"Vero Adherent非洲綠猴腎細胞系
細胞背景資料:Vero細胞株是日本千葉大學的YasumuraY和KawakitaY從正常成年非洲綠猴的腎臟組織中分離建立的。該細胞常作為轉(zhuǎn)染宿主,用于支原體的檢測。
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞培養(yǎng)更好經(jīng)驗詳解:1)收到細胞,首先要鏡檢:觀察細胞形態(tài)是否正常,對于貼壁細胞則要注意看貼壁情況是否很好,觀察細胞密度,有疑議及時咨提供細胞的技術(shù)人員。 由于運輸?shù)臅r間或者溫度的變化,很多貼壁細胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里生長的狀態(tài)和平時會有點不一樣,主要是貼壁牢固問題。比如293T,平時貼壁就不是很牢,在裝滿的培養(yǎng)基瓶子里面,會發(fā)生大片的脫落,細胞聚集在一起,但是細胞生長還是正常的,通過離心收集,加以胰酶的消化,重新打散,又可以正常的貼壁生長。2)當通過上一步的觀察,細胞初步?jīng)]有問題時,進行下一步操作。當收到的細胞密達到80%左右時,則處理如下:棄除瓶中大部分培養(yǎng)基,僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基;或更換新鮮的培養(yǎng)基,置于培養(yǎng)箱中,隨后每天觀察。 細胞在低于正常生長溫度情況下,會調(diào)整為靜止期,或者慢速生長期,恢復37度的環(huán)境至少3個小時左右,才能重新調(diào)整到接近對數(shù)生長期的狀態(tài),在對數(shù)生長期進行細胞的傳代會大大增加傳代的成功率,和細胞的存活率。3)如果經(jīng)步觀察發(fā)現(xiàn)細胞密度超過90%,并且細胞狀態(tài)很好時,則復溫后2個小時需要立即傳代。傳代的比例應依據(jù)不同的細胞而定。對于生長比較快,狀態(tài)穩(wěn)定,不易受外界影響的細胞可以一次多傳幾瓶;對于生長較慢,細胞比較薄,狀態(tài)容易波動的細胞類型,一次少傳些,每瓶細胞密度大些,便于穩(wěn)定生長。至于一些比較陌生的細胞,次處理也可以依照第二種情況。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
Vero Adherent非洲綠猴腎細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
【胰蛋白酶消化操作】1)加入消化液:小心吸出舊培養(yǎng)液,用PBS清洗(沖洗),加入適量消化液(胰蛋白酶液),注意消化液的量以蓋住細胞,消化溫度是37℃;2)顯微鏡下觀察細胞:倒置顯微鏡下觀察消化細胞,若胞質(zhì)回縮,細胞之間不再連接成片,表明此時細胞消化適度;(3)吸棄消化液加入培養(yǎng)液:棄去胰蛋白酶液,注意更換吸管,加入新鮮的培養(yǎng)液。【吹打分散細胞操作】1)吹打制懸:用滴管將已經(jīng)消化細胞吹打成細胞懸液;2)吸細胞懸液入離心管:將細胞懸液吸入10ml離心管中;3)平衡離心:平衡后將離心管放入臺式離心機中,以1000轉(zhuǎn)/分鐘離心6-8分鐘;4)棄上清液,加入新培養(yǎng)液:棄去上清液,加入2ml培養(yǎng)液,用滴管輕輕吹打細胞制成細胞懸液?!痉盅b稀釋細胞操作】1)顯微鏡下觀察細胞:倒置顯微鏡下觀察細胞量,必要是計數(shù)。注意密度過小會影響傳代細胞的生長,傳代細胞的密度應該不低于5×105/ml。最后要做好標記;2)分裝:將細胞懸液吸出分裝至2~3個培養(yǎng)瓶中,加入適量培養(yǎng)基旋緊瓶蓋;3)繼續(xù)培養(yǎng):用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶,適當旋松瓶蓋,放入CO2培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。傳代細胞2小時后開始貼附在瓶壁上。
Hs840T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BTI-Tn5B14細胞、NCI H548細胞、HT-55細胞
E0771細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Corneal Epithelial cells-Transformed細胞、BC-3-H-I細胞、kms 11細胞
MCF-7/ADR-RES細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PT67細胞、B16-F0細胞、MDAMB-231細胞
細胞傳代方法:1:2傳代
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
UACC-812細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT144-mel細胞、CL 1-5細胞、H69C細胞
MNNG/HOS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2195細胞、Hs-852-T細胞、OCI-LY-3細胞
AtT-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1436細胞、HConEpic細胞、A-253細胞
細胞生長特性:貼壁生長
Vero Adherent非洲綠猴腎細胞系
細胞形態(tài)特性:上皮樣
體內(nèi)細胞培養(yǎng)及其操作步驟:【瘤細胞懸液接種】1)無菌選取生長良好(有光澤,淡紅色)瘤組織或?qū)?shù)生長期培養(yǎng)瘤細胞;2)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨,經(jīng)80~100目篩網(wǎng)過濾成細胞懸液;3)培養(yǎng)細胞應用PBS洗兩遍;4)計數(shù)并調(diào)整細胞濃度至107~108/ml;5)常規(guī)消毒后,于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細胞懸液(0.1ml/部位,>106細胞)。初次接種成功率低,細胞數(shù)盡可能多一些;6)次日注意觀察動物一般情況。初次接種一般有一段較長的潛伏期,以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短,最后固定為一個相對穩(wěn)定的時間?!靖顾龅慕⑴c腹水瘤的接種】將實體瘤細胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位,引起腹水,腹水中含有瘤細胞,將這種腹水反復傳代,即可成為腹水瘤。初次傳代時,腹水常呈血性(含大量紅細胞),反復傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過程如下。1)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細胞離心和洗滌,進行細胞計數(shù);2)消毒動物,左下腹穿刺接種106腹水瘤細胞;3)接種腹水瘤細胞后約7~12d,待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部,用9號針頭抽取腹水,也可行腹部解剖后,用滴管吸取。每只小鼠可抽3~5ml;4)抽取的腹水經(jīng)3000rpm離心15min,收集上清,分裝凍存?zhèn)溆谩?/span>
