"Ishikawa Adherent人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)分布不均勻，通常操作步驟：做細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)，細(xì)胞鋪板大概是我們最常見(jiàn)的一個(gè)實(shí)驗(yàn)。但有時(shí)候鋪得不是很均勻：要么中間密周圍稀，要么周圍密中間禿頂。下面為大家分享幾點(diǎn)經(jīng)驗(yàn)。盡量消化細(xì)胞分散成單細(xì)胞懸液。對(duì)于易于消化的細(xì)胞，我一般DPBS清洗一遍，加0.5ml胰酶潤(rùn)洗一遍（25cm2培養(yǎng)瓶或6孔板），棄掉胰酶，37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右，鏡下觀察是否細(xì)胞消化較為分散。如果不夠，延長(zhǎng)消化時(shí)間。96孔板一般以100微升每孔接種，直接用100微升移液器吸取細(xì)胞懸液，沿孔壁（稍離開(kāi)一點(diǎn)孔底即可，不要離底太高）直接接入，移液器不需完全打到，輕輕按下即可，每鋪完一行換一次槍頭同時(shí)輕輕混勻細(xì)胞懸液。都加完后蓋上蓋子，左手輕輕扶住板的左邊，右手輕輕敲擊板的右邊緣，注意把握力度（我一般輕巧敲三下），太強(qiáng)或次數(shù)太多會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞集中成堆，將板順時(shí)針旋轉(zhuǎn)（逆時(shí)針效果不好），依次敲擊剩余三個(gè)邊，靜置約5分鐘，放入37度培養(yǎng)箱。6孔板、12孔板或24孔板，可采用將每個(gè)孔加入少量無(wú)血清培養(yǎng)基，晃動(dòng)浸潤(rùn)整個(gè)孔底，然后用移液槍吸至第二孔，同樣方法浸潤(rùn)孔底，其它孔依此類推，這樣整個(gè)孔底都是濕潤(rùn)的，細(xì)胞懸液會(huì)平鋪在整個(gè)孔底，注意加完細(xì)胞懸液后要放工作臺(tái)靜置一下。這個(gè)方法就是有點(diǎn)慢，但操作熟練了也不慢。也可以采用輕拍的方式，但力度沒(méi)有96孔板好掌握，效果沒(méi)有96孔板好。培養(yǎng)瓶里面加好細(xì)胞以后(比如傳代好/分好細(xì)胞以后)，先順時(shí)針搖晃3次，馬上逆時(shí)針搖晃3次。然后延X(jué)軸Y軸分別水平搖動(dòng)3次。放入CO2培養(yǎng)箱后,平放著培養(yǎng)瓶重復(fù)延X(jué)軸Y軸分別水平搖動(dòng)3次。
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
Ishikawa Adherent人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
【胰蛋白酶消化操作】１)加入消化液：小心吸出舊培養(yǎng)液，用PBS清洗(沖洗)，加入適量消化液(胰蛋白酶液)，注意消化液的量以蓋住細(xì)胞，消化溫度是３７℃；２)顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞，若胞質(zhì)回縮，細(xì)胞之間不再連接成片，表明此時(shí)細(xì)胞消化適度；(３)吸棄消化液加入培養(yǎng)液：棄去胰蛋白酶液，注意更換吸管，加入新鮮的培養(yǎng)液?！敬荡蚍稚⒓?xì)胞操作】１)吹打制懸：用滴管將已經(jīng)消化細(xì)胞吹打成細(xì)胞懸液；２)吸細(xì)胞懸液入離心管：將細(xì)胞懸液吸入１０ml離心管中；３)平衡離心：平衡后將離心管放入臺(tái)式離心機(jī)中，以１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心６-８分鐘；４)棄上清液，加入新培養(yǎng)液：棄去上清液，加入２ml培養(yǎng)液，用滴管輕輕吹打細(xì)胞制成細(xì)胞懸液?！痉盅b稀釋細(xì)胞操作】１)顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞量，必要是計(jì)數(shù)。注意密度過(guò)小會(huì)影響傳代細(xì)胞的生長(zhǎng)，傳代細(xì)胞的密度應(yīng)該不低于５×１０５/ml。最后要做好標(biāo)記；２)分裝：將細(xì)胞懸液吸出分裝至２～３個(gè)培養(yǎng)瓶中，加入適量培養(yǎng)基旋緊瓶蓋；３)繼續(xù)培養(yǎng)：用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶，適當(dāng)旋松瓶蓋，放入CO２培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。傳代細(xì)胞２小時(shí)后開(kāi)始貼附在瓶壁上。
HUT 226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-2185細(xì)胞、HCoEpiC細(xì)胞、CMT 167細(xì)胞
Centre Antoine Lacassagne-85-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP-212細(xì)胞、Caco2BBe細(xì)胞、MDA330細(xì)胞
RPMI no 8226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH82細(xì)胞、KYSE-450細(xì)胞、ARH77細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：３傳代，３-４天換液一次
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
COLO320/DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pro-Lec1.3C細(xì)胞、Jurkat-FHCRC細(xì)胞、GOTO細(xì)胞
16HBE14o-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 3.27細(xì)胞、SGC7901細(xì)胞、HeLa/S3細(xì)胞
