"PLC/PRF/5 Adherent人肝癌亞力山大細胞系
細胞背景資料:該細胞系分泌乙肝病毒表面抗原(HBsAg)。 此細胞系原先被支原體污染,后用BM-cycline去除支原體
細胞形態(tài):上皮細胞樣
懸浮細胞不容易轉(zhuǎn)染:懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面,在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長,如淋巴細胞。在實驗室經(jīng)常會遇到懸浮細胞的轉(zhuǎn)染,其和貼壁細胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理,先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物,散布在細胞周圍,然后通過細胞的內(nèi)吞作用,將目的基因?qū)爰毎麅?nèi),而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞高出很多倍,所以,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細胞。其次,脂質(zhì)體試劑的毒性較大,這就使得懸浮細胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外,懸浮細胞不易培養(yǎng),易死亡,也給細胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提高懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率,可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑,如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法,針對懸浮細胞等難轉(zhuǎn)染細胞還是挺不錯的,電擊對細胞有一定的損傷,選用具有細胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑,可以將電擊對細胞的傷害降到最低,懸浮細胞不易轉(zhuǎn)染,選對試劑及良好的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
PLC/PRF/5 Adherent人肝癌亞力山大細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
我常看到一個比較復(fù)雜的四步消化法,這個挺有意思,我也是次聽說,應(yīng)該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來的方法,很有參考價值。但我估計這個方法可能對付少數(shù)非常怪異的細胞才需要這么復(fù)雜的程序。我目前養(yǎng)過的近300株細胞里面,還沒遇到這么怪異的。比如Caco2其實是很好消化的細胞,不需要胰酶孵育即可,只是有點成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好,這個視細胞而定。如果和標(biāo)準形態(tài)不一致,那可能是自己沒消化好導(dǎo)致的,但如果消化方法正確,仍然成片分布,甚至完全吹打成單細胞懸液,貼壁后仍然成片分布,這是細胞的特性,是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布,你的細胞之后會對你越來越不好;比較難消化的細胞(潤洗方法5min還不能消化),就以colon cancer為例,比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100 mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細胞,一般不超過5min,即可見細胞成片移動,就應(yīng)該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候,比如tsDC細胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動。
OVCAR-420細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LICR-HN-6細胞、MDA435細胞、SNU-216細胞
ST2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:R D細胞、RS4:11細胞、Hs675細胞
FL62891細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PCI-SG231細胞、SNU-601細胞、SNU-668細胞
細胞傳代方法:1:2傳代
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
HEK 293FT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CBRH7919細胞、HBE細胞、IAR 20細胞
Dysplastic Oral Keratinocyte細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ACC2細胞、SK-RC-42細胞、SKMEL1細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tsup-1細胞、P3X63Ag8細胞、HTori-3.1細胞
細胞生長特性:貼壁生長
PLC/PRF/5 Adherent人肝癌亞力山大細胞系
細胞形態(tài)特性:上皮樣
【細胞培養(yǎng)中支原體、黑蛟蟲、真菌的污染情況總結(jié)】支原體:黑色的,好象多為多形,培養(yǎng)液一般培養(yǎng)液一般會渾濁,原體感染,國內(nèi)血清很多都沒有做支原體陰性檢測,而支原體是牛血清中最常見的微生物之一。而且它不能用過濾的辦法除去。支原體感染細胞以后,細胞病變不很明顯,只是慢慢死去。用泰樂菌素,獸用支原體病的藥,但可用于細胞培養(yǎng),無任何不良反應(yīng)。如果作為常用的抗生素的話, 建議用8ug/ml的濃度;黑蛟蟲:可以穿透濾膜,也可以通過空氣傳播,低倍下為黑色點狀,高倍下可看見黑色的小蟲游來游去,培養(yǎng)液也是不渾的,一般不會太影響,細胞還是可以用的。常常是細胞生長狀態(tài)良好,且觀測到的運動物無明顯增多,且培養(yǎng)液顏色、透明度無明顯變化,可在同一批號的血清養(yǎng)的細胞中發(fā)現(xiàn)類似現(xiàn)象。對細胞生長狀態(tài)不會有明顯影響,在細胞增殖旺盛之后會自然消失,除更換血清外無須特殊處理。建議如果細胞有可能是此種污染的話,可以增加細胞的種板密度,以提高細胞的生存率;真菌:一般培養(yǎng)液清亮,不變色,鏡下有絲狀物,有些真菌開始很像死細胞碎片,只是它很多很多的小塊很清楚,象珊瑚狀,不象細胞碎片分不清,慢慢的會長出很細的黑色絲狀物。真菌生長的比較慢,不象細菌那么容易被發(fā)現(xiàn),但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細胞就被污染了,也很難救活了。
FHs74 Int細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRC-99細胞、Med 283細胞、LO2細胞
ONS76細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TCam 2細胞、He-La細胞、MG63細胞
Rainbow Trout Embryo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SupB15W細胞、BOWES細胞、TOG細胞
SMMC-7721細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD841CoN細胞、NCIH1651細胞、L Wnt-3A細胞
HuT 102細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAKI 1細胞、GM15452細胞、SW954細胞
GM00637B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Neukoplast細胞、L-M(TK-)細胞、alphaTC1 Clone 6細胞
HGMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFE 296細胞、DSL-6A/C1細胞、OVCAR-8細胞
Normal Rat Kidney-49F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-172MG細胞、Tu177細胞、HCC-1419細胞
Transformed Human Liver Epithelial-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OKT3細胞、MOLM-13細胞、RAW264細胞
SACC83細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BMSCs(mBMSCs)細胞、MLMA細胞、SF17細胞
NBL-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI no. 8226細胞、PL-12細胞、32D clone 3細胞
Human Melanoma Cell Bowes細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jeko1細胞、hEM15A細胞、Ca 9-22細胞
CF PAC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WSU-DLCL(2)細胞、NCI-H841細胞、TE12細胞
PLC/PRF/5 Adherent人肝癌亞力山大細胞系
SGC-996細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 604.T細胞、HCET細胞、LAN1細胞
KFB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:YAC-1細胞、KYSE0030細胞、TK-10細胞
V79細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCKII-WT細胞、SW-948細胞、Tokyo Medical and Dental university 8細胞
