"BCaP-37 Adherent人乳腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：源自一位４８歲女性乳癌患者。
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，總是會(huì)出現(xiàn)各種意想不到的問(wèn)題，一不留神就會(huì)全盤皆輸。所謂細(xì)胞虐我千百遍，我待細(xì)胞如初戀。下面是貼壁細(xì)胞的保藏方法，希望對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)初學(xué)操作者有所幫助：1)觀察細(xì)胞狀態(tài)：貼壁細(xì)胞密度達(dá)到85-90%，即可以細(xì)胞凍存形式進(jìn)行保藏，拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)；2)細(xì)胞清洗：培養(yǎng)皿表面消毒后，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液，加入12mlPBS，輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細(xì)胞，隨后吸除PBS清洗液；3)細(xì)胞消化：將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中，完全覆蓋細(xì)胞，置于顯微鏡下觀察（期間禁止搖晃培養(yǎng)皿），當(dāng)細(xì)胞剛開始脫落時(shí)，立即轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余約0.5ml胰酶，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)消化，每30秒肉眼觀察細(xì)胞狀態(tài)，至細(xì)胞成流沙狀完全脫落，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，加入12ml完全培養(yǎng)基，終止消化；4)細(xì)胞離心：將終止消化后的細(xì)胞懸液吹打均勻，吸取至15ml離心管中，1000r/min（110g），離心3min；5)細(xì)胞凍存：離心后去除細(xì)胞上清液，按照凍存細(xì)胞量5*10^5/ml，吸取凍存液重懸細(xì)胞沉淀，吹打均勻后分裝至相應(yīng)的凍存管中，進(jìn)行凍存；6)細(xì)胞保藏：凍存管做好標(biāo)記，放至程序降溫盒中，于4℃冰箱放置30min，轉(zhuǎn)移至-80℃超低溫冰箱過(guò)夜，將過(guò)夜后的凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)移至液氮中保藏。
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
BCaP-37 Adherent人乳腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
很多朋友討論細(xì)胞培養(yǎng)問(wèn)題，見(jiàn)到很多很好的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)，這里說(shuō)一些我個(gè)人的經(jīng)驗(yàn)，因?yàn)橐恍┍容^特殊的原因，我自己培養(yǎng)接觸過(guò)近３００種細(xì)胞，常用于做實(shí)驗(yàn)的，累積有百余種，可以說(shuō)遇到過(guò)許多各式各樣古怪的細(xì)胞。這里挑細(xì)胞消化開始做我的篇專題，并不是因?yàn)榧?xì)胞消化最重要，而是近期看到大家頻繁討論這個(gè)話題，我就拋磚引玉，下面幾點(diǎn)拙見(jiàn)，可能與其它朋友總結(jié)的一些經(jīng)驗(yàn)有點(diǎn)出入，僅供大家參考。許多同學(xué)對(duì)細(xì)胞消化做了許多研究，得出了很多有價(jià)值的經(jīng)驗(yàn)，也見(jiàn)到很多人的困惑。其實(shí)細(xì)胞培養(yǎng)，尤其是細(xì)胞系的培養(yǎng)，就消化而言，不是太難，做得多了，善于總結(jié)經(jīng)驗(yàn)，就能把細(xì)胞越養(yǎng)越好。一般的程序步驟，細(xì)節(jié)操作，我這里就不講了，只講一些基本操作背后的知識(shí)，如果不對(duì)之處，歡迎指正，總結(jié)下來(lái)，細(xì)胞培養(yǎng)中消化很重要，但其實(shí)消化并不是細(xì)胞培養(yǎng)的關(guān)鍵所在(雖然很重要)，關(guān)鍵所在是細(xì)胞來(lái)源，血清質(zhì)量和水源(自己配制溶液的話)。我看到版上許多人養(yǎng)細(xì)胞遇到各種各樣的問(wèn)題，很多時(shí)候bottleneck沒(méi)有找到，雖然通過(guò)其它方法有所改善，但仍然是事倍功半。因?yàn)槿藗兺⒁庾约旱牟僮?，總覺(jué)得自己沒(méi)有經(jīng)驗(yàn)，而忽視試劑，溶液尤其是細(xì)胞的質(zhì)量，后者其實(shí)才是許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室常見(jiàn)的問(wèn)題。
CCD-841CoTr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fao細(xì)胞、NuTu 19細(xì)胞、UPCI-SCC-090細(xì)胞
HCC1171細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Wistar Institute-38細(xì)胞、MiaPaCa-2細(xì)胞、DSL-6A/C1細(xì)胞
HUVSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1436細(xì)胞、H2081細(xì)胞、SKMEL-1細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：消化３-５分鐘，１：２,３天內(nèi)可長(zhǎng)滿
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
KMH-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly1細(xì)胞、SJRH-30細(xì)胞、aTC1 Clone 6細(xì)胞
HepG2/C3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-102PT細(xì)胞、HUCCT1細(xì)胞、LS411細(xì)胞
HGE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs343T細(xì)胞、ECGI10細(xì)胞、A-2058細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
BCaP-37 Adherent人乳腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮樣
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過(guò)大，營(yíng)養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長(zhǎng)。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過(guò)程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細(xì)胞和分化特征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料，便于實(shí)驗(yàn)?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶?jī)?nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔，以防用力過(guò)猛損傷細(xì)胞；６)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來(lái)確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長(zhǎng)液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马?xiàng)】１)掌握好細(xì)胞消化的時(shí)間，消化時(shí)間過(guò)短時(shí)，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過(guò)長(zhǎng)的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當(dāng)消化液濃度過(guò)高時(shí)，消化時(shí)間應(yīng)縮短，過(guò)低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對(duì)延長(zhǎng)。