HSC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc3_27細(xì)胞、NCI-H498細(xì)胞、HuTu-80細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
Ishikawa Adherent人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮樣
細(xì)胞接收操作說(shuō)明：請(qǐng)仔細(xì)閱讀本操作說(shuō)明及相應(yīng)的細(xì)胞說(shuō)明書(shū)。本公司細(xì)胞發(fā)貨有四種形式：T２５培養(yǎng)瓶(一般是貼壁細(xì)胞使用，懸浮細(xì)胞也可以)、離心管(懸浮細(xì)胞使用多，當(dāng)然，有些公司也會(huì)用這種離心管形式發(fā)貼壁細(xì)胞，但是，長(zhǎng)期經(jīng)驗(yàn)來(lái)說(shuō)，貼壁細(xì)胞容易發(fā)生形態(tài)變化，估計(jì)是細(xì)胞培養(yǎng)空間狹小，血清不足導(dǎo)致(最主要是怕運(yùn)輸延誤導(dǎo)致這些情況發(fā)生)，個(gè)人不建議用離心管形式發(fā)貼壁細(xì)胞)及干冰(凍存細(xì)胞用，主要是冬天天氣冷，溫度低于４℃的地方，都要考慮凍存細(xì)胞)。T２５培養(yǎng)瓶：是用T２５細(xì)胞培養(yǎng)瓶直接發(fā)貨的形式。收到細(xì)胞后，拆開(kāi)包裝T２５培養(yǎng)瓶的自封袋，不拆封口膜，表面噴７５%酒精消毒后顯微鏡觀察細(xì)胞狀態(tài)(有條件可以拍下此時(shí)細(xì)胞照片)。將細(xì)胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時(shí)以上，再處理細(xì)胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝好備用，如細(xì)胞密度高于８０%，可以直接消化傳代，相反則加入５-６ml培養(yǎng)基放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)即可。離心管：是用１５ml離心管發(fā)貨的形式，只用于懸浮細(xì)胞發(fā)貨。收到細(xì)胞后消毒處理及將細(xì)胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時(shí)以上，再處理細(xì)胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝好備用(如果實(shí)驗(yàn)室沒(méi)有T２５培養(yǎng)瓶，可以暫時(shí)T７５培養(yǎng)瓶，加入１０-１５ml培養(yǎng)基，建議１０ml培養(yǎng)基，也可以使用T１７５培養(yǎng)瓶，加入５０-６０ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)瓶越大，需要的培養(yǎng)基越多。當(dāng)然如果剛接收到細(xì)胞密度不夠的話，不用大瓶子，先用小瓶子養(yǎng)起來(lái)再換大的，不然會(huì)長(zhǎng)得很慢，嚴(yán)重的，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞死亡等危險(xiǎn))，平衡完成后，離心(１０００rpm，３min)收集細(xì)胞，棄上清，用新的培養(yǎng)基重懸細(xì)胞并接種至培養(yǎng)瓶或皿中，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。干冰：是用本公司凍存液凍存細(xì)胞后，直接用干冰將凍存的細(xì)胞冷凍發(fā)貨的形式。收到細(xì)胞后按照細(xì)胞復(fù)蘇的步驟操作即可。
OKT 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-638細(xì)胞、ROS17/2.8細(xì)胞、SK-N-BE(2)-M17細(xì)胞
Human Melanoma Cell Bowes細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jeko1細(xì)胞、hEM15A細(xì)胞、Ca 9-22細(xì)胞
MOLM-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：McA-RH8994細(xì)胞、Hs 766T細(xì)胞、L-428細(xì)胞
RPMI 6666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TOV-112細(xì)胞、Fetal Human Colon細(xì)胞、NCI-H1437細(xì)胞
CL1-0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-231細(xì)胞、NCIADR.RES細(xì)胞、PK(15)細(xì)胞
B16/F10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc_05_04細(xì)胞、CAL 39細(xì)胞、HCC366細(xì)胞
SF 767細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TSUpr1細(xì)胞、ESC細(xì)胞、PE/CA-PJ-34細(xì)胞
NCI-441細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC-996細(xì)胞、HCC-1569細(xì)胞、A 253細(xì)胞
MNNG/HOS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2195細(xì)胞、Hs-852-T細(xì)胞、OCI-LY-3細(xì)胞
CCD-841CoN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPF細(xì)胞、Tsup-1細(xì)胞、hTERT-RPE細(xì)胞
L 132細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 8226細(xì)胞、MES-13細(xì)胞、H1694細(xì)胞
H1648細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFSF細(xì)胞、Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細(xì)胞、HBE細(xì)胞
