凈臺(tái)臺(tái)面。每次操作只處理一種細(xì)胞;即使不同細(xì)胞使用相同的培養(yǎng)基也不要共享同一瓶培養(yǎng)基,避免細(xì)胞間的交叉污染。操作時(shí)小心取用無(wú)菌的物品,避免污染。勿碰觸吸管尖頭,不小心碰觸后應(yīng)立即更換;不要在打開(kāi)的容器瓶口正上方操作,容器打開(kāi)后,傾斜45°操作,操作完成后及時(shí)蓋上瓶蓋。CO2培養(yǎng)箱的清潔是較易被忽視的地方,應(yīng)1-2個(gè)月對(duì)培養(yǎng)箱定期進(jìn)行清潔消毒。先用75%酒精擦拭培養(yǎng)箱內(nèi)壁、隔板、水盤2-3次,用雙蒸水清洗,再用酒精棉球擦拭一遍,后紫外燈照射4h以上。水盤內(nèi)加入無(wú)菌水(應(yīng)每周更換),待培養(yǎng)箱內(nèi)溫度、濕度、CO2濃度穩(wěn)定后再放入細(xì)胞。定期清洗或更換超凈臺(tái)過(guò)濾膜、預(yù)濾網(wǎng)。
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
COS-7 AdherentSV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
【胰蛋白酶消化操作】1)加入消化液:小心吸出舊培養(yǎng)液,用PBS清洗(沖洗),加入適量消化液(胰蛋白酶液),注意消化液的量以蓋住細(xì)胞,消化溫度是37℃;2)顯微鏡下觀察細(xì)胞:倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞,若胞質(zhì)回縮,細(xì)胞之間不再連接成片,表明此時(shí)細(xì)胞消化適度;(3)吸棄消化液加入培養(yǎng)液:棄去胰蛋白酶液,注意更換吸管,加入新鮮的培養(yǎng)液?!敬荡蚍稚⒓?xì)胞操作】1)吹打制懸:用滴管將已經(jīng)消化細(xì)胞吹打成細(xì)胞懸液;2)吸細(xì)胞懸液入離心管:將細(xì)胞懸液吸入10ml離心管中;3)平衡離心:平衡后將離心管放入臺(tái)式離心機(jī)中,以1000轉(zhuǎn)/分鐘離心6-8分鐘;4)棄上清液,加入新培養(yǎng)液:棄去上清液,加入2ml培養(yǎng)液,用滴管輕輕吹打細(xì)胞制成細(xì)胞懸液。【分裝稀釋細(xì)胞操作】1)顯微鏡下觀察細(xì)胞:倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞量,必要是計(jì)數(shù)。注意密度過(guò)小會(huì)影響傳代細(xì)胞的生長(zhǎng),傳代細(xì)胞的密度應(yīng)該不低于5×105/ml。最后要做好標(biāo)記;2)分裝:將細(xì)胞懸液吸出分裝至2~3個(gè)培養(yǎng)瓶中,加入適量培養(yǎng)基旋緊瓶蓋;3)繼續(xù)培養(yǎng):用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶,適當(dāng)旋松瓶蓋,放入CO2培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。傳代細(xì)胞2小時(shí)后開(kāi)始貼附在瓶壁上。
293/EBNA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK_N_FI細(xì)胞、Ly3細(xì)胞、U2-OS細(xì)胞
SNU423細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCILY-10細(xì)胞、GOTO細(xì)胞、EFM192A細(xì)胞
Mia PACA 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U118細(xì)胞、Ramos 1細(xì)胞、GM06141B細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2傳代
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
MMQ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Potorous tridactylus Kidney 2細(xì)胞、PANC0504細(xì)胞、EBTr (NBL-4)細(xì)胞
NCIH1417細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUP-T1細(xì)胞、E.L.4細(xì)胞、Panc 2.03細(xì)胞
HPAC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JVM-3細(xì)胞、H2198細(xì)胞、YES2細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
COS-7 AdherentSV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:成纖維細(xì)胞樣
解凍細(xì)胞常見(jiàn)實(shí)驗(yàn)問(wèn)題分析及推薦解決方法:在解凍凍存細(xì)胞時(shí),發(fā)現(xiàn)會(huì)出現(xiàn)存活率低、大量細(xì)胞碎片及生長(zhǎng)緩慢等問(wèn)題,究竟是什么原因?qū)е?,我們?cè)撛趺催M(jìn)行解決?以下是國(guó)內(nèi)外細(xì)胞培養(yǎng)專家針對(duì)解凍細(xì)胞實(shí)驗(yàn)問(wèn)題,總結(jié)的一些解決方案!出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下:1)解凍過(guò)程中細(xì)胞裂解,推薦的解決方案:可預(yù)期到一定量的細(xì)胞死亡,因此細(xì)胞的濃度應(yīng)足夠高,考慮到這一損失。起始濃度為1*10(6)至1*10(7)細(xì)胞/毫升;2)解凍過(guò)程中的問(wèn)題,推薦的解決方案:在-70℃至-80℃下保存冷凍的培養(yǎng)物,保存時(shí)間為1-5天,但這不是保存的方法。在37℃充分解凍后應(yīng)立即開(kāi)始培養(yǎng);3)對(duì)冷凍液過(guò)敏,推薦的解決方案:A.完全或部分更換培養(yǎng)基,減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在24小時(shí)后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時(shí)間供培養(yǎng)物恢復(fù)。有時(shí)細(xì)胞需要幾周時(shí)間才能形成單層或密集的懸浮物,取決于冷凍時(shí)細(xì)胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長(zhǎng)階段中的位置。冷凍的條件在對(duì)數(shù)期;4)被冷凍的原種細(xì)胞的年齡或冷凍時(shí)培養(yǎng)物的年齡,推薦的解決方案:解凍最近冷凍的細(xì)胞。細(xì)胞處于冷凍狀態(tài)的時(shí)間越長(zhǎng),存活率越低。檢查冷凍細(xì)胞的時(shí)間和方法。在冷凍時(shí)細(xì)胞應(yīng)處于對(duì)數(shù)期。
SW-839細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCILY19細(xì)胞、H-87細(xì)胞、Hi5細(xì)胞
LICCF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Emory University-3細(xì)胞、DB細(xì)胞、EJ1細(xì)胞
