"V79 Cells|倉鼠肺細胞系
細胞背景資料:肺;自發(fā)永生;雄性
細胞形態(tài):上皮細胞樣
Y3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KLN205細胞、MuM-2B細胞、hRMECs細胞
TCam-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMES-1細胞、NB-9細胞、HFF細胞
MRC-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1155細胞、Hep-3B細胞、SNU-C2A細胞
細胞生長:貼壁
細胞培養(yǎng)方面注意的幾點:無菌意識要強:實驗進行前,超凈臺以紫外燈照射30分鐘滅菌,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面,并開啟超凈工作臺風扇運轉(zhuǎn)數(shù)分鐘后,才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株,以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后,將實驗物品帶出工作臺,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應保持清潔及寬敞,必要物品,例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置,其它個人實驗用品用完應立即拿出。實驗用品以70%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實驗操作應在中央無菌區(qū)域,一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實驗物品,避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口,亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后,以手夾住瓶蓋并握住瓶身,傾斜約45°角取用,盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基:不同的細胞可能培養(yǎng)基不同,甚至不同的文獻可能對相同的細胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當時培養(yǎng)神經(jīng)干細胞,有文獻就選用neurobase培養(yǎng)基,而我的實驗目的主要是做抗氧化和氧化方面的,而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分,此時,我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:4℃冰箱全溶后再分裝,在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到56℃后,將血清放入,待溫度升高到56℃后計時,一般5分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補體成份去活化。除非必須,一般不要作此熱處理,因為會造成沉淀物之顯著增多,且會影響血清之品質(zhì)。注意更換新血清(包括不同批次)對細胞的影響。
V79 Cells|倉鼠肺細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
MRC-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1155細胞、Hep-3B細胞、SNU-C2A細胞
ARO81-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IBRS2細胞、Bowes melanoma cells細胞、CoCL2細胞
H-520細胞系相關(guān)產(chǎn)品:QGP-1細胞、UPCI-SCC090細胞、CPAE細胞
X63細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPASMC細胞、C8-D1A細胞、SU4細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
有一些細胞是數(shù)量多一點比較好生長,生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細胞。譬如內(nèi)皮細胞。而有一些是細胞是數(shù)量少一點細胞狀態(tài)會生長的比較好,譬如巨噬細胞和某些腫瘤細胞。尤其是巨噬細胞,生長速度非常得快,貼壁速度很快,所以傳代時就應該留很少量的細胞,這樣細胞狀態(tài)會比較好。并且巨噬細胞比較喜歡扎堆生長,而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候,細胞形態(tài)基本上就會差了,老化的會比較多,對后期實驗結(jié)果是不好的。所以在養(yǎng)細胞的時候應該摸索該細胞喜歡的生長空間密度問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細胞,如果細胞形態(tài)不好,(或者細胞形態(tài)不清晰,表面似有異物等)可以在傳代的時候進行如下操作:首先,倒掉舊的培養(yǎng)基,加入3ml新的培養(yǎng)基(有無血清的都可)洗滌一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培養(yǎng)基,進行預吹打,控制吹打力度,輕輕地大概沿著瓶底過一遍,然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。(巨噬細胞建議只吹打,不消化)其次,把吹打下來的細胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內(nèi),培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),按時間點觀察細胞貼壁情況。10分鐘觀察一次,20分鐘,30分鐘觀察一次。選擇一個時間點,已經(jīng)有部分細胞貼壁的情況下,重新置于潔凈臺,底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基,加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細胞生長情況以及形態(tài)。通常稱之為“二傳”。如果一次效果還不理想,可重復多次。直到找到細胞上乘形態(tài)。其中要注意,結(jié)合細胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數(shù)量長得好的細胞你就等貼壁細胞比較多點的時候再傳。反之亦然。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
V79 Cells|倉鼠肺細胞系
細胞生長特性:貼壁
JB6 Cl 30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-435細胞、HEY-A8細胞、NCIH1184細胞
H-3255細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 1080細胞、RL95細胞、B16-F10--RED細胞
H-1184細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES23.5細胞、Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細胞、MH-22a細胞
T-ALL 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ZR75-30細胞、NUGC-3細胞、OCI-Ly 19細胞
細胞傳代后放入培養(yǎng)箱沒有搖勻,或者放入時搖勻,但在細胞貼壁前,又移動了培養(yǎng)瓶,頻繁開關(guān)培養(yǎng)箱引起的振動或者培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液過少,培養(yǎng)箱擱板表面不平整,這些因素會導致細胞生長不均勻。研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。運輸過程對細胞有嚴重影響。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C 太久。一些懸浮細胞抱團生長是正?,F(xiàn)象,大部分懸浮細胞在細胞密度很高的情況下,很可能會出現(xiàn)部分細胞抱團生長的現(xiàn)象,聚團細胞很容易死亡并演化成絮狀物,殃及周圍的懸浮細胞,因此在培養(yǎng)懸浮細胞時需控制好細胞密度。如果出現(xiàn)了細胞團,可以通過細胞篩去掉部分較大的細胞團,也可以嘗試一下方法:將細胞懸液收集到15ml離心管中,靜置20min左右,小心取上層細胞上清培養(yǎng)(該方法只能去除部分較大的細胞團)。部分細胞本身存在一定的空泡(如HepG2,Ishikawa及一些耐藥株等),這個是正?,F(xiàn)象。如果只有少數(shù)細胞有內(nèi)出現(xiàn)極少空泡,則很可能是細胞狀態(tài)不佳,可以通過調(diào)整血清濃度,控制消化,控制傳代比例及時間等方法來調(diào)整細胞狀態(tài);如果大部分細胞出現(xiàn)空泡,且單個細胞內(nèi)空泡數(shù)目偏多,則可能細胞代次較高,細胞老化所致,需更換代次較早的細胞。
Panc-1-P細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H460細胞、GM03570E細胞、PLA801-95D細胞
NeHepLxHT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-C2A細胞、SLMT1細胞、SNU449細胞
TKB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Embryo Lung-1細胞、AMC-HN-8細胞、KYSE270細胞
Lung cancer-1/squamous細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UM-UC-3細胞、QBC-939細胞、H220細胞
SW-1353細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AZ521細胞、NCIH146細胞、C42細胞
COLO829細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-695T細胞、L-02細胞、H341細胞
AML-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL 299細胞、H1672細胞、CEF細胞
GLC82細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC 929細胞、Panc5.04細胞、TE-8細胞
