"NCI-H661 Adherent人大細胞肺癌細胞系
細胞背景資料：該細胞１９８２年建系，源自一位患有大細胞肺癌的男性的胸腔積液。該細胞角蛋白、波形蛋白陽性。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞培養(yǎng)過程中，總是會出現(xiàn)各種意想不到的問題，一不留神就會全盤皆輸。所謂細胞虐我千百遍，我待細胞如初戀。下面是貼壁細胞的保藏方法，希望對細胞培養(yǎng)初學操作者有所幫助：1)觀察細胞狀態(tài)：貼壁細胞密度達到85-90%，即可以細胞凍存形式進行保藏，拍照，記錄細胞狀態(tài)；2)細胞清洗：培養(yǎng)皿表面消毒后，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液，加入12mlPBS，輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細胞，隨后吸除PBS清洗液；3)細胞消化：將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中，完全覆蓋細胞，置于顯微鏡下觀察（期間禁止搖晃培養(yǎng)皿），當細胞剛開始脫落時，立即轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余約0.5ml胰酶，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)消化，每30秒肉眼觀察細胞狀態(tài)，至細胞成流沙狀完全脫落，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，加入12ml完全培養(yǎng)基，終止消化；4)細胞離心：將終止消化后的細胞懸液吹打均勻，吸取至15ml離心管中，1000r/min（110g），離心3min；5)細胞凍存：離心后去除細胞上清液，按照凍存細胞量5*10^5/ml，吸取凍存液重懸細胞沉淀，吹打均勻后分裝至相應的凍存管中，進行凍存；6)細胞保藏：凍存管做好標記，放至程序降溫盒中，于4℃冰箱放置30min，轉(zhuǎn)移至-80℃超低溫冰箱過夜，將過夜后的凍存細胞轉(zhuǎn)移至液氮中保藏。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
NCI-H661 Adherent人大細胞肺癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
常規(guī)的細胞實驗(增殖，凋亡，遷移，分化之類的)，受消化影響不是很大，如果不用胰酶去孵育而使用潤洗的方法消化的話(難消化細胞例外)。但少數(shù)實驗，比如病毒包裝，對細胞代數(shù)，對細胞狀態(tài)要求極高。這個時候，胰酶消化，就是潤洗，都會對細胞包裝病毒的能力有影響，傳代次數(shù)一多，細胞包裝能力就會逐漸下降(當然也有其它因素影響包裝效率)。這個時候都不用胰酶消化，用一些鹽溶液(不是EDTA液)即可。這些鹽溶液通過影響ECM相關(guān)酶的活性，來使得細胞脫離基質(zhì)附著表面，但不切割任何蛋白；EDTA的作用。許多人不用胰酶，只用EDTA，或者用trypsin/EDTA聯(lián)合作用。這里要明白，trypsin切割ECM的一些負責粘連和附著的蛋白，而EDTA通過螯合Ca離子，作用于Integrin的活性，所以EDTA的作用更加溫和。有的人在trypsin里添加一些EDTA，或者對付特別難消化的細胞，添加多一些EDTA，就是這個道理。一般不要試圖延長消化時間(如果１０min還消化不徹底的話)，而應該想其它辦法；PBS洗滌。消化之前用PBS洗滌，是常見的操作，因為Serum含有抑制trypsin的蛋白。但這里面也有學問可以講，對于一些難消化細胞，那么可以配制不含Ca，Mg離子的PBS，因為這些離子也會抑制trypsin的活性。但對于絕大部分胰酶或者EDTA溶液潤洗即可消化的細胞，不需要配制如此溶液。
PANC403細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MFM223細胞、Hs294T細胞、H-929細胞
COLO 320DM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：4T1.2細胞、R2C細胞、C3H/10T1/2 CL8細胞
MES-SA/Dx-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS1細胞、HEK 293T/17細胞、HSCT6細胞
細胞傳代方法：１：３—１：５傳代，每周換液２—３次
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
SKNAS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNK-6細胞、Super Tube細胞、NIH:OVCAR4細胞
NR-8383細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU4細胞、NK92細胞、HFL 1細胞
Ramos細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL51細胞、PC-9細胞、C32 mel細胞
細胞生長特性：貼壁生長
NCI-H661 Adherent人大細胞肺癌細胞系
細胞形態(tài)特性：上皮樣
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成細胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后，應立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马棥浚?掌握好細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導致細胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當消化液濃度過高時，消化時間應縮短，過低時細胞消化時間相對延長。
MJ細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RN細胞、NCI-SNU-119細胞、Jurkat-FHCRC細胞
KMBC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN-28細胞、TE 85 ClF-5細胞、Neukoplast細胞
C-28/I2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-32細胞、L-5178-Y-R細胞、BNCL-2細胞
YD-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H64細胞、293-FT細胞、MS 751細胞
HCC-1599細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B/C3T3細胞、HBEpiC細胞、Human ErythroLeukemia細胞
CEM-0細胞系相關(guān)產(chǎn)品：33604細胞、NCIH1341細胞、NB1-RGB細胞
Calu-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GTL-16細胞、SW-13細胞、GM06141細胞
L cells (TK-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Karpas 422細胞、H1882細胞、OV-CA 432細胞
SNU-407細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-44細胞、SK UT 1細胞、TE-1細胞
H1915細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MNNG/HOS細胞、AD293細胞、SCC 25細胞
HCC0078細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT144細胞、OVCAR-4細胞、HRCEC細胞
ATN-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit 225細胞、EMT-6細胞、H1915細胞
2780細胞系相關(guān)產(chǎn)品：aTC1 Clone 6細胞、T-47D細胞、HCC-1428細胞
NCI-H661 Adherent人大細胞肺癌細胞系
MIA-Pa-Ca-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：451-LU細胞、JEG-3細胞、Panc 08.13細胞
SW-900細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HD11細胞、Hs68細胞、AMO1細胞
Walker-256細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AR4-IP細胞、HCC0366細胞、HEL-92_1_7細胞
Walker-256細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AR4-IP細胞、HCC0366細胞、HEL-92_1_7細胞
NCI-HUT-125細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos.2G6.4C10細胞、Jurkat E6細胞、C33細胞
HIT T15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SuDHL 8細胞、DH82細胞、TCMK-1細胞