Human Microvascular Endothelial Cell line-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Transformed C3H Mouse Kidney-1細(xì)胞、201T細(xì)胞、Hs695T細(xì)胞
WERI-Rb-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HDLM-2細(xì)胞、RT112細(xì)胞、UM-UC-1細(xì)胞
H727細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCM-1細(xì)胞、A2780/CP70細(xì)胞、NCI-H358細(xì)胞
Panc 02.03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HES [Human embryonic skin fibroblast]細(xì)胞、VK2/E6E7細(xì)胞、CCD-841CoN細(xì)胞
3T3J2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMRC2細(xì)胞、CAL-39細(xì)胞、HEK-293-FT細(xì)胞
NCI-H740細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA-N-6細(xì)胞、AM細(xì)胞、Panc_08_13細(xì)胞
L-cell細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC116細(xì)胞、TW-039細(xì)胞、NCI-H1755細(xì)胞
C4-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BpRc1細(xì)胞、D-341 Med細(xì)胞、Hs 888.Lu細(xì)胞
CHL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MBMEC細(xì)胞、NCI-H220細(xì)胞、MDA157細(xì)胞
BIC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BALB/c 3T3 clone A31細(xì)胞、SW-756細(xì)胞、ONS76細(xì)胞
EFM-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMES細(xì)胞、RD-ES細(xì)胞、HT-115細(xì)胞
RT4-D6P2T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jiyoye(P-2003)細(xì)胞、IAR 20細(xì)胞、QSG-7701細(xì)胞
ACT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-2-Ad細(xì)胞、SW1990細(xì)胞、H1688細(xì)胞
BCaP-37 Adherent人乳腺癌細(xì)胞系
A-2780細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H9c2細(xì)胞、SCL-2細(xì)胞、BALL1細(xì)胞
Mo 59J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GA-10 clone 4細(xì)胞、HuTu 80細(xì)胞、Ca759細(xì)胞
NCIH2122細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN-382細(xì)胞、OVTOKO細(xì)胞、NCIH1581細(xì)胞
NCIH2122細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN-382細(xì)胞、OVTOKO細(xì)胞、NCIH1581細(xì)胞
NL20SV細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MA-c細(xì)胞、NCI-SNU-398細(xì)胞、Jiyoye細(xì)胞
H-520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：QGP-1細(xì)胞、UPCI-SCC090細(xì)胞、CPAE細(xì)胞
U-CH1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL33細(xì)胞、Rin-M-5F細(xì)胞、CT26WT細(xì)胞
MPASMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc_03_27細(xì)胞、H-1672細(xì)胞、T-HSC細(xì)胞
TCC-PAN2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Suzhou Human Glioma-44細(xì)胞、LMH細(xì)胞、IOSE-Van細(xì)胞
Bovine ENDometrial cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：N9細(xì)胞、MDA-MB-134-VI細(xì)胞、CF Pac1細(xì)胞
U266-B1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC0403細(xì)胞、SK-MEL-5細(xì)胞、Super Tube細(xì)胞
Hs 766.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH838細(xì)胞、HPMC細(xì)胞、HT 1376.T細(xì)胞
PK136細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NFS60細(xì)胞、Vero-76細(xì)胞、Institute for Medical Research-90細(xì)胞
Ocular Choroidal Melanoma-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：XuanWei Lung Cancer-05細(xì)胞、A375-SM細(xì)胞、CHP 212細(xì)胞
HCT/FU細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 27細(xì)胞、Panc-1-P細(xì)胞、HUVSMC細(xì)胞
BEL/FU細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KOSC-2 cl3-43細(xì)胞、HBL1細(xì)胞、RT-BM細(xì)胞
no-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MiaPaca.2細(xì)胞、KMB-17細(xì)胞、HRIF細(xì)胞
S3 HeLa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB 231細(xì)胞、MPVECs細(xì)胞、Melan-a細(xì)胞