V79 Cells|倉鼠肺細胞系
NIH-3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TM-4細胞、CAL-85-1細胞、HA1800細胞
E6-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRhK-4細胞、293 c18細胞、143 B細胞
Y3M細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCCLM3細胞、DiFi細胞、DHL8細胞
L-cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCI-SCC-090細胞、HCT 116細胞、Hopkins-92細胞
SUM 102細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Swiss-3T3細胞、ID8/MOSEC細胞、NFS60細胞
H1651細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVSAHO細胞、LC-2-Ad細胞、SkChA1細胞
SNG-M細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL5細胞、OVCA432細胞、CCC-HIE-2細胞
Ku812F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:159PT細胞、GC-2細胞、CD-18細胞
Ku812F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:159PT細胞、GC-2細胞、CD-18細胞
University of Arizona Cell Culture-893細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM2132細胞、SKBr3細胞、Sp2/O細胞
Hep 3B2.1-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB134細胞、LAPC4細胞、BT-325細胞
B16-BL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C6661細胞、COLO 357細胞、HLEC-B3細胞
Fetal Rhesus Kidney-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IGR-OV1細胞、HOS TE85細胞、LAN-6細胞
UWB1-289細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2780/CP細胞、HHFK細胞、DBTRG-05MG細胞
IHH-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PE CA PJ34細胞、CEM-C1細胞、L 132細胞
CAL 120細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CV-1.K細胞、D562細胞、MRC9細胞
CCD-33Co細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMC細胞、SKNEP-1細胞、SBC3細胞
TE-14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-20細胞、C33A細胞、HEC1A細胞
MDA PCa 2b細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO357細胞、NCI-H78細胞、HCT/FU細胞
TE85細胞系相關(guān)產(chǎn)品:tdott細胞、NCIH208細胞、Hs 840.T細胞
VP 229細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-680N細胞、BTI-Tn-5B1-4細胞、UM-UC3細胞
GTL16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1184細胞、H-1341細胞、MBVP細胞
KPL4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GT1-1細胞、WML2細胞、ABC1細胞
MGHU3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLT.4細胞、WM-115細胞、NCIH1963細胞
FDC-P1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT-93細胞、NCTC clone 929細胞、COLO 829細胞
U2OS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hela-Ap-1細胞、BIU-87細胞、KLN-205細胞
MIO-M1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL12細胞、OCI/AML2細胞、ZR7530細胞
NCI-H82細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VSC4.1細胞、PT67細胞、H2108細胞
TE 32.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF 767細胞、WEHI-3B細胞、C1498細胞
HEK AD293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63.Ag8.653細胞、C918細胞、SF-767細胞
Caco-2/BBe細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TB-1 Lu細胞、NB4細胞、TE 671細胞
HEK-293H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SGC7901/DDP細胞、H1650_CO細胞、10T1/2細胞
MDAMB361細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuH-6細胞、SW1783細胞、HT1080細胞
ECV304細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H82細胞、3T3L1細胞、GOS-3細胞
JB6 Cl 30-7b細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-ALL-1細胞、Jurkat-77細胞、NCI-H2030細胞
B958細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J774A.1細胞、C4-2 Bone metastatic細胞、NCI-H2195細胞
Chinese Hamster Lung細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1568細胞、PNT1-a細胞、COLO-320-DM細胞
TOV21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1563細胞、MDA-231細胞、OCI-Ly18細胞
EBTr (NBL-4)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep3B細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細胞、HHL5細胞
RCC-10RGB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caco-2細胞、HCC0038細胞、NHLF細胞
CT-26 WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Line 697細胞、CAL33細胞、Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細胞
Tn5 B1-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CORL51細胞、UCLA-RO 81細胞、B-3細胞
HCC1833細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBL-100細胞、NGEC細胞、HUT-125細胞
D10G41細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-102細胞、AR4IP細胞、bEnd3細胞
BaF3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECV304細胞、NCIH526細胞、H-1437細胞
COLO320HSR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2110細胞、SuDHL 4細胞、H2073細胞
CWR-22rv1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-929細胞、Hs 606細胞、DF-1細胞
MOLT-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HKBML細胞、NE1-E6E7細胞、BEL-7402細胞
Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NFHIOSE-29細胞、A 2058細胞、H-2347細胞
TEV-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:4175細胞、Pan02細胞、Normal fibroblast-10細胞
RWPE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker-256細胞、mIMCD3細胞、P3-X63-Ag8.653細胞
V79 Cells|倉鼠肺細胞系
P3.times.63 Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-520細胞、H2171細胞、ZR7530細胞
LN 229細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBMVEC細胞、HCA-7細胞、Calu-6細胞
TKB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Embryo Lung-1細胞、HC-11細胞、HEK-293-F細胞
NCIH660細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BALB/3T3細胞、P3JHR1細胞、D407細胞
"