Hs840T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BTI-Tn5B14細胞、NCI H548細胞、HT-55細胞
MV-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1672細胞、Caco-2/BBe細胞、TGBC-11-TKB細胞
NR 8383細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RH-30細胞、SF 539細胞、PLC8024細胞
PK13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIA PaCa-2細胞、MM1S細胞、BEAS-2B細胞
Lewis lung carcinoma line 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA157細胞、IPEC-1細胞、SNU119細胞
MDA-MB-175細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293T/17細胞、MDA-MB-453細胞、UCH-1細胞
RT 112細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLC/PRF5細胞、H-2291細胞、KYSE0520細胞
D-341細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NHA細胞、COLO684細胞、BE2-M17細胞
Hs 940.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CoC1細胞、TE10細胞、MEF (CF-1)細胞
RSC-364細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H-128細胞、KMBC細胞、MES-SA細胞
HFF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MAEC細胞、HuH 6細胞、P3.653細胞
149PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT-4細胞、NCIH2405細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-435細胞
Panc 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PA317細胞、TE5細胞、OCI-Ly01細胞
TE-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK MEL 28細胞、MFC細胞、REC-1細胞
CHL-IU細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU-812-F細胞、SK-BR3細胞、QGY-7703細胞
LA-795細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NR 8383細胞、HTori 3細胞、DHL6細胞
NS-1-Ag4-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H661細胞、Tb1Lu細胞、OUMS27細胞
KAT-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2030細胞、NCIH1993細胞、CMT93細胞
SW756細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA-SO-M14細胞、7860細胞、CAL120細胞
H-2227細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT1197細胞、HUT 125細胞、J.E6-1細胞
S-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs578Bst細胞、Vero 76 clone E-6細胞、QGY 7701細胞
MDCK2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-134細胞、Jurkat77細胞、SPC-A-1細胞
KYSE30細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF7/WT細胞、Lymph Node Carcinoma of the prostate細胞、HCA7細胞
H-441細胞系相關(guān)產(chǎn)品：769-P細胞、OVCAR 5細胞、SUM-190PT細胞
HFL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLaS3細胞、hTERT RPE-1細胞、SKLU-1細胞
NCIH1869細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2.35細胞、NCI-H345細胞、NCI-H-295細胞
AR4-IP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：S3 HeLa細胞、Scott and White No. 13細胞、Rat Fetal Lung-6細胞
C32-mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GLAG-66細胞、huH 1細胞、WEHI-279細胞
PC2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nb2細胞、HOP92細胞、HLEB3細胞
CZ-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ST細胞、EFO-27細胞、HMC細胞
H-2171細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2030細胞、MO59J細胞、HIT T-15細胞
CAL 12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PTK2細胞、HO8910/PM細胞、IPLB-SF 21細胞
GDM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat-FHCRC細胞、WPMY-1細胞、MKN-1細胞
ChaGo-K-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Michigan Cancer Foundation-7細胞、LS123細胞、CAKI1細胞
NCI-H522細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJCRH30細胞、RIN-m 14B細胞、H2170細胞
LIM-1215細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC0327細胞、CEMx721.174.T2細胞、GM00637F細胞
NCI-H661 Adherent人大細胞肺癌細胞系
Mouse Colon 38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KTC1細胞、SNU-484細胞、MDA-231細胞
AN3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kasumi 1細胞、alpha TC1 clone 6細胞、MNNG/HOS Cl #5細胞
DLD 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-3細胞、MCF-12A細胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞
H446細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUIT 2細胞、OV-CA 432細胞、SF 767細胞
H1975細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM0637細胞、Spodoptera frugiperda clone 9細胞、Human Epidermoid carcinoma #2細胞
GI-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-10細胞、SW-1088細胞、National Medical Center-Glioma 1細胞
HNE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RINm5F細胞、TE-14細胞、AX-Mel細胞
BMSC/hBMSCs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-398細胞、H-820細胞、251MG細胞
Line 697細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUT 226細胞、L-cells細胞、HeLa-S3細胞
HLFa細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1563細胞、LoVo細胞、MBdSMC細胞
Huh7.5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs819.T細胞、PL-9細胞、NCI-H2085細胞
C-28/I2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-32細胞、USMC細胞、T-24細胞
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