"NCI-H226 Adherent人肺鱗癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:1980年分離建立。
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)分布不均勻,通常操作步驟:做細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn),細(xì)胞鋪板大概是我們最常見的一個(gè)實(shí)驗(yàn)。但有時(shí)候鋪得不是很均勻:要么中間密周圍稀,要么周圍密中間禿頂。下面為大家分享幾點(diǎn)經(jīng)驗(yàn)。盡量消化細(xì)胞分散成單細(xì)胞懸液。對(duì)于易于消化的細(xì)胞,我一般DPBS清洗一遍,加0.5ml胰酶潤(rùn)洗一遍(25cm2培養(yǎng)瓶或6孔板),棄掉胰酶,37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右,鏡下觀察是否細(xì)胞消化較為分散。如果不夠,延長(zhǎng)消化時(shí)間。96孔板一般以100微升每孔接種,直接用100微升移液器吸取細(xì)胞懸液,沿孔壁(稍離開一點(diǎn)孔底即可,不要離底太高)直接接入,移液器不需完全打到,輕輕按下即可,每鋪完一行換一次槍頭同時(shí)輕輕混勻細(xì)胞懸液。都加完后蓋上蓋子,左手輕輕扶住板的左邊,右手輕輕敲擊板的右邊緣,注意把握力度(我一般輕巧敲三下),太強(qiáng)或次數(shù)太多會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞集中成堆,將板順時(shí)針旋轉(zhuǎn)(逆時(shí)針效果不好),依次敲擊剩余三個(gè)邊,靜置約5分鐘,放入37度培養(yǎng)箱。6孔板、12孔板或24孔板,可采用將每個(gè)孔加入少量無(wú)血清培養(yǎng)基,晃動(dòng)浸潤(rùn)整個(gè)孔底,然后用移液槍吸至第二孔,同樣方法浸潤(rùn)孔底,其它孔依此類推,這樣整個(gè)孔底都是濕潤(rùn)的,細(xì)胞懸液會(huì)平鋪在整個(gè)孔底,注意加完細(xì)胞懸液后要放工作臺(tái)靜置一下。這個(gè)方法就是有點(diǎn)慢,但操作熟練了也不慢。也可以采用輕拍的方式,但力度沒有96孔板好掌握,效果沒有96孔板好。培養(yǎng)瓶里面加好細(xì)胞以后(比如傳代好/分好細(xì)胞以后),先順時(shí)針搖晃3次,馬上逆時(shí)針搖晃3次。然后延X軸Y軸分別水平搖動(dòng)3次。放入CO2培養(yǎng)箱后,平放著培養(yǎng)瓶重復(fù)延X軸Y軸分別水平搖動(dòng)3次。
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
NCI-H226 Adherent人肺鱗癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
我常看到一個(gè)比較復(fù)雜的四步消化法,這個(gè)挺有意思,我也是次聽說,應(yīng)該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來的方法,很有參考價(jià)值。但我估計(jì)這個(gè)方法可能對(duì)付少數(shù)非常怪異的細(xì)胞才需要這么復(fù)雜的程序。我目前養(yǎng)過的近300株細(xì)胞里面,還沒遇到這么怪異的。比如Caco2其實(shí)是很好消化的細(xì)胞,不需要胰酶孵育即可,只是有點(diǎn)成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好,這個(gè)視細(xì)胞而定。如果和標(biāo)準(zhǔn)形態(tài)不一致,那可能是自己沒消化好導(dǎo)致的,但如果消化方法正確,仍然成片分布,甚至完全吹打成單細(xì)胞懸液,貼壁后仍然成片分布,這是細(xì)胞的特性,是因?yàn)橘N壁過程中重新聚集了。這個(gè)時(shí)候你拼了命要去讓它均勻分布,你的細(xì)胞之后會(huì)對(duì)你越來越不好;比較難消化的細(xì)胞(潤(rùn)洗方法5min還不能消化),就以colon cancer為例,比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100 mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細(xì)胞,一般不超過5min,即可見細(xì)胞成片移動(dòng),就應(yīng)該停止消化。一些正常細(xì)胞也會(huì)有難消化的時(shí)候,比如tsDC細(xì)胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動(dòng)。
SK-OV-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM-239-A細(xì)胞、TCMK1細(xì)胞、NCIH2405細(xì)胞
GA-10 (Clone 4)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JM細(xì)胞、CEM細(xì)胞、KMY1022細(xì)胞
COLO-679細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-6細(xì)胞、H283細(xì)胞、3T3-442A細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2傳代
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
COV504細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H341細(xì)胞、Rh30細(xì)胞、Hs 27細(xì)胞
H9c2 (2-1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT clone H9細(xì)胞、SKRC-52細(xì)胞、LIPF155C細(xì)胞
