"SiHa Adherent人子宮頸鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:該細(xì)胞來(lái)源于一位日本病人的手術(shù)切除的腫瘤組織。電鏡下可以看到細(xì)胞間典型的橋粒和細(xì)胞質(zhì)中大量的張力絲。1975年發(fā)現(xiàn)有支原體污染,而后被去除。該細(xì)胞整合有HPV16基因組,每個(gè)細(xì)胞中有1~2個(gè)拷貝。
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞培養(yǎng)更好經(jīng)驗(yàn)詳解:1)收到細(xì)胞,首先要鏡檢:觀察細(xì)胞形態(tài)是否正常,對(duì)于貼壁細(xì)胞則要注意看貼壁情況是否很好,觀察細(xì)胞密度,有疑議及時(shí)咨提供細(xì)胞的技術(shù)人員。 由于運(yùn)輸?shù)臅r(shí)間或者溫度的變化,很多貼壁細(xì)胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里生長(zhǎng)的狀態(tài)和平時(shí)會(huì)有點(diǎn)不一樣,主要是貼壁牢固問(wèn)題。比如293T,平時(shí)貼壁就不是很牢,在裝滿的培養(yǎng)基瓶子里面,會(huì)發(fā)生大片的脫落,細(xì)胞聚集在一起,但是細(xì)胞生長(zhǎng)還是正常的,通過(guò)離心收集,加以胰酶的消化,重新打散,又可以正常的貼壁生長(zhǎng)。2)當(dāng)通過(guò)上一步的觀察,細(xì)胞初步?jīng)]有問(wèn)題時(shí),進(jìn)行下一步操作。當(dāng)收到的細(xì)胞密達(dá)到80%左右時(shí),則處理如下:棄除瓶中大部分培養(yǎng)基,僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基;或更換新鮮的培養(yǎng)基,置于培養(yǎng)箱中,隨后每天觀察。 細(xì)胞在低于正常生長(zhǎng)溫度情況下,會(huì)調(diào)整為靜止期,或者慢速生長(zhǎng)期,恢復(fù)37度的環(huán)境至少3個(gè)小時(shí)左右,才能重新調(diào)整到接近對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的狀態(tài),在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期進(jìn)行細(xì)胞的傳代會(huì)大大增加傳代的成功率,和細(xì)胞的存活率。3)如果經(jīng)步觀察發(fā)現(xiàn)細(xì)胞密度超過(guò)90%,并且細(xì)胞狀態(tài)很好時(shí),則復(fù)溫后2個(gè)小時(shí)需要立即傳代。傳代的比例應(yīng)依據(jù)不同的細(xì)胞而定。對(duì)于生長(zhǎng)比較快,狀態(tài)穩(wěn)定,不易受外界影響的細(xì)胞可以一次多傳幾瓶;對(duì)于生長(zhǎng)較慢,細(xì)胞比較薄,狀態(tài)容易波動(dòng)的細(xì)胞類型,一次少傳些,每瓶細(xì)胞密度大些,便于穩(wěn)定生長(zhǎng)。至于一些比較陌生的細(xì)胞,次處理也可以依照第二種情況。
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
SiHa Adherent人子宮頸鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
【胰蛋白酶消化操作】1)加入消化液:小心吸出舊培養(yǎng)液,用PBS清洗(沖洗),加入適量消化液(胰蛋白酶液),注意消化液的量以蓋住細(xì)胞,消化溫度是37℃;2)顯微鏡下觀察細(xì)胞:倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞,若胞質(zhì)回縮,細(xì)胞之間不再連接成片,表明此時(shí)細(xì)胞消化適度;(3)吸棄消化液加入培養(yǎng)液:棄去胰蛋白酶液,注意更換吸管,加入新鮮的培養(yǎng)液?!敬荡蚍稚⒓?xì)胞操作】1)吹打制懸:用滴管將已經(jīng)消化細(xì)胞吹打成細(xì)胞懸液;2)吸細(xì)胞懸液入離心管:將細(xì)胞懸液吸入10ml離心管中;3)平衡離心:平衡后將離心管放入臺(tái)式離心機(jī)中,以1000轉(zhuǎn)/分鐘離心6-8分鐘;4)棄上清液,加入新培養(yǎng)液:棄去上清液,加入2ml培養(yǎng)液,用滴管輕輕吹打細(xì)胞制成細(xì)胞懸液?!痉盅b稀釋細(xì)胞操作】1)顯微鏡下觀察細(xì)胞:倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞量,必要是計(jì)數(shù)。注意密度過(guò)小會(huì)影響傳代細(xì)胞的生長(zhǎng),傳代細(xì)胞的密度應(yīng)該不低于5×105/ml。最后要做好標(biāo)記;2)分裝:將細(xì)胞懸液吸出分裝至2~3個(gè)培養(yǎng)瓶中,加入適量培養(yǎng)基旋緊瓶蓋;3)繼續(xù)培養(yǎng):用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶,適當(dāng)旋松瓶蓋,放入CO2培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。傳代細(xì)胞2小時(shí)后開(kāi)始貼附在瓶壁上。
DHL10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1793細(xì)胞、TB-1 Lu細(xì)胞、32D CL3細(xì)胞
SKNDZ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:751-NA-15細(xì)胞、HCC366細(xì)胞、PFSK-1細(xì)胞
MADB-106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MNNG/HOS Clone F-5細(xì)胞、MUTZ-1細(xì)胞、Caov-3細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:3傳代,2-3天換液一次
