"Mac-1 Lymphoblastoid cells人皮膚T淋巴瘤細胞系
細胞背景資料:皮膚T淋巴瘤;女性
細胞形態(tài):淋巴母細胞樣
細胞復(fù)蘇后貼壁細胞較少的問題分析:總結(jié)1:復(fù)蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當(dāng)然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細胞沒問題??偨Y(jié)2:首先應(yīng)該懷疑凍存,實際上復(fù)蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細胞復(fù)蘇時失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復(fù)蘇的時候細胞已進入凋亡程序,不可逆轉(zhuǎn)的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質(zhì)量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴(yán)格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。6、如果你細胞污染,你是否能很快看到,我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話,這個細菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當(dāng)會事。
MPC-83細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL9細胞、MC 116細胞、H1355細胞
CNLMG-B5537SKIN細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCI:SCC90細胞、L 540細胞、SK-N-BE2細胞
H-524細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SRA01/04細胞、FC33細胞、Rat Glomerular Endothelial細胞
細胞生長:懸浮
Mac-1 Lymphoblastoid cells人皮膚T淋巴瘤細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞復(fù)蘇基本方法:1.從液氮罐中取出安剖;有時因安剖未封嚴(yán),浸入了液氮,取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸,因此應(yīng)帶有防護眼睛和手套。2.迅速放入盛有36℃~37℃水的搪瓷罐中,扣上蓋并不時搖動,盡快解凍。3.剪開紗布口袋,取出安剖,用70%酒精擦拭消毒后,凈化臺上打開蓋,用吸管吸出細胞懸液,裝入離心管中,再補加10ml培養(yǎng)液,吹打使細胞懸浮。4.低速離心(500~1000轉(zhuǎn)/分)5分鐘,取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。5.加入培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后,再移裝入培養(yǎng)瓶中,置溫箱培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T25 flask細胞時,處理方式為:在寄送過程中,為避免起泡造成細胞脫落死亡,T25 flask均加滿培養(yǎng)基。請檢查flask外觀,并于顯微鏡下觀察細胞生長狀況和有無污染現(xiàn)象,若有任何問題,不要打開蓋子,請立即通知細胞實驗室。將原封之T25 flask靜置于37°C,5%CO2培養(yǎng)箱中,使細胞回溫至37°C,并讓運送過程中少數(shù)脫落的細胞可再附著生長。隔天后,于無菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用),僅留約5-10ml培養(yǎng)基于flask內(nèi),依一般培養(yǎng)方式再將細胞置入培養(yǎng)箱中,或細胞已長滿盤,則將細胞做傳代培養(yǎng)。
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:451Lu細胞、BNL CL.2細胞、HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細胞
H-1693細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3 LL細胞、Hs 274細胞、IHH4細胞
VMM-5A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CC-LP-I細胞、AtT20細胞、PL-9細胞
3T3L1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CATHa細胞、RKOAS451細胞、HCC-2185細胞
H1155細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HM細胞、C32 [Human melanoma]細胞、NCIH526細胞
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
Mac-1 Lymphoblastoid cells人皮膚T淋巴瘤細胞系
細胞生長特性:懸浮
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié):1)一般客戶拿到細胞后,應(yīng)該注意什么?客戶收到細胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細胞多久能到,是寄凍存的細胞還是復(fù)蘇好的細胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細胞前請確認(rèn)當(dāng)?shù)販囟?,如果氣溫低于4度的,則采用郵寄凍存細胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應(yīng),造成細胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
HECV細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD 19Lu細胞、NCTC 3960細胞、PANC-28細胞
RPTEC/TERT 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RFL6細胞、NCIH1568細胞、Psi2 DAP細胞
Hs888T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C4 I細胞、LPC-H12細胞、GOS3細胞
Leukemic 1210細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2108細胞、H-1693細胞、Co320細胞
NCI747細胞系相關(guān)產(chǎn)品:N87細胞、KYSE0520細胞、NCI-H735細胞
OVCA-433細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS細胞、NCC-IT細胞、Bowes melanoma cells細胞
AU-Mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RKO-AS45-1細胞、B 95-8細胞、NCI-157細胞
SU-DHL-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RH8994細胞、NPC-TW 01細胞、H184A1細胞
TE11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lung cancer-1/squamous細胞、OUMS-27細胞、U2OS細胞
NCIH2405細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-865細胞、SHG 44細胞、143TK-細胞
Mac-1 Lymphoblastoid cells人皮膚T淋巴瘤細胞系
PTK 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 699細胞、NS1-Ag4/1細胞、hCMEC/D3細胞
K1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:McCoy B細胞、PLA-802細胞、PNEC30細胞
Madison lung細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI-279細胞、CFPAC-1細胞、K 562細胞
GM2219C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AK細胞、HEK 293-EBNA細胞、Loucy細胞
CL-40細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HNE-3細胞、HIBEC細胞、NG108-15細胞
Co 205細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs1.Tes細胞、KNS81細胞、KYSE 270細胞
HCC1599細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARO 81-1細胞、ChaGo-K-1細胞、HCC95細胞