BTI-TN5B1-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HASMC細胞、NTera 2/cl.D1細胞、Human Pancreatic Duct Epithelial細胞
MGC-803細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NMC-G1細胞、Leukemic 1210細胞、SKMEL-24細胞
Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U251細胞、SNU1040細胞、MLFC細胞
639-V細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PA-TU-8988S細胞、CAL27細胞、NCI-H1435細胞
HEC1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2029細胞、GES1細胞、Bac12F5細胞
LNCaP.FGC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB-19細胞、B10BR細胞、SW-1417細胞
HEK 293A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ESC-410細胞、LC-1/sq細胞、RGC5細胞
OVCA5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC-10-05細胞、ML2細胞、MDA-MB-134-VI細胞
SKLU1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BTI-Tn-5B1-4細胞、H2085細胞、CNE2細胞
NCI-H929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:S3-HeLa細胞、Glioma 261細胞、NCI-H865細胞
Homo sapiens No. 578, tumor cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS852.T細胞、NCI-H146細胞、Giant Cell Tumor細胞
PC 61.5.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:alpha TC1 clone 6細胞、SK-MEL-MeWo細胞、U-251-MG細胞
3AO細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TH1細胞、H711細胞、RN細胞
Vero Adherent非洲綠猴腎細胞系
GM00346B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ReNcell CX細胞、RCC10 RGB細胞、TR-146細胞
C1498細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EB-3細胞、BJA-B1細胞、Mono Mac 1細胞
Huh7.5.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H716細胞、MM96L細胞、LoMeT-ccRcc細胞
Huh7.5.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H716細胞、MM96L細胞、LoMeT-ccRcc細胞
HuPT4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-38細胞、Loucy細胞、SJSA1細胞
T. T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Experimental Mammary Tumour-6細胞、FDC-P1細胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細胞
SW1783細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT-GEO細胞、HuH-1細胞、LNCaP-C4-2細胞
LC-1/sq細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 10.05細胞、Scott細胞、EC-GI細胞
NCI-H1930細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TCC Sup細胞、Hs695細胞、NCI-H1793細胞
SKBr3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-281-T細胞、HFTF細胞、OAW 42細胞
ECV-304細胞系相關(guān)產(chǎn)品:National Medical Center-Glioma 1細胞、F56 [Human neoplasm]細胞、SDBMSC細胞
HTR-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2330細胞、MDA-157細胞、V 79細胞
HP615細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 8.13細胞、HPASMC細胞、PIG1細胞
SUM-190PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-F1細胞、Calu-1細胞、CWR22-R1細胞
A375-SM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT4-D6-P2T細胞、HepG2細胞、NCI-H165細胞
GM04154細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NE-1細胞、PC9細胞、CEL細胞
NBL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-1 sq細胞、Highly Aggressively Proliferating Immortalized細胞、KU19-19細胞
HRA-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H441細胞、aTC1-6細胞、HL 60細胞
WPMY-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:8226細胞、K7M2-WT細胞、VM Cub 1細胞
Hs 934.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV4-11細胞、NCIH2030細胞、G 401細胞