Soleus clone 8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat Glomerular Endothelial細(xì)胞、HT 1080細(xì)胞、OCI-LY-10細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
NCI-H226 Adherent人肺鱗癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞接收操作說明:請(qǐng)仔細(xì)閱讀本操作說明及相應(yīng)的細(xì)胞說明書。本公司細(xì)胞發(fā)貨有四種形式:T25培養(yǎng)瓶(一般是貼壁細(xì)胞使用,懸浮細(xì)胞也可以)、離心管(懸浮細(xì)胞使用多,當(dāng)然,有些公司也會(huì)用這種離心管形式發(fā)貼壁細(xì)胞,但是,長(zhǎng)期經(jīng)驗(yàn)來說,貼壁細(xì)胞容易發(fā)生形態(tài)變化,估計(jì)是細(xì)胞培養(yǎng)空間狹小,血清不足導(dǎo)致(最主要是怕運(yùn)輸延誤導(dǎo)致這些情況發(fā)生),個(gè)人不建議用離心管形式發(fā)貼壁細(xì)胞)及干冰(凍存細(xì)胞用,主要是冬天天氣冷,溫度低于4℃的地方,都要考慮凍存細(xì)胞)。T25培養(yǎng)瓶:是用T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶直接發(fā)貨的形式。收到細(xì)胞后,拆開包裝T25培養(yǎng)瓶的自封袋,不拆封口膜,表面噴75%酒精消毒后顯微鏡觀察細(xì)胞狀態(tài)(有條件可以拍下此時(shí)細(xì)胞照片)。將細(xì)胞放入37度培養(yǎng)箱平衡兩小時(shí)以上,再處理細(xì)胞。首先將T25中培養(yǎng)基取出裝好備用,如細(xì)胞密度高于80%,可以直接消化傳代,相反則加入5-6ml培養(yǎng)基放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)即可。離心管:是用15ml離心管發(fā)貨的形式,只用于懸浮細(xì)胞發(fā)貨。收到細(xì)胞后消毒處理及將細(xì)胞放入37度培養(yǎng)箱平衡兩小時(shí)以上,再處理細(xì)胞。首先將T25中培養(yǎng)基取出裝好備用(如果實(shí)驗(yàn)室沒有T25培養(yǎng)瓶,可以暫時(shí)T75培養(yǎng)瓶,加入10-15ml培養(yǎng)基,建議10ml培養(yǎng)基,也可以使用T175培養(yǎng)瓶,加入50-60ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)瓶越大,需要的培養(yǎng)基越多。當(dāng)然如果剛接收到細(xì)胞密度不夠的話,不用大瓶子,先用小瓶子養(yǎng)起來再換大的,不然會(huì)長(zhǎng)得很慢,嚴(yán)重的,會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞死亡等危險(xiǎn)),平衡完成后,離心(1000rpm,3min)收集細(xì)胞,棄上清,用新的培養(yǎng)基重懸細(xì)胞并接種至培養(yǎng)瓶或皿中,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。干冰:是用本公司凍存液凍存細(xì)胞后,直接用干冰將凍存的細(xì)胞冷凍發(fā)貨的形式。收到細(xì)胞后按照細(xì)胞復(fù)蘇的步驟操作即可。
SK-MEL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BV173細(xì)胞、ACC-M細(xì)胞、MDA-436細(xì)胞
GA-10-Clone-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGH-U3細(xì)胞、NCIH2135細(xì)胞、SKLMS-1細(xì)胞
Roswell Park Memorial Institute 8226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Clone Y1細(xì)胞、H-2087細(xì)胞、SRA 01/04細(xì)胞
SUDHL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-M (TK-)細(xì)胞、SV-HUC細(xì)胞、NCTC929細(xì)胞
Buffalo Rat Liver-3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMRCLCD細(xì)胞、Hs940.T細(xì)胞、Verda reno細(xì)胞
MC 116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM06141細(xì)胞、KFB細(xì)胞、MH-S細(xì)胞
H1563細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM00346細(xì)胞、T98細(xì)胞、MT2細(xì)胞
QSG-7701細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 626細(xì)胞、Y3-Ag1.2.3細(xì)胞、RPTC細(xì)胞
RH8994細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SVGp12細(xì)胞、Opossum Kidney細(xì)胞、NCI-H3255細(xì)胞
H-1618細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PCI:SG-231細(xì)胞、JROECL 33細(xì)胞、BC-019細(xì)胞
H-2073細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sf21細(xì)胞、KMB17細(xì)胞、Huh-7細(xì)胞
SAS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GA-10-Clone-4細(xì)胞、NPA細(xì)胞、H-650細(xì)胞