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
RF/6A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-29/CX-1細(xì)胞、RGM1細(xì)胞、LU65細(xì)胞
NCI-H1355細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1618細(xì)胞、COLO-1細(xì)胞、T 24細(xì)胞
PY8119細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lu-165細(xì)胞、LN382細(xì)胞、BC-022細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
SiHa Adherent人子宮頸鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣
【細(xì)胞培養(yǎng)中原蟲(chóng)的污染情況總結(jié)】原蟲(chóng):培養(yǎng)液可輕微渾濁,顯微鏡下那些細(xì)小的點(diǎn)狀物數(shù)量非常多,輕微活動(dòng),細(xì)胞雖然可以生長(zhǎng)但繁殖速度卻明顯減慢,而且細(xì)胞狀態(tài)不好,邊緣不清楚,細(xì)胞不透亮。他們與細(xì)胞可共生但會(huì)與細(xì)胞爭(zhēng)奪營(yíng)養(yǎng)。這種共生是非常普遍的,但他們的數(shù)量小,細(xì)胞站優(yōu)勢(shì)所以不會(huì)影響到細(xì)胞的正常生長(zhǎng),只有當(dāng)他們到達(dá)一定的數(shù)量時(shí)就會(huì)影響到細(xì)胞的生長(zhǎng),最終形成惡性循環(huán)。污染的可能原因:可能原因很多比如配液消毒問(wèn)題、操作問(wèn)題、環(huán)境問(wèn)題等等關(guān)于培養(yǎng)基的無(wú)菌狀況,取培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶中(不加細(xì)胞),37度試培養(yǎng)一段時(shí)間后觀察。如果沒(méi)有細(xì)菌生長(zhǎng)就是操作的問(wèn)題。也可以在培養(yǎng)基中事先加入雙抗(酸鏈霉素和芐青霉素)。但雙抗有時(shí)會(huì)影響細(xì)胞的狀態(tài),所以在做轉(zhuǎn)染、檢測(cè)細(xì)胞某項(xiàng)指標(biāo)前一定要撤去雙抗,以避免影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。1)孵箱應(yīng)定期用三氧機(jī)消毒或者紫外光照射,并用酒精和新潔爾滅試擦孵箱同時(shí)孵箱內(nèi)的水應(yīng)是三蒸水;2)超凈臺(tái)\取材\器材\培養(yǎng)液\培養(yǎng)瓶\操作等因素;3)超凈臺(tái)的風(fēng)機(jī)不能過(guò)大,風(fēng)機(jī)到6-8格。否則也可能能致霉菌污染;4)無(wú)菌室經(jīng)甲醛熏蒸消毒后,可用同等量的噴灑中和,約幾小時(shí)即可進(jìn)入操作。
C3H10T1/2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1573細(xì)胞、PCI-04B細(xì)胞、HCEpiC細(xì)胞
GTL 16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FO [Mouse myeloma]細(xì)胞、UPCISCC154細(xì)胞、MDAMB436細(xì)胞
L-Wnt-3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3-E細(xì)胞、A-172細(xì)胞、RPMI-1788細(xì)胞
GBC-SD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Alexander細(xì)胞、Hx-147細(xì)胞、PL5細(xì)胞
B16 BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KOSC2細(xì)胞、HeLa/S3細(xì)胞、Jurkat-77細(xì)胞
SUM 102細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Swiss-3T3細(xì)胞、ID8/MOSEC細(xì)胞、NFS60細(xì)胞
RL-65細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U266S細(xì)胞、MNNG-HOS (Cl#5)細(xì)胞、MDA468細(xì)胞
U373-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Melanoma Cell Bowes細(xì)胞、HCC1954細(xì)胞、Me-Wo細(xì)胞
C3H10T1-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:V79-1細(xì)胞、BT 325細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細(xì)胞
RCCJF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC-1細(xì)胞、UMUC1細(xì)胞、CLONE M3細(xì)胞
BT-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos (RA 1)細(xì)胞、H-1694細(xì)胞、MC-4細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-453細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Gingival carcinoma Neck Metastasis細(xì)胞、Okayama University Medical School-23細(xì)胞、FHL124細(xì)胞