Vero 76細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE(1)細(xì)胞、HM細(xì)胞、PG-4 S+L-細(xì)胞
Ishikawa Adherent人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系
KOPN8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC 94細(xì)胞、OE-19細(xì)胞、BS-C-1細(xì)胞
SKG IIIa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS578T細(xì)胞、NIH:OVCAR-3細(xì)胞、WEHI 3細(xì)胞
MN-9D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mono Mac6細(xì)胞、BT549細(xì)胞、H-2405細(xì)胞
H1404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：He-La細(xì)胞、Hs-343-T細(xì)胞、PT-67細(xì)胞
HOP62細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UM-RC-2細(xì)胞、SK-OV-3細(xì)胞、Ku812F細(xì)胞
Karpas299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DAN-G細(xì)胞、PL-11細(xì)胞、MDAPCa2b細(xì)胞
CCD-841CoN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPF細(xì)胞、Tsup-1細(xì)胞、hTERT-RPE細(xì)胞
GEO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1373細(xì)胞、BSC-40細(xì)胞、OCI-LY-7細(xì)胞
SJ-Rh 30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC PK1細(xì)胞、H716細(xì)胞、RKN細(xì)胞
TEV-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：4175細(xì)胞、Pan02細(xì)胞、Normal fibroblast-10細(xì)胞
MTC-TT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMC11細(xì)胞、MeWo細(xì)胞、HBVSMC細(xì)胞
CT26WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAW-264.7細(xì)胞、hRMECs細(xì)胞、P3JHR-1細(xì)胞
H-82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH295R細(xì)胞、HEL 299細(xì)胞、PG-BE1細(xì)胞
rRTEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H596細(xì)胞、NCI-H1105細(xì)胞、MCF7ADR細(xì)胞
NCI-H1522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H441細(xì)胞、GM03671細(xì)胞、SK-HEP-1細(xì)胞
NCIH2009細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FD-LSC-1細(xì)胞、CCD1095Sk細(xì)胞、CT26.WT細(xì)胞
MCF7-GFP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3/NS-1細(xì)胞、SW 1353細(xì)胞、CCRF-CEM C1細(xì)胞
CA-OV-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIT T15細(xì)胞、VK2 (E6/E7)細(xì)胞、L6565細(xì)胞
4T1.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHG-44細(xì)胞、143 B細(xì)胞、Colon26細(xì)胞
ST細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HGF-1細(xì)胞、THPI細(xì)胞、RGM-1細(xì)胞
SK-Col-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1838細(xì)胞、NIE-115細(xì)胞、TYK-nu細(xì)胞
Hs888T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C4 I細(xì)胞、LPC-H12細(xì)胞、GOS3細(xì)胞
SUM-149PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AU 565細(xì)胞、LIM 1215細(xì)胞、HEYA8細(xì)胞
Ly3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H295R細(xì)胞、MDA-MB-330細(xì)胞、LLC-WRC 256細(xì)胞
Eca 109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO8910/PM細(xì)胞、PC 12細(xì)胞、SNU869細(xì)胞
2BS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：alphaTC1 Clone 6細(xì)胞、NCI-H2030細(xì)胞、H69細(xì)胞
NCIH2081細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：74Int細(xì)胞、HPAFII細(xì)胞、Homo sapiens No. 578, breast cells細(xì)胞