OSK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:REC-1細(xì)胞、Pro-5 Lec1.3c細(xì)胞、A-549細(xì)胞
NCI-H226 Adherent人肺鱗癌細(xì)胞系
RBVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI AML2細(xì)胞、HDLM2細(xì)胞、HBZY 1細(xì)胞
SNU-387細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1395細(xì)胞、NCIH1105細(xì)胞、UMNSAH/DF#1細(xì)胞
NOR-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ROS-17/2.8細(xì)胞、H146細(xì)胞、SKNFI細(xì)胞
NOR-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ROS-17/2.8細(xì)胞、H146細(xì)胞、SKNFI細(xì)胞
OCI-Ly 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE8細(xì)胞、RGCs細(xì)胞、A549 ATCC細(xì)胞
BT-483細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C8161細(xì)胞、JROECL33細(xì)胞、U-87-MG細(xì)胞
NIH-3T3-L1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sup T-1細(xì)胞、B4G12細(xì)胞、RM1細(xì)胞
Rat-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMS18細(xì)胞、Kit225-K6細(xì)胞、526細(xì)胞
RIN-14B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Uhth-74細(xì)胞、TE11細(xì)胞、TE10細(xì)胞
HCa/16A3-F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHEP1細(xì)胞、CCK-81細(xì)胞、RA.1細(xì)胞
Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:QBC(939)細(xì)胞、JB 6細(xì)胞、HIT T15細(xì)胞
L-02細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H4IIE細(xì)胞、H-2330細(xì)胞、ECC 12細(xì)胞
Caco-2BBe細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 954細(xì)胞、SCC-9細(xì)胞、NCI-H2141細(xì)胞
H-526細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMEC-1細(xì)胞、GM05384細(xì)胞、Mono-Mac-1細(xì)胞
MOLT 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H676B細(xì)胞、NBLAN5T細(xì)胞、TMK-1細(xì)胞
NCI-H2196細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MA-104細(xì)胞、6-10B細(xì)胞、H-1915細(xì)胞
CAL 148細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TPC-1細(xì)胞、SNK-1細(xì)胞、HRA-19細(xì)胞
QBC939細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRA-19細(xì)胞、TE9細(xì)胞、C518細(xì)胞
NCI-H125細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J82COT細(xì)胞、SKMEL28細(xì)胞、HT144-mel細(xì)胞
T2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-38細(xì)胞、Mel-624細(xì)胞、Hs-695-T細(xì)胞
HEK 293-EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIT clone T15細(xì)胞、NCIH211細(xì)胞、SUM-52-PE細(xì)胞
HUSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-847細(xì)胞、Hep G2細(xì)胞、COLO 320F細(xì)胞
H-1770細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RSC 96細(xì)胞、Fetal Human Lens-124細(xì)胞、PLC/PRF/5細(xì)胞
Hs_578t細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOZC-1細(xì)胞、MILE SVEN 1細(xì)胞、NCIH1876細(xì)胞
HFSF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:526-mel細(xì)胞、C4-I細(xì)胞、TE15細(xì)胞
AU-565細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LCLC-103H細(xì)胞、Clone 166細(xì)胞、Panc04.03細(xì)胞
Vero 76細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE(1)細(xì)胞、HM細(xì)胞、PG-4 S+L-細(xì)胞