V79細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCKII-WT細胞、SW-948細胞、Tokyo Medical and Dental university 8細胞
PIEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-SH-SY5Y細胞、GC-1 spg細胞、WiDr-TC細胞
NCI-H1755細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEAS2B細胞、Leukemia 1210細胞、LCLC103H細胞
LS513細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI Ly1細胞、A-10細胞、NCI-H102細胞
Panc-813細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IA-LM細胞、PCI:SG-231細胞、OE-19細胞
Hs739T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly 7細胞、B-cell with DC Morphology細胞、H-2171細胞
NCI-460細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL12T細胞、GFP-Olig2細胞、MKN-7細胞
NT2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T1-73細胞、C 643細胞、NFHIOSE-80細胞
GM02132細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-620細胞、VMM5A細胞、A549ATCC細胞
MDA.MB.231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC 203細胞、VP267細胞、KY70細胞
FRO81-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIN-m細胞、SW1088細胞、NCI-H196細胞
V79-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAN5細胞、Tissue Culture-1細胞、HPAFII細胞
ECV-304細胞系相關(guān)產(chǎn)品:National Medical Center-Glioma 1細胞、F56 [Human neoplasm]細胞、SDBMSC細胞
KMB 17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF10A細胞、COV362細胞、SNU216細胞
SUDHL10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CV-1 in Origin Simian-7細胞、B16 BL6細胞、SW1271細胞
SUDHL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H841細胞、RAOEC細胞、ATN-1細胞
H740細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Neuro2a細胞、SUM-190細胞、IOSE80細胞
NTERA2-D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TGBC11TKB細胞、H378細胞、BT-549細胞
H-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1648細胞、NALM6細胞、H4IIE細胞
SUM-102PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MZCRC1細胞、UWB1289細胞、D283細胞
HUT125細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLE 12細胞、P3X63Ag8653細胞、32D clone3細胞
HCe-8693細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLM-16細胞、UACC893細胞、OCIAML5細胞
SV40-HCEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE-Mar細胞、Capan 2細胞、Nthy ori 3.1細胞
Madison細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RF/6A細胞、SF 126細胞、CBRH7919細胞
RBSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP-C4-2細胞、MDA MB231細胞、HFT 8810細胞
SUM52細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-12細胞、NCIH2081細胞、NCI-H524細胞
Leydig細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CTSC-3細胞、BPH-1細胞、MC3T3-L1細胞
NCIH1105細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ST 486細胞、CT26.WT細胞、H-1299細胞
NCI-HUT-520細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3J HR-1細胞、RS(4;11)細胞、MF2059細胞
EoL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MEG-01細胞、U-138-MG細胞、C-Li-7細胞
beta-TC6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BCPAP細胞、TE3細胞、Normal Rat Kidney-52E細胞
Vx-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuPT3細胞、GL-261細胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞
NCIH2452細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B-3細胞、NMCG1細胞、HPMEC細胞
U138MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT3細胞、Y3.AG.1.2.3細胞、MSTO-211 H細胞
HEM-L細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Z310細胞、SU.86.86細胞、ECC-12細胞
GM00637I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH292細胞、Medical University of Graz-Chordoma 1細胞、HS-940-T細胞
ssMCF7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mc Coy細胞、NCI-H2106細胞、BEL/FU細胞
HKF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-157細胞、OV1063細胞、NCIH520細胞
PLC-8024細胞系相關(guān)產(chǎn)品:aTC1-6細胞、BT-B細胞、AMC-HN8細胞
PLC/PRF/5 Adherent人肝癌亞力山大細胞系
Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MES1細胞、P3.653細胞、Human Embryonic Skin細胞
OCI/AML-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EC-GI-10細胞、253J-Bladder-V細胞、MHCC97-H細胞
Raji細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VAESBJ細胞、Hs737T細胞、HGC-27細胞
SUM 190PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS174T細胞、HeLaS3細胞、NE-1細胞
University of Arizona Cell Culture-812細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI 231細胞、HCC-1143細胞、NCIH460細胞
ST2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:R D細胞、RS4:11細胞、Hs675細胞
CSQT-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Blotchy fibroblast-11細胞、COR-L88細胞、BT-474細胞
RFL 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT 325細胞、HEC1-A細胞、SUM52細胞
T1-73細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PM6細胞、C12細胞、CL MC/9細胞
PC 61-5-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM637細胞、GM2131細胞、Keio University-19-19細胞
373 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OEC19細胞、A-875細胞、HRC-99細胞
Rainbow Trout Embryo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SupB15W細胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞、ESC細胞
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