"HK-2 [Human kidney] Adherent人腎小管上皮細胞系
細胞背景資料：該細胞屬源于正常腎的近曲小管細胞，通過導(dǎo)入HPV-１６ E６/E７基因而獲得永生化。將含有HPV-１６ E６/E７基因的重組的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體pLXSN １６ E６/E７轉(zhuǎn)染外生包裝細胞Psi-２，Psi-２細胞產(chǎn)生的病毒再去感染兼嗜性包裝細胞系PA３１７，最后將PA３１７產(chǎn)生的病毒顆粒導(dǎo)入正常的腎皮質(zhì)近曲小管細胞。盡管pLXSN １６ E６/E７中含有新霉素抗性，但未用G４１８篩選轉(zhuǎn)導(dǎo)克隆。Southern和FISH分析顯示HK-２細胞來源于單克隆。PCR檢測證實HK-２細胞基因組中含有E６/E７基因。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
HK-2 [Human kidney] Adherent人腎小管上皮細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
常規(guī)的細胞實驗(增殖，凋亡，遷移，分化之類的)，受消化影響不是很大，如果不用胰酶去孵育而使用潤洗的方法消化的話(難消化細胞例外)。但少數(shù)實驗，比如病毒包裝，對細胞代數(shù)，對細胞狀態(tài)要求極高。這個時候，胰酶消化，就是潤洗，都會對細胞包裝病毒的能力有影響，傳代次數(shù)一多，細胞包裝能力就會逐漸下降(當然也有其它因素影響包裝效率)。這個時候都不用胰酶消化，用一些鹽溶液(不是EDTA液)即可。這些鹽溶液通過影響ECM相關(guān)酶的活性，來使得細胞脫離基質(zhì)附著表面，但不切割任何蛋白；EDTA的作用。許多人不用胰酶，只用EDTA，或者用trypsin/EDTA聯(lián)合作用。這里要明白，trypsin切割ECM的一些負責粘連和附著的蛋白，而EDTA通過螯合Ca離子，作用于Integrin的活性，所以EDTA的作用更加溫和。有的人在trypsin里添加一些EDTA，或者對付特別難消化的細胞，添加多一些EDTA，就是這個道理。一般不要試圖延長消化時間(如果１０min還消化不徹底的話)，而應(yīng)該想其它辦法；PBS洗滌。消化之前用PBS洗滌，是常見的操作，因為Serum含有抑制trypsin的蛋白。但這里面也有學(xué)問可以講，對于一些難消化細胞，那么可以配制不含Ca，Mg離子的PBS，因為這些離子也會抑制trypsin的活性。但對于絕大部分胰酶或者EDTA溶液潤洗即可消化的細胞，不需要配制如此溶液。
MGSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM 115細胞、Hs675細胞、16HBE14o-細胞
SNU449細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL 1MEA.7R.1細胞、NCI-H1975細胞、HUC-1細胞
KFB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：YAC-1細胞、KYSE0030細胞、TK-10細胞
細胞傳代方法：１：４傳代；２-３天換液１次
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
NCI-HUT-292細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2291細胞、H322T細胞、SUDHL4細胞
HANK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCA-38細胞、H-1781細胞、NCI-H322細胞
NCIH520細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-16細胞、A 172細胞、DC2.4細胞
細胞生長特性：貼壁生長
HK-2 [Human kidney] Adherent人腎小管上皮細胞系
細胞形態(tài)特性：上皮樣
解凍細胞出現(xiàn)大量細胞碎片的可能原因及推薦解決方案如下：１)冷凍時細胞密度過低：推薦的解決方案：縮短解凍過程中的時間。將細胞取出后，立即將凍存管浸入在３７℃的水浴中，并震蕩至全部融化，然后迅速地轉(zhuǎn)移到預(yù)熱的培養(yǎng)基中；２)不適當?shù)睦鋬鲞^程：推薦的解決方案：解凍不同冷凍室總的試管。確保在凍存過程中采用的適當?shù)募夹g(shù)，并確保使用了適量和適合的冷凍液。出現(xiàn)生長緩慢的可能原因及推薦解決方案如下：１)培養(yǎng)瓶的大?。阂话憬鉀Q方案是一些細胞在培養(yǎng)基中傾向于維持一定的密度。將培養(yǎng)物轉(zhuǎn)移到較小的培養(yǎng)瓶中，使細胞密度上升；如，根據(jù)培養(yǎng)基的體積，從T７５培養(yǎng)瓶轉(zhuǎn)移到２或３個T２５培養(yǎng)瓶中；２)細胞密度過低：通常解決方案是提高未來冷凍物種細胞的凍存密度，或使用較小的培養(yǎng)容器，或解凍多個試管來進行培養(yǎng)。
NCI-H1355細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1618細胞、COLO-1細胞、T 24細胞
OV1/P細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CA46細胞、MDAMB435細胞、CCD18細胞
RS411細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NT2-D1細胞、LAN-5細胞、HEK293-FT細胞
H-2135細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ROS17/28細胞、SKRC20細胞、Epstein-Barr-1細胞
FRhK4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH508細胞、CCLP-1細胞、Tn 5B1-4細胞
U87-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1385細胞、C3H10T1-2細胞、C33-A細胞
IMR90細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Natural Killer-92細胞、Line 522細胞、COLO684細胞
HS 1.Tes細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCFs細胞、NCI-747細胞、NCI-H-69細胞
BBE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kupffer細胞、Y1細胞、HuCCT-1細胞
CCRFCEM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM-1S細胞、SR786細胞、HTori:3細胞
Ly8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vx-2細胞、LU451細胞、CWR22-Rv1細胞
HConEpic細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero 76 clone E-6細胞、KP-N-RT細胞、NCIH929細胞
RPMI7951細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE(2)-C細胞、HT144細胞、TGW-nu細胞
HK-2 [Human kidney] Adherent人腎小管上皮細胞系
OPM-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK-92MI細胞、OVCAR-420細胞、MSC細胞
HEC-1-B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QBC939細胞、BrCL15細胞、KP-4細胞
NCIH660細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA-SO-14細胞、UM-RC-2細胞、KAT5細胞
NCIH660細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA-SO-14細胞、UM-RC-2細胞、KAT5細胞
COLO 320 DM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT 1197.T細胞、WPMY1細胞、SK-MEL-2-LUC細胞
Panc-08.13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C4-I細胞、Normal Rat, August 3, 1983細胞、MCF 7細胞
SW 527細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMUC-3細胞、H1435細胞、A375-S2細胞
GA-10(Clone 4)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hTERTHME1細胞、UCH1細胞、MKN-45細胞