RAT2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat 2細胞、Walker256細胞、P31 FUJ細胞
MARC-145細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-26細胞、HUVEC細胞、HOMEC細胞
HCC 38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC1469細胞、Ku812細胞、NCI-H2171細胞
211H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Gejiu Lung Carcinoma-82細胞、TO175T細胞、HSC 3細胞
U251n細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IM-9細胞、NCIH748細胞、H-1672細胞
NCIH2029細胞系相關(guān)產(chǎn)品:16-HBE細胞、CFPAC1細胞、Transformed Human Liver Epithelial-3細胞
YD-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H64細胞、293-FT細胞、MS 751細胞
MDA-231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS(TE85)細胞、MNNG/HOS Clone F-5細胞、OC 316細胞
C4-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-024細胞、NCI-H1693細胞、MDAMB453細胞
149PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLT-4細胞、NCIH2405細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-435細胞
Anip-973細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D 407細胞、HR-8348細胞、RKOE6細胞
TE-3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 741細胞、GM06141B細胞、SuperTube細胞
OCI-Ly7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK 49F細胞、HFT 8810細胞、PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細胞
Hs 832(C).T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2085細胞、NW38細胞、HCC-202細胞
U138細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EJ-1細胞、SW-1353細胞、EC-9706細胞
U-87MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D341Med細胞、B16/BL6細胞、TT細胞
HEK.EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2196細胞、WM115F細胞、NCIH226細胞
Tu212細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FOX-NY細胞、RT4P細胞、H-1436細胞
KYSE 50細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa S3細胞、HM1900細胞、Huh7.5.1細胞
SKMES1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MG63細胞、NU-GC-4細胞、SW-982細胞
HS766T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CTLL(2)細胞、HMO6細胞、PZ-HPV-7細胞
COLO679細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EPC細胞、Hs-940細胞、SCH細胞
HS-940-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs940-T細胞、WILL-2細胞、HSF2細胞
SV40 MES 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DITNC1細胞、OCI-Ly 10細胞、HCC-95細胞
D283MED細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lu99A細胞、HEK293S細胞、DoTc2細胞
SKml2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3/X63-Ag8細胞、C-32細胞、MOLM16細胞
PC-3M-IE8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-231-GFP細胞、M059J細胞、CCK-81細胞
HS-294細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KPL-4細胞、RIN-m5F細胞、Huh 7.5細胞
PANC0327細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3 L1細胞、EU-2細胞、Granta-519細胞
Capan 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO-K1細胞、NCI-H128細胞、ACC-3細胞
HDQ-P1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT.116細胞、A-673細胞、HIEC細胞
U-343-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OUMS-27細胞、CMT 93細胞、H1568細胞
H125細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLM16細胞、LLC-WRC 256細胞、RPPVEC細胞
UACC 893細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M2-10B4細胞、RT-BM-1細胞、293S細胞
H-735細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P30/Ohkubo細胞、LS 1034細胞、IPAM-WT細胞
GCT0404細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS766T細胞、Roswell Park Memorial Institute 1788細胞、SL1細胞
BEL 7405細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H128細胞、D-341細胞、IOSE80UBC細胞
SUDHL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LP-1細胞、SK-N-BE-2細胞、8226細胞
rUCMSCs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK.EBNA細胞、SB細胞、ME16C細胞
16HBE140細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-475細胞、LCLC-103H細胞、BTI-TN5B1-4細胞
SF 539細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU739細胞、HTR-8/SV-neo細胞、NH6細胞
mRMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A375mel細胞、SCL-II細胞、SK-GT-2細胞
HEL92.1.7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLMEC細胞、MDA157細胞、GM05372細胞
WBF344細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1428細胞、TF-1細胞、WRL 68細胞
Mac-1 Lymphoblastoid cells人皮膚T淋巴瘤細胞系
JHH2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS 153細胞、KCL22細胞、675T細胞
LIXC-002細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B4G12細胞、SKG3A細胞、BC3H-1細胞
MV-4:11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-159-PT細胞、H-2171細胞、RL-95-2細胞
Hs888Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 829細胞、NCTC clone 929細胞、SUM-159-PT細胞
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