"M-07e Lymphoblastoid cells人巨核細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣
細胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
HCC-1359細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-159PT細胞、NIH:OVCAR-4細胞、Karpas-299細胞
SW 1783細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL7404細胞、P-388細胞、LTPA細胞
MH-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細胞、PC12(高分化)細胞、KE39細胞
細胞生長：懸浮
M-07e Lymphoblastoid cells人巨核細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結(jié)凍時體積會增加約１０%，必須預(yù)留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞，而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”：通常經(jīng)過熱處理之血清，沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”，常會誤認為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會使此沈淀物增多，更會誤認為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測，又沒有污染。一般而言，此小黑點應(yīng)不會影響細胞之生長，但若懷疑此血清之品質(zhì)，應(yīng)立即停用，更換另一批號的血清。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
CEF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細胞、343 MG細胞、MALME 3M細胞
OCI-Ly10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIN-m 14B細胞、Hs 578T細胞、P388.D1細胞
TW-039細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT-4細胞、102PT細胞、GalK 1細胞
GM03571細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fetal Rhesus Kidney-4細胞、HCC-1395細胞、SU86.86細胞
TO 175.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAW264.7細胞、HCC70細胞、SCL2細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
M-07e Lymphoblastoid cells人巨核細胞系
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
OV-CA 432細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KLM-1細胞、CV-1 in Origin Simian-1細胞、OP-9細胞
NCIH1993細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3AA細胞、KPL4細胞、HUV-EC-C細胞
SW579細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human ErythroLeukemia細胞、HS766T細胞、Ej138細胞
H-1781細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RD-2細胞、CHG-5細胞、HSC4細胞
TF1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB1-RGB細胞、SHEP1細胞、BetaTC6細胞
AMO-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Th17細胞、SSP-25細胞、VP303細胞
Jurkat FHCRC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC-1395細胞、KMY1022細胞、SNK6細胞
NCIH1666細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK (NBL-2)細胞、SUDHL10細胞、Murine Lung Epithelial-12細胞
CCD-841CoN細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPF細胞、Tsup-1細胞、hTERT-RPE細胞
MC-3T3-E1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NUGC-4細胞、Mo 59J細胞、NCI-SNU-182細胞
M-07e Lymphoblastoid cells人巨核細胞系
MASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-468-RED細胞、K562/ADR細胞、RPMI8226細胞
SW-1990細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2342細胞、NB19-RIKEN細胞、SKNEP細胞
MDAMB468細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT1080細胞、BC-023細胞、IM9細胞
RA-FLSs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0044細胞、ZR75-30細胞、L6細胞
Dysplastic Oral Keratinocyte細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACC2細胞、SK-RC-42細胞、SKMEL1細胞
H-1048細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3-442A細胞、C 6細胞、OC316細胞
H-1048細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3-442A細胞、C 6細胞、OC316細胞
ZR-75-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-522細胞、G-Olig2細胞、DMS-114細胞
SKRC20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C32 mel細胞、SV40-HCEC細胞、CCD-112CoN細胞
H-2591細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTori-3細胞、A549細胞、CCRF CEM細胞
NCIH1869細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2.35細胞、NCI-H345細胞、NCI-H-295細胞
KPL-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1417細胞、SW626細胞、BMDC細胞
HEK 293FT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CBRH7919細胞、HBE細胞、IAR 20細胞
3T3-Swiss細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK Mel 24細胞、LIPF155C細胞、DMS-79細胞
P-388D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV1063細胞、L-Wnt3A細胞、Neuro 2a細胞
SVGp12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2066細胞、SW-1573細胞、TE354T細胞
SF-126細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HGSMC細胞、OCIAML2細胞、Lu-99A細胞
H-1581細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H841細胞、HLE細胞、YH細胞
BrCL18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUTZ3細胞、SKMEL-2細胞、VK-2/E6E7細胞
HeLaS3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KP-N-RT-BM細胞、HCC0202細胞、AC29細胞
NCI-H28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nittby-Salford 1細胞、L929(NCTC)細胞、H774細胞
EFO27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2171細胞、H1417細胞、Balb/c 3T3細胞
L Wnt-3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HANK1細胞、FRO細胞、Ball 1細胞
D-283細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NP69細胞、NCIH2023細胞、Vero-E6細胞
STC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tu-686細胞、P3-NS1/1Ag 4.1細胞、NIH/3T3細胞
H-1048細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3-442A細胞、C 6細胞、OC316細胞
PSN1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVEC4-10細胞、TOV21G細胞、DiFi細胞
MV-522細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 102細胞、451-LU細胞、Caki2細胞
H-7721細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TSU-Pr1細胞、TGBC-11-TKB細胞、HEp-2細胞
NRK52E細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1500細胞、SK-MEL-2細胞、SKNEP1細胞
NCIH2196細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT/Taxo1細胞、CAOV4細胞、RKO_AS45細胞
BJ1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞、T241細胞、NCI-H510A細胞
EoL-1 cell細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs746-T細胞、NGP細胞、143BTK-細胞
KP-N-YN細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-954細胞、Bovine ENDometrial cells細胞、COV504細胞
AG06814-M細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J774 A.1細胞、SNU-761細胞、Walker/LLC-WRC256細胞
HepG2/C3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-102PT細胞、HUCCT1細胞、LS411細胞
CA-46細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B-95-8細胞、Daoy細胞、9L細胞
DMS 153細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs852T細胞、CHO細胞、T/G HA VSMC細胞
H1734細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-250細胞、211H細胞、BE2C細胞
JHH-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRC-9細胞、LP1細胞、IM95細胞
C2C12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OC 316細胞、COLO-HSR細胞、RPE D407細胞
C-28I2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPPVEC細胞、H-1650細胞、NCI-H1993細胞
HSAEC1-KT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-403細胞、Duke University 4475細胞、H-1623細胞
PA317細胞系相關(guān)產(chǎn)品：R 2 C細胞、Panc04.03細胞、H3396細胞
SNU886細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Huh 7.5細胞、SNU-719細胞、Hu-P-T3細胞
SK-MEL5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HemECs細胞、HUT-28細胞、SW 403細胞
Hs895T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 7951細胞、SK-N-AS細胞、MOLP2細胞
Hs-729-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI8226細胞、OCILY-10細胞、MM96L細胞
P-3J細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE14細胞、NCI-H1944細胞、VMCUB-1細胞
HCV-29細胞系相關(guān)產(chǎn)品：E.L.4細胞、NCI-H-295細胞、Hmy.2 CIR細胞
A172細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly 8細胞、SN12C-PM6細胞、RPMI-7951細胞
M-07e Lymphoblastoid cells人巨核細胞系
SK-N-BE-2c細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1915細胞、Human Foreskin Fibroblast細胞、ABC-1細胞
SKMel-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WC00097細胞、Hs-729-T細胞、Duck embryo細胞
SUDHL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GC-1 spg細胞、NCI-H1915細胞、SNU739細胞
SW579細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human ErythroLeukemia細胞、HBEpiC細胞、SR-786細胞
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