"Y-79 Adherent人視網(wǎng)膜母瘤細胞系
細胞背景資料：１９７１年１月，該細胞由ReidTW及其同事從病人右眼切除的腫瘤進行原代培養(yǎng)建立而成，此病人有很強的視網(wǎng)膜母細胞瘤的母系家族遺傳性。該細胞的超微結(jié)構(gòu)，如核膜內(nèi)折、三層膜結(jié)構(gòu)、大的被膜小泡、環(huán)孔板、微管、中心粒、基粒等都與原始腫瘤相似。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
懸浮細胞不容易轉(zhuǎn)染：懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長，如淋巴細胞。在實驗室經(jīng)常會遇到懸浮細胞的轉(zhuǎn)染，其和貼壁細胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理，先形成脂質(zhì)體-DNA復合物，散布在細胞周圍，然后通過細胞的內(nèi)吞作用，將目的基因?qū)爰毎麅?nèi)，而脂質(zhì)體復合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞高出很多倍，所以，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細胞。其次，脂質(zhì)體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外，懸浮細胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提高懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率，可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法，針對懸浮細胞等難轉(zhuǎn)染細胞還是挺不錯的，電擊對細胞有一定的損傷，選用具有細胞膜修復功能的電轉(zhuǎn)染試劑，可以將電擊對細胞的傷害降到最低，懸浮細胞不易轉(zhuǎn)染，選對試劑及良好的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關鍵。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
Y-79 Adherent人視網(wǎng)膜母瘤細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細胞(絕大部分１min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續(xù)這樣傳代，對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化；什么算是消化好了呢？不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應該停止消化，不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細胞，尤其是腫瘤細胞的一個特性，無論死活的細胞都是如此，你可以嘗試，準備１００%的單個細胞懸液，貼壁后觀察細胞，仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑，這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來，這個時候即使是成片的(比如Calu-３細胞)，吹打不超過２０次后(一般１０次即可)，成小規(guī)模聚集(１０個細胞左右)，是正常的，不要試圖再去延長消化時間，或者像有的同學那樣吹打１h，等待單細胞懸液出現(xiàn)。
KYSE-50細胞系相關產(chǎn)品：Hs604T細胞、Calu 3細胞、SW 620細胞
bEnd3細胞系相關產(chǎn)品：OCI-LY-7細胞、T 98 G細胞、HEL9217細胞
Clone Y1細胞系相關產(chǎn)品：COR-L23/P細胞、RPE1-hTERT細胞、H1876細胞
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
SHG 44細胞系相關產(chǎn)品：HD-LM-2細胞、Hs840T細胞、RT4-D6P2T細胞
HEK-293-F細胞系相關產(chǎn)品：201T細胞、NCI-H1048細胞、STO細胞
SUP T1細胞系相關產(chǎn)品：BT-325細胞、MT-2細胞、SKNF1細胞
細胞生長特性：懸浮生長
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細胞形態(tài)特性：圓形，成簇生長