RPMI #1846細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KE37細(xì)胞、HSC4細(xì)胞、HS578T細(xì)胞
130-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:G361-mel細(xì)胞、Pt-K2細(xì)胞、SUM 159PT細(xì)胞
LS 513細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H292細(xì)胞、Molm14細(xì)胞、XuanWei Lung Cancer-05細(xì)胞
SK-ES-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CD18/HPAF細(xì)胞、GCT細(xì)胞、N87細(xì)胞
H1734細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-250細(xì)胞、211H細(xì)胞、BE2C細(xì)胞
MDA-MB-134細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA432細(xì)胞、Tu212細(xì)胞、624-mel細(xì)胞
H1395細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MIO-M1細(xì)胞、Hs840_T細(xì)胞、Caco2BBe細(xì)胞
Balb/3T3-4-Cl31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL-5細(xì)胞、Tb1.Lu細(xì)胞、CHG5細(xì)胞
AM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFLS-RA細(xì)胞、GLC-15細(xì)胞、HO1N1細(xì)胞
NCIADRRES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RWPE-1細(xì)胞、CEL細(xì)胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細(xì)胞
VM-CUB-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHIN-3細(xì)胞、HFL 1細(xì)胞、HOS(TE85)細(xì)胞
RPMI7666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFD-1細(xì)胞、EFM192C細(xì)胞、Panc_05_04細(xì)胞
PANC0203細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-BR3細(xì)胞、SNU423細(xì)胞、HeLa 229細(xì)胞
H1238細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Dysplastic Oral Keratinocyte細(xì)胞、PC-3M-IE8細(xì)胞、A549-Taxol細(xì)胞
P3J HR-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM02219C細(xì)胞、NCI.H23細(xì)胞、MDA-MB-231-luc細(xì)胞
NCI-H226 Adherent人肺鱗癌細(xì)胞系
Ramos.G6.C10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-3T3細(xì)胞、ONS-76細(xì)胞、HUC細(xì)胞
HCC44細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH358細(xì)胞、SF295細(xì)胞、ME1細(xì)胞
H2286細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU-812F細(xì)胞、MUVEC細(xì)胞、SuDHL 8細(xì)胞
A375-S2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 7666細(xì)胞、SU-DHL-16細(xì)胞、C8166細(xì)胞
LS-180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO678細(xì)胞、ABC1細(xì)胞、K1735細(xì)胞
HTori:3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KBM-7/Hap8細(xì)胞、H4-II-E細(xì)胞、SCC7細(xì)胞
Y3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KLN205細(xì)胞、MuM-2B細(xì)胞、hRMECs細(xì)胞
SU86_86細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFL-I細(xì)胞、Melan-a細(xì)胞、L-Wnt3A細(xì)胞
HPMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FF-WT-BJ細(xì)胞、HEL-92_1_7細(xì)胞、RFL6細(xì)胞
Adeno-293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMRC-LCD細(xì)胞、L-1210細(xì)胞、UK Pan-1細(xì)胞
Hs840_T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LIXC002細(xì)胞、PCI-4.2細(xì)胞、Y3-Ag123細(xì)胞
Roswell Park Memorial Institute 8226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Clone Y1細(xì)胞、RPMI1788細(xì)胞、QGP1細(xì)胞
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