RASMCs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U2932細(xì)胞、JIMT1細(xì)胞、SKNBE2C細(xì)胞
SiHa Adherent人子宮頸鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系
NSI/1-Ag4-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2066細(xì)胞、Nthy-ori 3.1細(xì)胞、alpha TC1 clone 6細(xì)胞
Mouse INsulinoma 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U251MG細(xì)胞、H1436細(xì)胞、WI38細(xì)胞
Vero E-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-AML4細(xì)胞、T84細(xì)胞、Walker/LLC-WRC 256細(xì)胞
Vero E-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-AML4細(xì)胞、T84細(xì)胞、Walker/LLC-WRC 256細(xì)胞
Baby Hamster Kidney from litter No. 21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PCI-4B細(xì)胞、KATO III細(xì)胞、GFP-Olig2細(xì)胞
SK-RC-39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PE/CA-PJ34細(xì)胞、BT.549細(xì)胞、COR-L51細(xì)胞
CEM-0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:33604細(xì)胞、NCIH1341細(xì)胞、NB1-RGB細(xì)胞
TE-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NGEC細(xì)胞、SK-N-BE(2)-C細(xì)胞、SUPB-15細(xì)胞
769-P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:143B細(xì)胞、MA 104細(xì)胞、RBE細(xì)胞
MHCC 97-H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIT-1細(xì)胞、SW-626細(xì)胞、16HBEo-細(xì)胞
HO1-N1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-8細(xì)胞、Dakiki細(xì)胞、YH-13細(xì)胞
BT 20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-HUT-460細(xì)胞、NE-4C細(xì)胞、NCI-H2122細(xì)胞
HSC4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1105細(xì)胞、mIMCD-3細(xì)胞、NSH細(xì)胞
NCI H508細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB9細(xì)胞、NK-92.05細(xì)胞、J45.01細(xì)胞
BEL7405細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GDM1細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-361細(xì)胞、CAL33細(xì)胞
NWA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H2106細(xì)胞、OCI AML3細(xì)胞、Natural Killer-92細(xì)胞
211H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Gejiu Lung Carcinoma-82細(xì)胞、TO175T細(xì)胞、HSC 3細(xì)胞
A-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFM192A細(xì)胞、NPA 87細(xì)胞、SN4741細(xì)胞
U-2-OS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AM-38細(xì)胞、NCI-H2087細(xì)胞、SUM149-PT細(xì)胞
MILE SVEN1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3-A31細(xì)胞、HuH7細(xì)胞、IFRS1細(xì)胞
MCF12F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hs 68細(xì)胞、MGc80-3細(xì)胞、TM4細(xì)胞
QGY-7701細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT 93細(xì)胞、CAL 12T細(xì)胞、U20S細(xì)胞
IOSE29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C32r細(xì)胞、SCC7細(xì)胞、CORL26細(xì)胞
QG56細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EVSA/T細(xì)胞、U-343MG細(xì)胞、Neuro2a細(xì)胞
8402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMCUB1細(xì)胞、BMDC細(xì)胞、WM 2664細(xì)胞
IGR-OV1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1734細(xì)胞、EMT6細(xì)胞、MFD-1細(xì)胞
H.Ep.-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-886細(xì)胞、PLA802細(xì)胞、BT-B細(xì)胞