體內(nèi)細胞培養(yǎng)及其操作步驟：【瘤細胞懸液接種】１)無菌選取生長良好(有光澤，淡紅色)瘤組織或?qū)?shù)生長期培養(yǎng)瘤細胞；２)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨，經(jīng)８０～１００目篩網(wǎng)過濾成細胞懸液；３)培養(yǎng)細胞應用PBS洗兩遍；４)計數(shù)并調(diào)整細胞濃度至１０７～１０８／ml；５)常規(guī)消毒后，于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細胞懸液(０.１ml／部位，＞１０６細胞)。初次接種成功率低，細胞數(shù)盡可能多一些；６)次日注意觀察動物一般情況。初次接種一般有一段較長的潛伏期，以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短，最后固定為一個相對穩(wěn)定的時間?！靖顾龅慕⑴c腹水瘤的接種】將實體瘤細胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤細胞，將這種腹水反復傳代，即可成為腹水瘤。初次傳代時，腹水常呈血性(含大量紅細胞)，反復傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過程如下。１)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細胞離心和洗滌，進行細胞計數(shù)；２)消毒動物，左下腹穿刺接種１０６腹水瘤細胞；３)接種腹水瘤細胞后約７~１２d，待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９號針頭抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３~５ml；４)抽取的腹水經(jīng)３０００rpm離心１５min，收集上清，分裝凍存?zhèn)溆谩?/span>
PC-3/M細胞系相關產(chǎn)品：184A1細胞、NCM356細胞、H1155細胞
GM03573細胞系相關產(chǎn)品：L5178Y TK+/-3.7.2c細胞、GM03320細胞、H-2141細胞
Hs 675.T細胞系相關產(chǎn)品：PanC1細胞、KYSE-270細胞、NHEK細胞
LIM-1215細胞系相關產(chǎn)品：PANC0327細胞、CEMx721.174.T2細胞、GM00637F細胞
A2780CP細胞系相關產(chǎn)品：SNK6細胞、HRIF細胞、H508細胞
HEK;293細胞系相關產(chǎn)品：HCC1954 BL細胞、B16/F1細胞、PaTu 8988 S細胞
MES 23.5細胞系相關產(chǎn)品：C2A細胞、Mono Mac6細胞、P3/ag細胞
CA-OV-3細胞系相關產(chǎn)品：HIT T15細胞、VK2 (E6/E7)細胞、L6565細胞
MDA468細胞系相關產(chǎn)品：QSG-7701細胞、FHs74Int細胞、HFSF細胞
PC3細胞系相關產(chǎn)品：MDCK-2細胞、NCI-H1770細胞、NUGC3細胞
COLO 741細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H820細胞、hs 68細胞、LA-795細胞
OCI-AML-3細胞系相關產(chǎn)品：HS-294T細胞、MHCC-97細胞、UMUC3細胞
D324 Med細胞系相關產(chǎn)品：HFL細胞、FHCRC-11細胞、PANC0504細胞
Y-79 Adherent人視網(wǎng)膜母瘤細胞系
KM933細胞系相關產(chǎn)品：Psi-2 DAP細胞、SK-Mel1細胞、BT549細胞
PG-4(S+L-)細胞系相關產(chǎn)品：F36P細胞、NCI-H157細胞、VCaP細胞
T-84細胞系相關產(chǎn)品：SK-RC 39細胞、HCC1500細胞、BHP10-3細胞
T-84細胞系相關產(chǎn)品：SK-RC 39細胞、HCC1500細胞、BHP10-3細胞
BEL 7405細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H128細胞、D-341細胞、IOSE80UBC細胞
Hepatoma-22細胞系相關產(chǎn)品：NCI.H522細胞、Colo320細胞、B-104細胞
Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細胞系相關產(chǎn)品：U251細胞、SNU1040細胞、MLFC細胞
NCI-H1734細胞系相關產(chǎn)品：IEC-6細胞、SKO-007細胞、RPE1細胞
C-4 I細胞系相關產(chǎn)品：Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細胞、THP-1(ATCC)細胞、CCRF/CEM細胞
MDAMB157細胞系相關產(chǎn)品：MRC-V細胞、H-596細胞、no-11細胞
A704細胞系相關產(chǎn)品：VP229細胞、HFLS細胞、Hs606細胞
MALME 3M細胞系相關產(chǎn)品：A204細胞、HaCaT細胞、MDCK II細胞
HANK-1細胞系相關產(chǎn)品：HPAF-II/CD18細胞、Hs274T細胞、NCI-H1618細胞
SW 1573細胞系相關產(chǎn)品：Sp 2817細胞、CBRH7919細胞、MDA231細胞
SSP-25細胞系相關產(chǎn)品：NIH 3T3細胞、MDCK細胞、MCF10-A細胞
