"MC3T3-E1 Subclone 14 Cells|小鼠顱頂前骨細胞系
細胞背景資料:該細胞是從克隆的但是表型各異的MC3T3-E1細胞系中分離出一系列亞克隆。從含抗壞血酸培養(yǎng)基生長的成骨細胞中選擇高或低成骨細胞分化、礦化的亞克隆。 MC3T3亞克隆4(ATCC CRL-2593)和MC3T3亞克?。保矗ˋTCC CRL-2594)在抗壞血酸和3到4mM無機鹽中生長表現(xiàn)出高水平的成骨細胞分化。 它們10天后形成一個礦化良好的細胞外基質(ECM)。MC3T3亞克隆24(ATCC CRL-2594)和MC3T3亞克?。常埃ˋTCC CRL-2596)在抗壞血酸中生長表現(xiàn)出很差的成骨細胞分化
細胞形態(tài):上皮細胞樣
HCC-1588細胞系相關產品:H-2087細胞、ARH77細胞、KU 19-19細胞
NCIH1395細胞系相關產品:C2-C12細胞、MH-S細胞、BJAB-1細胞
SW1417細胞系相關產品:B-16細胞、Kuramochi細胞、L細胞
細胞生長:貼壁
細胞培養(yǎng)方面注意的幾點:無菌意識要強:實驗進行前,超凈臺以紫外燈照射30分鐘滅菌,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面,并開啟超凈工作臺風扇運轉數(shù)分鐘后,才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株,以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后,將實驗物品帶出工作臺,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應保持清潔及寬敞,必要物品,例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置,其它個人實驗用品用完應立即拿出。實驗用品以70%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內。實驗操作應在中央無菌區(qū)域,一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實驗物品,避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口,亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后,以手夾住瓶蓋并握住瓶身,傾斜約45°角取用,盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基:不同的細胞可能培養(yǎng)基不同,甚至不同的文獻可能對相同的細胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當時培養(yǎng)神經干細胞,有文獻就選用neurobase培養(yǎng)基,而我的實驗目的主要是做抗氧化和氧化方面的,而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分,此時,我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:4℃冰箱全溶后再分裝,在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質凝結而發(fā)生沉淀。熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到56℃后,將血清放入,待溫度升高到56℃后計時,一般5分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補體成份去活化。除非必須,一般不要作此熱處理,因為會造成沉淀物之顯著增多,且會影響血清之品質。注意更換新血清(包括不同批次)對細胞的影響。
MC3T3-E1 Subclone 14 Cells|小鼠顱頂前骨細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
BC-3H-1細胞系相關產品:H766T細胞、BALB/3T3 (clone A31)細胞、MCA 205細胞
bEnd3細胞系相關產品:OCI-LY-7細胞、T 98 G細胞、HEL9217細胞
Farage Original Line細胞系相關產品:IOSE-Van細胞、HO1N1細胞、HEL 299細胞
ABC1細胞系相關產品:Hs-852-T細胞、Sci-1細胞、R1800[RA]細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