BC3H-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:769P細(xì)胞、ETCC007細(xì)胞、GEO細(xì)胞
PC-9S1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TK 10細(xì)胞、MDA-MB436細(xì)胞、RMG-I細(xì)胞
PIGI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GTL 16細(xì)胞、HS-683細(xì)胞、Y3細(xì)胞
MGc80-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep 3B細(xì)胞、T98-G細(xì)胞、OVCAR432細(xì)胞
CA-OV-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIT T15細(xì)胞、VK2 (E6/E7)細(xì)胞、L6565細(xì)胞
BE2C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H.Ep.-2細(xì)胞、DLD1細(xì)胞、LA4細(xì)胞
RPMI-1788細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1693細(xì)胞、LK2細(xì)胞、SCC-1395細(xì)胞
HSAS3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PE/CA-PJ-34細(xì)胞、Buffalo Rat Liver-3A細(xì)胞、HUTU80細(xì)胞
VMRC-LCD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M059K細(xì)胞、NBL-S細(xì)胞、NCI-H1522細(xì)胞
NCIH441細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ASH-3細(xì)胞、HA細(xì)胞、A-204細(xì)胞
W133細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HN 4細(xì)胞、UPCISCC090細(xì)胞、Sp2/0細(xì)胞
COS-7 AdherentSV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞系
MV411細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC7細(xì)胞、Transformed C3H Mouse Kidney-1細(xì)胞、PFSK細(xì)胞
P3-X63-Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IMR 32細(xì)胞、SMMC 7721細(xì)胞、HCC-15細(xì)胞
NCI-H196細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIE-115細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-12T細(xì)胞、L615細(xì)胞
NCI-H196細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIE-115細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-12T細(xì)胞、L615細(xì)胞
NCI-H735細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA433細(xì)胞、MES-SA Dx5細(xì)胞、OsACL細(xì)胞
MDA MB231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GS-9L細(xì)胞、T-ALL1細(xì)胞、KMST-6細(xì)胞
H596細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GA-10(Clone 4)細(xì)胞、CCD 19Lu細(xì)胞、Dakiki細(xì)胞
SK-N-BE(2C)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLP8細(xì)胞、INS1E細(xì)胞、LM2-4175細(xì)胞
SK-RC-39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PE/CA-PJ34細(xì)胞、BT.549細(xì)胞、COR-L51細(xì)胞
NCI-H1755細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEAS2B細(xì)胞、Leukemia 1210細(xì)胞、LCLC103H細(xì)胞
PC2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nb2細(xì)胞、HOP92細(xì)胞、HLEB3細(xì)胞
VMRC-RCZ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-839細(xì)胞、H-358細(xì)胞、Panc02.03細(xì)胞
SK-RC-39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PE/CA-PJ34細(xì)胞、BT.549細(xì)胞、COR-L51細(xì)胞
HCC0827細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-8402細(xì)胞、3 LL細(xì)胞、IBRS-2細(xì)胞
RASMCs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U2932細(xì)胞、JIMT1細(xì)胞、SKNBE2C細(xì)胞
TR146細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK-92 transfected with MFG-hIL2細(xì)胞、T98 G細(xì)胞、TF-1細(xì)胞
HCC-2218細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WRL 68細(xì)胞、SCC4細(xì)胞、RT-BM 1細(xì)胞
HCC-9724細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN299細(xì)胞、L-6 myoblast細(xì)胞、697細(xì)胞
HEY-A8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1395細(xì)胞、SNU520細(xì)胞、CHO cell clone K1細(xì)胞
NCI-H2110細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:E6-1細(xì)胞、G-292 clone A141B1細(xì)胞、Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細(xì)胞
Hs 683細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RDES細(xì)胞、Hs606細(xì)胞、HuH-6細(xì)胞