SJRH 30細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H498細胞、GA-10(Clone 4)細胞、HVSMC細胞
C26細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS123細胞、TNC-1B12B4細胞、H9c2細胞
ARIP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AR4-2J細胞、H1666細胞、CFSC-2G細胞
BpRcl細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTR-8/SV neo細胞、NCI-H508細胞、ARH 77細胞
H-1792細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Detroit 562細胞、NTERA-2 clone D1細胞、HuPT3細胞
MDA 435細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SP2細胞、A-375.S2細胞、T47D細胞
C2BBe 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-510細胞、Hepa-RG細胞、130T細胞
MDA134細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBL 1細胞、H-1993細胞、MDCK細胞
HOPC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UACC-893細胞、Normal Rat Kidney細胞、H209細胞
PY8119細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lu-165細胞、LN382細胞、BC-022細胞
NCI-H1299細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L23細胞、Madison 109細胞、C643細胞
ReNcell CX細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HM06.A1細胞、U251MG細胞、P3-x63-Ag8 653細胞
Caco-2/BBe細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TB-1 Lu細胞、NB4細胞、TE 671細胞
HB611細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTR8/SVneo細胞、Human Kidney-2細胞、HCFB（HCF）細胞
Hs27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：K299細胞、OS-732細胞、HCC-44細胞
hESC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCAP37細胞、TE12細胞、174xCEM.T2細胞
alpha-TC1.6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Line 522細胞、MV 4;11細胞、Leydig細胞
TKB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Embryo Lung-1細胞、AMC-HN-8細胞、KYSE270細胞
Monomac-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2228細胞、Panc 10.05細胞、SUM190細胞
SNU638細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR3細胞、SP2-0-Ag14細胞、AD293細胞
Jurkat-FHCRC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNK-1細胞、SKLMS1細胞、H-508細胞
IHH4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC929細胞、NCI-H1836細胞、VP267細胞
HCC-1187細胞系相關(guān)產(chǎn)品：High 5細胞、Wistar Institute-38細胞、OCI-Ly8細胞
SNU-C2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-435細胞、H-82細胞、HuLEC-5a細胞
NU-GC-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TK-1細胞、Ramos G6.C10細胞、BERH-2細胞
PC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK-2細胞、NCI-H1770細胞、NUGC3細胞
DHL-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS-1細胞、CAL-51細胞、PTK 2細胞
PL-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PA1細胞、RINm-5F細胞、B 95.8細胞
3AO細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TH1細胞、H711細胞、RN細胞
AK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細胞、HGMC細胞、TE-13細胞
OCI-LY-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 445細胞、L6細胞、SMMC7721細胞
NCIH847細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUPM2細胞、Pa16C細胞、H23細胞
RAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC2279細胞、NCIH2122細胞、HM06.A1細胞
PCI-04B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 39細胞、SUM 190PT細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細胞
HK-2 [Human kidney] Adherent人腎小管上皮細胞系
X63Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT144mel細胞、Leydig細胞、SW-962細胞
HeLa S-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa 229細胞、RFL 6細胞、Factor Dependent Cell-Paterson 1細胞
Huh-7.5.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-cells細胞、NPA87細胞、SMA-560細胞
Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hx-147細胞、H510A細胞、NIH:OVCAR3細胞
PBMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：kms 11細胞、LLC-MK-2細胞、526-mel細胞
IPEC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3 (Jiyoye)細胞、CCRF/CEM/0細胞、SKNO1細胞
MDA 435細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SP2細胞、A-375.S2細胞、T47D細胞
SUD-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHOK1細胞、H4-II-E-C3細胞、CHL-IU細胞
KYSE-520細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bx-PC3細胞、S180細胞、H35細胞
MDCK supertube細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MF2059細胞、HCC1954細胞、M4e細胞
Balb/3T3-4-Cl31細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL-5細胞、Hx-147細胞、HeLa細胞
RS411細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NT2-D1細胞、SF-539細胞、HCC2185細胞
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