RINm-5F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Capan-2細(xì)胞、NCIH1781細(xì)胞、hs 68細(xì)胞
HCC1599細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARO 81-1細(xì)胞、ChaGo-K-1細(xì)胞、HCC95細(xì)胞
H-1417細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CFPAC1細(xì)胞、NCIH1581細(xì)胞、KOSC-2 cl3-43細(xì)胞
Hs 606.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-16細(xì)胞、TM3細(xì)胞、HDSMC細(xì)胞
IGR.OV1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT 1197細(xì)胞、C38細(xì)胞、GM17346細(xì)胞
HBZY-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-AML-3細(xì)胞、HSC1細(xì)胞、P-388細(xì)胞
2B4-L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNF1細(xì)胞、Hs 343.T細(xì)胞、GM04680細(xì)胞
NS-1-Ag4-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H661細(xì)胞、Tb1Lu細(xì)胞、OUMS27細(xì)胞
CHL-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U373 MG細(xì)胞、Chang Cells細(xì)胞、HC11 Mammary Epithelium細(xì)胞
RT-BM 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B95.8細(xì)胞、SK MEL-28細(xì)胞、CemT4細(xì)胞
LLC-PK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KHYG細(xì)胞、INS-1細(xì)胞、HEK293EBNA細(xì)胞
MRC-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1155細(xì)胞、Hep-3B細(xì)胞、SNU-C2A細(xì)胞
SK RC 20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV1-P細(xì)胞、3T3-J2細(xì)胞、P3X63Ag8細(xì)胞
NCI-H661細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-231細(xì)胞、NCI H295R細(xì)胞、RetroPack PT67細(xì)胞
Panc 02.03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HES [Human embryonic skin fibroblast]細(xì)胞、VK2/E6E7細(xì)胞、CCD-841CoN細(xì)胞
Ishikawa Adherent人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系
JEG-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-295R細(xì)胞、GM02131A細(xì)胞、Shadyside Hospital Pittsburgh-77細(xì)胞
207細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHOS細(xì)胞、Panc-03.27細(xì)胞、HEC1-A細(xì)胞
TE-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-20細(xì)胞、C33A細(xì)胞、HEC1A細(xì)胞
CC-LP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-2279細(xì)胞、TE-11細(xì)胞、HEC1B細(xì)胞
M059J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Reuber-H-35 hepatoma細(xì)胞、RPE D407細(xì)胞、CFSC-8B細(xì)胞
NCIH1651細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KG-1細(xì)胞、HuT 78細(xì)胞、NCIH1792細(xì)胞
EJ-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Functional Liver Cell-7細(xì)胞、FHCRC subclone 11細(xì)胞、Cor L88細(xì)胞
SCC-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2052細(xì)胞、COLO 320 DM細(xì)胞、SNG-M細(xì)胞
RPMI.8226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH250細(xì)胞、KYSE 50細(xì)胞、KMB 17細(xì)胞
MOLM-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：McA-RH8994細(xì)胞、D-324 Med細(xì)胞、M1細(xì)胞
HCT GEO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ISHI細(xì)胞、TGBC11T細(xì)胞、MM.1S細(xì)胞
MOLM-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：McA-RH8994細(xì)胞、D-324 Med細(xì)胞、M1細(xì)胞
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