GM04154B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CG-4細(xì)胞、HCV-29細(xì)胞、SNU-354細(xì)胞
MC-3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CESS細(xì)胞、A-172MG細(xì)胞、RFL 6細(xì)胞
H1341細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T47D:A細(xì)胞、TE354.T細(xì)胞、H-1666細(xì)胞
MCF-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MONO-MAC 6細(xì)胞、NCIH1436細(xì)胞、LS 513細(xì)胞
MCF-7/ADR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 62細(xì)胞、CRFK細(xì)胞、SCC9細(xì)胞
GM637細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly19細(xì)胞、DMS273細(xì)胞、H865細(xì)胞
ADR-RES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SG231細(xì)胞、B-16細(xì)胞、Hs600T細(xì)胞
HHUA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U266BL細(xì)胞、Hs-578Bst細(xì)胞、NK92-MI細(xì)胞
NIH-OVCAR-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：251 MG細(xì)胞、Mono-Mac-6細(xì)胞、High-5細(xì)胞
OE-21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colon26細(xì)胞、Jurkat E6.1細(xì)胞、H250細(xì)胞
HcaF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H8細(xì)胞、YD-15細(xì)胞、RT-112細(xì)胞
P3HR1-BL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pan02細(xì)胞、MCA-205細(xì)胞、SK-ES-1細(xì)胞
HT-1080細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AMJ2C8細(xì)胞、Capan-2細(xì)胞、U266細(xì)胞
PE CA PJ34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-716細(xì)胞、H-2286細(xì)胞、U-hth74細(xì)胞
SW 1417細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OB2細(xì)胞、SKMEL1細(xì)胞、U-2 OS細(xì)胞
ARO81-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IBRS2細(xì)胞、Bowes melanoma cells細(xì)胞、CoCL2細(xì)胞
HMC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ML-2細(xì)胞、NCI-H711細(xì)胞、H35 Reuber細(xì)胞
253JB-V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV2008細(xì)胞、HSC-6細(xì)胞、NCI-HUT-520細(xì)胞
HRMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Institute for Medical Research-90細(xì)胞、3T3-Swiss細(xì)胞、Hs852T細(xì)胞
P3-Jiyoye細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-NFS-60細(xì)胞、SHZ-88細(xì)胞、SK-RC-39細(xì)胞
DLD1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AgC11x3A細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 1846細(xì)胞、Mahlavu細(xì)胞
FET細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CTLL-2細(xì)胞、N-Tera-2細(xì)胞、H-1563細(xì)胞
LNCaP.FGC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB-19細(xì)胞、B10BR細(xì)胞、SW-1417細(xì)胞
HOPC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UACC-893細(xì)胞、Normal Rat Kidney細(xì)胞、H209細(xì)胞
BCaP-37 Adherent人乳腺癌細(xì)胞系
Danio rerio Gill細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKG-3a細(xì)胞、343MG細(xì)胞、FHs74Int細(xì)胞
BA/F3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DSL-6A-C1細(xì)胞、HEP-3B2細(xì)胞、MDA-MB468細(xì)胞
NBL-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PT-K75細(xì)胞、GM-637細(xì)胞、WI 38細(xì)胞
BC-021細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Highly Aggressively Proliferating Immortalized細(xì)胞、BRL細(xì)胞、MDA-MB 453細(xì)胞
H-865細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Huh-7.5細(xì)胞、A20細(xì)胞、SKES-1細(xì)胞
BIC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1563細(xì)胞、Adeno 293細(xì)胞、Panc-3_27細(xì)胞
RKOE6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 190PT細(xì)胞、BCECs細(xì)胞、BC-3-H-I細(xì)胞
3LL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-22細(xì)胞、PA-TU S細(xì)胞、SH-SY5Y Parental細(xì)胞
BrCL15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep II細(xì)胞、Cates 1B細(xì)胞、P388-D1細(xì)胞
RINm-5F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Capan-2細(xì)胞、CHP100細(xì)胞、My-La 2059細(xì)胞
SNU-761細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HM1900細(xì)胞、6-T CEM細(xì)胞、AZ-521細(xì)胞
H-727細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293A細(xì)胞、Wistar Institute, Susan Hayflick細(xì)胞、SUM102細(xì)胞
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