有一些細胞是數(shù)量多一點比較好生長,生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細胞。譬如內皮細胞。而有一些是細胞是數(shù)量少一點細胞狀態(tài)會生長的比較好,譬如巨噬細胞和某些腫瘤細胞。尤其是巨噬細胞,生長速度非常得快,貼壁速度很快,所以傳代時就應該留很少量的細胞,這樣細胞狀態(tài)會比較好。并且巨噬細胞比較喜歡扎堆生長,而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候,細胞形態(tài)基本上就會差了,老化的會比較多,對后期實驗結果是不好的。所以在養(yǎng)細胞的時候應該摸索該細胞喜歡的生長空間密度問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細胞,如果細胞形態(tài)不好,(或者細胞形態(tài)不清晰,表面似有異物等)可以在傳代的時候進行如下操作:首先,倒掉舊的培養(yǎng)基,加入3ml新的培養(yǎng)基(有無血清的都可)洗滌一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培養(yǎng)基,進行預吹打,控制吹打力度,輕輕地大概沿著瓶底過一遍,然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。(巨噬細胞建議只吹打,不消化)其次,把吹打下來的細胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內,培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)箱內培養(yǎng),按時間點觀察細胞貼壁情況。10分鐘觀察一次,20分鐘,30分鐘觀察一次。選擇一個時間點,已經有部分細胞貼壁的情況下,重新置于潔凈臺,底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基,加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細胞生長情況以及形態(tài)。通常稱之為“二傳”。如果一次效果還不理想,可重復多次。直到找到細胞上乘形態(tài)。其中要注意,結合細胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數(shù)量長得好的細胞你就等貼壁細胞比較多點的時候再傳。反之亦然。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
MC3T3-E1 Subclone 14 Cells|小鼠顱頂前骨細胞系
細胞生長特性:貼壁
DHL-5細胞系相關產品:KS-1 [Human glioblastoma]細胞、Human Microvascular Endothelial Cell line-1細胞、HCC0070細胞
Homo sapiens No. 578, tumor cells細胞系相關產品:HS852.T細胞、NCI-H146細胞、Giant Cell Tumor細胞
aTC1 Clone 6細胞系相關產品:D407 RPE細胞、NCTC 1469細胞、4T1細胞
LLCMK2細胞系相關產品:L615細胞、Hs888Lu細胞、Hs_578t細胞
貼壁細胞傳代:去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;棄PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞,顯微鏡下觀察,待細胞變圓,細胞間隙明顯,部分細胞剛開始脫離瓶壁,加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化,將細胞小心吹打下來,1000rpm/min室溫離心5min;棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代:一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時,將細胞懸液移入離心管中,1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長,此時細胞生長狀態(tài)良好,當補液時,需避免反復吹打。
RCM1細胞系相關產品:J-82細胞、RMS 1598細胞、Laboratory of Allergic Diseases 2細胞
293S細胞系相關產品:CL-34細胞、LC1sq細胞、RBL-2H3細胞
NCI-SNU-620細胞系相關產品:NCI-441細胞、MKN 28細胞、MHCC97-L細胞
NTHY-ORI3.1細胞系相關產品:hEEC細胞、Mv1Lu細胞、HMy2.CIR細胞
OCI-LY-7細胞系相關產品:HEC-251細胞、SK-ES-1細胞、Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細胞
GA-10 (Clone 4)細胞系相關產品:JM細胞、CEM細胞、KMY1022細胞
NCI-H2405細胞系相關產品:MDA-MB-134VI細胞、OV3121細胞、MHHCALL2細胞
NCIH889細胞系相關產品:LS180細胞、SK-HEP-1細胞、FHL 124細胞
MC3T3-E1 Subclone 14 Cells|小鼠顱頂前骨細胞系
Hs888T細胞系相關產品:C4 I細胞、LPC-H12細胞、GOS3細胞
AsPC-1細胞系相關產品:MCF12A細胞、HCT-8/V細胞、LSECs細胞
Mel RM細胞系相關產品:MFC細胞、HEK-293-F細胞、H2135細胞
OCI-LY-7細胞系相關產品:HEC-251細胞、SK-ES-1細胞、Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細胞
H2135細胞系相關產品:HCC-1143細胞、Pa14C細胞、OCI-Ly19細胞
Hep G2細胞系相關產品:SKLU1細胞、NCI-H187細胞、C8166-CD4細胞
NCI-SNU-119細胞系相關產品:NRK clone 49F細胞、MDAMB134細胞、H-2172細胞
