"PLB-985 Lymphoblastoid cells人急性髓系白血病細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài):淋巴母細胞樣
正確的細胞復(fù)蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復(fù)蘇。那么,細胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調(diào)整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復(fù)蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
NCI-H2227細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2286細胞、HC11細胞、FAT細胞
HHUA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U266BL細胞、Hs-578Bst細胞、NK92-MI細胞
LNCaP C4-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW480E細胞、DI TNC-1細胞、NK92細胞
細胞生長:懸浮
PLB-985 Lymphoblastoid cells人急性髓系白血病細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享:支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長,營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達,又不能通過可視法對其進行檢測,而且它對細胞的生長率影響較小,不易引起注意。國內(nèi)外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細胞的支原體種類是很多的,國外調(diào)查證明,大約有二十多種支原體能污染細胞,有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個方面來預(yù)防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴格實驗操作;細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后,特別是重要的細胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細胞壁,一般來講,對作用于細胞壁生物合成的抗生素,如萬古霉素等完全不敏感;對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用,所以常不用來作為支原體感染的化學(xué)治療劑。
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
H-865細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Huh-7.5細胞、A20細胞、SKES-1細胞
AML 12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kit225 K6細胞、NCI-H1882細胞、NCIN87細胞
WM266mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hepatoma-22細胞、HEK-293細胞、CEMC1細胞
NEC-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-10細胞、Panc2_03細胞、KTA7細胞
MHCC97L細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MESSADX5細胞、COLO 741細胞、CEM-C7細胞
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
PLB-985 Lymphoblastoid cells人急性髓系白血病細胞系
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導(dǎo)致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復(fù)蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
WIL2 S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OSKM-1細胞、SW-1222細胞、HCC-2218細胞
OCILY-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLEB3細胞、SUM149細胞、CV-1細胞
SCC-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ls-174-T細胞、TU 686細胞、A2780/CP70細胞
NBL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-1 sq細胞、Highly Aggressively Proliferating Immortalized細胞、KU19-19細胞
UT-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCCC-9810細胞、Panc_04_03細胞、FL62891細胞
SKG-3a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TALL1細胞、NIT-1細胞、Hs 604.T細胞
2B4-L細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNF1細胞、Hs 343.T細胞、GM04680細胞
SUNE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D10G41細胞、SCC 15細胞、Hs822T細胞
RAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC2279細胞、NCIH2122細胞、HM06.A1細胞
CMT 167細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLC-PK(1)細胞、VERO76細胞、RL95-2細胞
PLB-985 Lymphoblastoid cells人急性髓系白血病細胞系
NCI-H660細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL5細胞、GM03573細胞、LS 1034細胞
HO1-N1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-8細胞、Dakiki細胞、YH-13細胞
H-146細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1359細胞、H64細胞、KALS1細胞
TE6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MEF細胞、Hs 274.T細胞、DLM8細胞
SUM-149PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AU 565細胞、LIM 1215細胞、HEYA8細胞
NMC-G1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MB157細胞、HLCL9B10細胞、PanC1細胞
NMC-G1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MB157細胞、HLCL9B10細胞、PanC1細胞
HCC0202細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B-CPAP細胞、HT-29/CX-1細胞、OV-1063細胞
WM451Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS 1.Tes細胞、U-138 MG細胞、NK10a細胞
Ball 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM-H2細胞、HMEC1細胞、GM03569B細胞
VP303細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Huh-7細胞、COLO 205細胞、MOLP-8細胞
MB39細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mc Ardle 7777細胞、JROECL 19細胞、NIH-3T3-L1細胞
MDBK (NBL-1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H378細胞、RIN-m細胞、COR-L23/P細胞
NCI-SNU-407細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAMA1細胞、UC-3細胞、H-2009細胞
MDA453細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EMT-6細胞、CEM clone 7細胞、P3/X63-Ag8細胞
MC9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD1112Sk細胞、KYSE-180細胞、0V-1063細胞
OVISE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1954BL細胞、H2087細胞、HM細胞
MDBK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC10細胞、U-hth74細胞、HBZY1細胞
FRhK4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH508細胞、CCLP-1細胞、Tn 5B1-4細胞
FRhK4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH508細胞、CCLP-1細胞、Tn 5B1-4細胞
LICR-LON-HN6-R細胞系相關(guān)產(chǎn)品:751細胞、VM-CUB-1細胞、IGR.OV1細胞
Detroit 562細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL6細胞、PaTu 8988s細胞、Hs746T細胞
Ca Ski細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tb 1 Lu (NBL-12)細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細胞、D-407細胞
H2052細胞系相關(guān)產(chǎn)品:K-562細胞、P560細胞、L cells (TK-)細胞
Psi-2 DAP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFT 8810細胞、SJRH 30細胞、HCC1954 BL細胞
K422細胞系相關(guān)產(chǎn)品:N2a細胞、DHL-8細胞、Chang Cells細胞
LN229細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 870.T細胞、H647ell細胞、Swiss3T3細胞
Anip 973細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OE21細胞、CCD-966SK細胞、Co 115細胞
EBTr細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RWPE2細胞、SNU869細胞、TSU-Pr1細胞
MOPC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-294細胞、GM3570細胞、C57 Mouse Tumor 64細胞
NK-10A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63細胞、EFO 27細胞、LL/2(LLc1)細胞
B16/F0細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3/ag細胞、SW-839細胞、ATN1細胞
OVCA-433細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS細胞、NCC-IT細胞、Bowes melanoma cells細胞
ST 486細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCEC-B4G12細胞、KLN 205細胞、BMF細胞
H4IIE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1975細胞、M109細胞、C4I細胞
Hs-688A-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP.FGC細胞、ANA1細胞、HTR-8/SV-neo細胞
H-1688細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA330細胞、LLC-PK-1細胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細胞
DH-82細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC-03-27細胞、CMT167細胞、BC-009細胞
DH-82細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC-03-27細胞、CMT167細胞、BC-009細胞
253JBV細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT549細胞、Hs 578.T細胞、BJ [Human fibroblast]細胞
NHEK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA 435細胞、526 mel細胞、OCI-Ly 18細胞
CMT93細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-2細胞、HCS2/8細胞、SK.OV.3細胞
MOLP8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D341MD細胞、LX-2細胞、McCoy B細胞
Eca-109細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL1細胞、F-36P細胞、HCMEC(BL12-H)細胞
HCT8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3 NS1 Ag4細胞、G361mel細胞、MDA MB231細胞
MLMA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H727細胞、COLO-16細胞、SW1417細胞
H-1672細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3M細胞、Calu-3細胞、SK MEL 28細胞
BTT739細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-937細胞、H1869細胞、My-La 2059細胞
HM1900細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 636.T細胞、RFL6細胞、Immortal Pig Intestinal-2I細胞
FU-MMT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KG-1a細胞、H-522細胞、SK-Mel 2細胞
RL95-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Clone 166細胞、GM03570細胞、Molm 13細胞
PLB-985 Lymphoblastoid cells人急性髓系白血病細胞系
H2081細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hFOB細胞、NCI-H2171細胞、CP70細胞
Centre Antoine Lacassagne-62細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MESSA細胞、BV2細胞、LIXC002細胞
RBMVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DoTc2 4510細胞、FU-97細胞、LAN-5細胞
SCC-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ls-174-T細胞、U-266 AR1細胞、OVCAR 420細胞
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