U373MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE85細胞、C127細胞、CHP126細胞
Hs 840.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUIT-2細胞、HCC-2279細胞、Human Liver-7702細胞
Chang liver細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COS-7細胞、IB-RS2細胞、L-6TG細胞
MGH-UI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ASH3細胞、Bovine Turbinate細胞、SK-MEL3細胞
NCIH1694細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GC1-SPG細胞、S3-HeLa細胞、Hs 636 T細胞
Molm 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA2-cloneD1細胞、PNT1/A細胞、SK-NSH細胞
C8166細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T 84細胞、Pa17C細胞、L-929細胞
SU4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NW38細胞、MCA-38細胞、CAL-39細胞
SGC-7901/DDP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-841CoTr細胞、DHL5細胞、LLCPK1細胞
BMDC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KGN細胞、AHH-1細胞、MDA MB 231細胞
PANC-08-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM102細胞、JROECL21細胞、KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150
細胞
NCI H929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 159細胞、J82COT細胞、CCRF-CEM細胞
SK MES 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR.3細胞、D-283MED細胞、LNCaP C4-2細胞
UCLA NPA-87-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-16細胞、MHCC97-L細胞、HCC78細胞
GM15452細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 343.T細胞、Human Hepatocyte Line 5細胞、COLO 320細胞
G-401細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH889細胞、OC316細胞、Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細胞
SNT-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero E-6細胞、HPAEC細胞、HET-1A細胞
University of Arizona Cell Culture-893細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM2132細胞、SKBr3細胞、Sp2/O細胞
NCI H716細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly10細胞、NW-38細胞、SW 1990細胞
PL-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLT-3細胞、NCIH747細胞、NIE-115細胞
SK-OV-433細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-450細胞、WIL2S細胞、DMS 273細胞
SAOS 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EO771細胞、SU.86細胞、Toledo細胞
Vero Adherent非洲綠猴腎細胞系
SNU601細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE0030細胞、WiDr-TC細胞、KPNRTBM1細胞
BEL-7402細胞系相關(guān)產(chǎn)品:5-8F細胞、P-36細胞、Epithelioma Papulosum Cyprini細胞
NIE 115細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16-F10-BL6細胞、Bac1 2F5細胞、NCIH1395細胞
H1563細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM00346細胞、T98細胞、MT2細胞
NCI-SNU-C2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63-Ag8細胞、SUM 52細胞、GL261細胞
SCI1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HC11 Mammary Epithelium細胞、SK-NSH細胞、PIGI細胞
NCI-H719細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ca 9-22細胞、HLEC細胞、JG細胞
MESSA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M109細胞、KYSE-70細胞、L1210細胞
C8-D1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MN9D細胞、CCRF CEM細胞、CSQT-2細胞
H524細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MN-60細胞、HD11細胞、HCEC細胞
BCaP-37細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT-FET細胞、Leukemia L1210細胞、CHP-100細胞
Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U251細胞、H810細胞、NCI-SNU-398細胞
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