MOLM16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:16-HBE14o細(xì)胞、CEM-CCRF細(xì)胞、HSF細(xì)胞
A498細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-196細(xì)胞、C2-C12細(xì)胞、OSC19細(xì)胞
SU-DHL-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-522細(xì)胞、SW 579細(xì)胞、NIHOVCAR3細(xì)胞
NHDF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 33細(xì)胞、UCLA-SO-M21細(xì)胞、D341 Med細(xì)胞
BALB/c 3T3 clone A31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SVHUC細(xì)胞、SUM-159細(xì)胞、H-1573細(xì)胞
DU4475細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP細(xì)胞、MT-4細(xì)胞、KTC1細(xì)胞
HL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HK-2 [Human kidney]細(xì)胞、H1792細(xì)胞、OCI-Ly7細(xì)胞
ECC-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LICR-LON-HN6-R細(xì)胞、Z138細(xì)胞、MDA-MB436細(xì)胞
SKNAS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNK-6細(xì)胞、Super Tube細(xì)胞、NIH:OVCAR4細(xì)胞
Ocular Choroidal Melanoma-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:XuanWei Lung Cancer-05細(xì)胞、A375-SM細(xì)胞、CHP 212細(xì)胞
Hca-F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARO81細(xì)胞、RASMCs細(xì)胞、SK Mel 2細(xì)胞
NS20-Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:F442-A細(xì)胞、HeLa229細(xì)胞、FM-88細(xì)胞
NCIH1734細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL-1細(xì)胞、NCI-H1395細(xì)胞、SW-403細(xì)胞
3T3-A31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBE細(xì)胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細(xì)胞、SupB15WT細(xì)胞
HSC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293 H細(xì)胞、HOP 62細(xì)胞、WI-38細(xì)胞
SJ-RH30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC-7細(xì)胞、ZR75-1細(xì)胞、HFB細(xì)胞
SW-527細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293E細(xì)胞、Capan-1細(xì)胞、PASMCS細(xì)胞
NPC-TW-039細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB231細(xì)胞、OV433細(xì)胞、LWnt3A細(xì)胞
ECC10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT116細(xì)胞、AM-38細(xì)胞、UPCISCC090細(xì)胞
NK92MI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 450細(xì)胞、Biologics Standards-Cercopithecus-1細(xì)胞、Lu99A細(xì)胞
ECV304細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H82細(xì)胞、3T3L1細(xì)胞、GOS-3細(xì)胞
COS-7 AdherentSV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞系
HTori-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LM6細(xì)胞、Hs 746T細(xì)胞、MUG-Chor1細(xì)胞
KATO 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WTRL1細(xì)胞、L929細(xì)胞、HCC1438細(xì)胞
H1882細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HONE1細(xì)胞、L cell細(xì)胞、LY細(xì)胞
ARH77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-9細(xì)胞、SNU407細(xì)胞、P19細(xì)胞
HCC1569細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC57細(xì)胞、UPCI-SCC-154細(xì)胞、SU86-86細(xì)胞
SCC15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1092細(xì)胞、NCI-H1694細(xì)胞、Colo699細(xì)胞
A375-MEL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 746.T細(xì)胞、SKLU-1細(xì)胞、Porcine Kidney-15細(xì)胞
NCC-IT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2198細(xì)胞、MGHU1細(xì)胞、SUP-T1細(xì)胞
SKLU-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-Mel1細(xì)胞、WEHI 3細(xì)胞、D283-MED細(xì)胞
HOP92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF.7細(xì)胞、NUGC3細(xì)胞、251 MG細(xì)胞
HPB-ALL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Eca 109細(xì)胞、VB細(xì)胞、LS 1034細(xì)胞
BC3H-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:769P細(xì)胞、MES 13細(xì)胞、Calu3細(xì)胞
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