Turbot Embryonic Cell line細胞系相關產(chǎn)品：RAOEC細胞、SKNEP細胞、Caco-2/BBe細胞
SUM190細胞系相關產(chǎn)品：SW 780細胞、JURKAT E-61細胞、SCC15細胞
GalK 1細胞系相關產(chǎn)品：Homo sapiens No. 578, breast cells細胞、HEB細胞、WiDr細胞
RBL-I細胞系相關產(chǎn)品：PFSK1細胞、B16細胞、Institute for Medical Research-32細胞
LMTK-細胞系相關產(chǎn)品：ECV細胞、MUM2B細胞、MOLM-13細胞
HONE1細胞系相關產(chǎn)品：T2 (174 x CEM.T2)細胞、TR-146細胞、Rin-M-5F細胞
KU 19-19細胞系相關產(chǎn)品：Bovine Turbinate細胞、NCIH2141細胞、Caco-2BBe細胞
624-mel細胞系相關產(chǎn)品：HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細胞、aNK細胞、NUGC-2細胞
MCF 10A細胞系相關產(chǎn)品：OCI-Ly01細胞、HBdSMC細胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞
H9c2 (2-1)細胞系相關產(chǎn)品：HT clone H9細胞、SKRC-52細胞、LIPF155C細胞
DH 82細胞系相關產(chǎn)品：A549/DDP細胞、MEG01細胞、IMR 32細胞
K7M2-WT細胞系相關產(chǎn)品：SW.620細胞、CMT93細胞、SCL-I細胞
A549 ATCC細胞系相關產(chǎn)品：ECC1細胞、NCI-H2023細胞、NCIH2122細胞
M20 [Human melanoma]細胞系相關產(chǎn)品：WM115細胞、MeT5A細胞、SUM 159細胞
U343MG細胞系相關產(chǎn)品：JM-Jurkat細胞、RPMI 1788細胞、U87-MG細胞
CCD18細胞系相關產(chǎn)品：T-98G細胞、IM9細胞、NCI-H2110細胞
NCIH2172細胞系相關產(chǎn)品：MCA-205細胞、KY-50細胞、HBMEC細胞
CAL 33細胞系相關產(chǎn)品：HO1-N1細胞、HOP 92細胞、KM932細胞
CDC/EU.HMEC-1細胞系相關產(chǎn)品：NCIH2227細胞、SKN-SH細胞、NCI-H209細胞
MNNG-HOS (Cl#5)細胞系相關產(chǎn)品：P31-FUJ細胞、HCGC細胞、Hi-5細胞
SNUC2A細胞系相關產(chǎn)品：A 549細胞、Panc_02_03細胞、Michigan Cancer Foundation-12A細胞
NCIH524細胞系相關產(chǎn)品：SDBMSC細胞、MDA-415細胞、Kit225細胞
NCIH524細胞系相關產(chǎn)品：SDBMSC細胞、MDA-415細胞、Kit225細胞
SKN-AS細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1238細胞、Glioma-261細胞、Earle's L cells細胞
KM-12細胞系相關產(chǎn)品：T8細胞、MZCRC1細胞、U-251 MG細胞
MOLT-3細胞系相關產(chǎn)品：HKBML細胞、NE1-E6E7細胞、BEL-7402細胞
L-6細胞系相關產(chǎn)品：L02細胞、ATN-1細胞、HOS-143B細胞
Y-79 Adherent人視網(wǎng)膜母瘤細胞系
U-343細胞系相關產(chǎn)品：P3HR1-BL細胞、HCCC9810細胞、786-0細胞
G402細胞系相關產(chǎn)品：MOLP2細胞、TE353.SK細胞、PANC403細胞
DMS-114細胞系相關產(chǎn)品：MDAMB-231細胞、253J細胞、293AD細胞
MRC-5細胞系相關產(chǎn)品：Huh7.5細胞、SW 780細胞、ST2細胞
HT144-mel細胞系相關產(chǎn)品：MDA MB 436細胞、C6細胞、IHH細胞
Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細胞系相關產(chǎn)品：GM04671細胞、RKOE6細胞、CW2細胞
Detroit-562細胞系相關產(chǎn)品：T98細胞、H-35 Reuber細胞、QGP-1細胞
GM 2132細胞系相關產(chǎn)品：GM04154B細胞、GI-1細胞、EFM-192A細胞
Hs-611-T細胞系相關產(chǎn)品：HCC-202細胞、H-1618細胞、Sol8細胞
MDAMB231細胞系相關產(chǎn)品：MUTZ-1細胞、WM 239細胞、NCI-H2291細胞
JVM-3細胞系相關產(chǎn)品：KYSE180細胞、HMEC-1細胞、Immortalized Human Hepatocytes細胞
Hs 636.T細胞系相關產(chǎn)品：EFO-27細胞、OKT3細胞、SJRH30細胞
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