NPC-TW-039細胞系相關產品:MDAMB231細胞、OV433細胞、LWnt3A細胞
NPC-TW-039細胞系相關產品:MDAMB231細胞、OV433細胞、LWnt3A細胞
OCILY-19細胞系相關產品:HLEB3細胞、SUM149細胞、CV-1細胞
TE13細胞系相關產品:H1944細胞、GM05372細胞、CT26.CL25細胞
74Int細胞系相關產品:RT-BM細胞、H-1581細胞、H6c7細胞
G401細胞系相關產品:PaTu-8988s細胞、GM03571細胞、H322細胞
Human Melanoma Cell Bowes細胞系相關產品:Jeko1細胞、hEM15A細胞、Ca 9-22細胞
C22 (Clara)細胞系相關產品:EFM-192C細胞、HCC1833細胞、NCI/ADRRES細胞
B16-F10--RED細胞系相關產品:3T3(A31)細胞、RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細胞、HO-8910PM細胞
BMSCs(mBMSCs)細胞系相關產品:U-2OS細胞、Cloudman S91 melanoma細胞、BALB/3T3 (clone A31)細胞
GM00215細胞系相關產品:OS-RC-2細胞、NCIH524細胞、OCI AML2細胞
SW-579細胞系相關產品:OCI/AML3細胞、M-G63細胞、MAVER細胞
PANC0327細胞系相關產品:3T3 L1細胞、EU-2細胞、Granta-519細胞
S91細胞系相關產品:EFM192細胞、Walker-256細胞、MDAMB134細胞
M-14細胞系相關產品:SW626細胞、NIH 3T6細胞、BNL-CL.2細胞
MOLP-8細胞系相關產品:Hs 742.T細胞、HSC-4細胞、SNU475細胞
ONS-76細胞系相關產品:3D4/21細胞、SC細胞、KRC Y細胞
P3X63Ag8653細胞系相關產品:A704細胞、CHO cell clone K1細胞、HEC-1B細胞
HEL 299細胞系相關產品:H2085細胞、MM.1S細胞、L-5178-Y細胞
MDA-MB415細胞系相關產品:VMCUB-1細胞、CAL 85-1細胞、Y-1細胞
MDAMB436細胞系相關產品:SW-1990細胞、UMR-106細胞、SJRH-30細胞
Suzhou Human Glioma-44細胞系相關產品:52PE細胞、H-157細胞、B16 melanoma F10細胞
Co320細胞系相關產品:HOMEC細胞、H-508細胞、SU-DHL1細胞
U87-MG細胞系相關產品:NCI-H1385細胞、C3H10T1-2細胞、C33-A細胞
ATDC-5細胞系相關產品:KMST-6細胞、OVCAR-3細胞、MBMEC細胞
PE CA PJ34細胞系相關產品:H-716細胞、H-2286細胞、U-hth74細胞
PLA 802細胞系相關產品:MCF-7ADR細胞、Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細胞、MGH-UI細胞
Mc Coy細胞系相關產品:FHs74 Int細胞、526細胞、KASUMI1細胞
MDAMB415細胞系相關產品:293F細胞、SCL-I細胞、MDA436細胞
J45.01細胞系相關產品:H-87細胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細胞、KYSE0030細胞
BXPC3細胞系相關產品:ARPE-19細胞、Roswell Park Memorial Institute 6666細胞、H-7721細胞
D10細胞系相關產品:HDLM2細胞、ACC-2細胞、AAV293細胞
NCI-SNU-387細胞系相關產品:Scott and White No. 13細胞、SK-BR-3細胞、Y1細胞
2V6.11細胞系相關產品:IPLB-Sf21AE細胞、NCIH1299細胞、WC00044細胞
F36P細胞系相關產品:MiaPaCa-2細胞、WM-266-4細胞、373MG細胞
OVCAR.3細胞系相關產品:Vero C1008細胞、SKNEP1細胞、Madin Darby Canine Kidney細胞
HD-LM-2細胞系相關產品:EOC 20細胞、GM04679細胞、FU-MMT-1細胞
M-O7e細胞系相關產品:HCE-T細胞、EFO27細胞、NCIH548細胞
R 1610細胞系相關產品:E0771細胞、PA1細胞、MLE12細胞
LAPC4細胞系相關產品:EVSAT細胞、SNU886細胞、Bovine ENDometrial cells細胞
RPMI1846細胞系相關產品:KYSE50細胞、RSC-96細胞、HASMC細胞
U266-B1細胞系相關產品:PANC0403細胞、SK-MEL-5細胞、Super Tube細胞
SW626細胞系相關產品:XWLC-05細胞、VMRC-LCD細胞、HCV29細胞
Chang Cells細胞系相關產品:Z138細胞、G-361細胞、KYSE450細胞
MC3T3-E1 Subclone 14 Cells|小鼠顱頂前骨細胞系
SCaBER細胞系相關產品:QGY7703細胞、Panc327細胞、870細胞
SCL-II細胞系相關產品:C41細胞、GM04154細胞、SNU119細胞
NCI-SNU-620細胞系相關產品:NCI-441細胞、C-33 A細胞、TGBC11TKB細胞
SKNAS細胞系相關產品:MV 3細胞、CoCL3細胞、Homo sapiens No. 578, tumor cells細胞
"