Tj-905細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GH 3細(xì)胞、COLO678細(xì)胞、mousepodocyte細(xì)胞
SUDHL16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK92-MI細(xì)胞、ARO81-1細(xì)胞、NCIH146細(xì)胞
IGROV 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HDF-a細(xì)胞、NCI-Hut 125細(xì)胞、OLN-93細(xì)胞
U2-OS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:bEnd3細(xì)胞、SK-RC-52細(xì)胞、OAW-42細(xì)胞
CC-LP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-2279細(xì)胞、TE-11細(xì)胞、HEC1B細(xì)胞
ML2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HARA-B細(xì)胞、H-526細(xì)胞、SGC996細(xì)胞
GM04679細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-2細(xì)胞、CO115細(xì)胞、SK-RC-42細(xì)胞
RCC-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKCO-1細(xì)胞、OCI-Ly 18細(xì)胞、NCIH1355細(xì)胞
HCC-2935細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:746T細(xì)胞、MOLT4細(xì)胞、253JBV細(xì)胞
KMH2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNBE(2)細(xì)胞、ARIP細(xì)胞、PG-4 (S+L-)細(xì)胞
KMH2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNBE(2)細(xì)胞、ARIP細(xì)胞、PG-4 (S+L-)細(xì)胞
EBC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCMEC細(xì)胞、Institute for Medical Research-32細(xì)胞、NCI-H650細(xì)胞
KTC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMM39細(xì)胞、3T3 Swiss Albino細(xì)胞、HCC-94細(xì)胞
MMAc.SF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PIEC細(xì)胞、NCIH2452細(xì)胞、CDC/EU.HMEC-1細(xì)胞
KHYG-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y3細(xì)胞、GM00346細(xì)胞、BALB 3T3 clone A31細(xì)胞
SiHa Adherent人子宮頸鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系
PIEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-SH-SY5Y細(xì)胞、GC-1 spg細(xì)胞、WiDr-TC細(xì)胞
GM05372細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J 774A.1細(xì)胞、HF-91細(xì)胞、FaDu細(xì)胞
QBC939細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRA-19細(xì)胞、TE9細(xì)胞、C518細(xì)胞
OVCAR4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL45細(xì)胞、Duke University 145細(xì)胞、H-2195細(xì)胞
HLEB3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:McA-RH 7777細(xì)胞、2780CP細(xì)胞、NRK-52E細(xì)胞
FF-WT-BJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hTERT-HPNE細(xì)胞、R 2 C細(xì)胞、H-4細(xì)胞
P3X63Ag8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293A細(xì)胞、SCC-7細(xì)胞、SNU407細(xì)胞
MEG-01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H165細(xì)胞、CAL 33細(xì)胞、LOU-NH91細(xì)胞
UACC812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-719細(xì)胞、HAEC細(xì)胞、SW1990細(xì)胞
SK-NSH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV-362細(xì)胞、Hs 739.T細(xì)胞、RPMI-1846細(xì)胞
NS-1-Ag4-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H661細(xì)胞、HCC-1419細(xì)胞、H9c2 (2-1)細(xì)胞
L-Wnt-3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3-E細(xì)胞、EA.hy 926細(xì)胞、RCC10細(xì)胞
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