"MOLM-16 Lymphoblastoid cells人急性髓系白血病細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:急性髓系白血病;女性
細(xì)胞形態(tài):淋巴母細(xì)胞樣
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項(xiàng):1.取細(xì)胞的過程中注意帶好防凍手套,護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要,細(xì)胞凍存管可能漏入液氮,解凍時凍存管中的氣溫急劇上升,可導(dǎo)致爆炸。2.凍存液的問題:凍存液的配置已是常識,在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對細(xì)胞不是完全無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對細(xì)胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢,會造成細(xì)胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對細(xì)胞的損傷。4.離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng),第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個,去除DMSO,去除死細(xì)胞,這個是標(biāo)準(zhǔn)流程,但對一般人來說,把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間,轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少,細(xì)胞就全被扔掉了,轉(zhuǎn)過了活細(xì)胞會受壓過大,死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對細(xì)胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇,結(jié)果無異常。5.細(xì)胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細(xì)胞解凍時1ml細(xì)胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。6.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問題:試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇1管細(xì)胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細(xì)胞濃度過低,不利于細(xì)胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問題:這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會比較大,就會影響細(xì)胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時候?qū)σ话慵?xì)胞沒有什么影響,還有一個說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
HS-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293-F細(xì)胞、HEK293細(xì)胞、TN5B14細(xì)胞
CORL26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM-239A細(xì)胞、KMS11細(xì)胞、MDAPC2B細(xì)胞
VM Cub 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:INS1E細(xì)胞、HLEpiC細(xì)胞、22Rv1細(xì)胞
細(xì)胞生長:懸浮
MOLM-16 Lymphoblastoid cells人急性髓系白血病細(xì)胞系
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–20~-70℃,若存放于4℃,請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶,可將40~45ml分裝于無菌50ml離心管中,由于血清結(jié)凍時體積會增加約10%,必須預(yù)留此膨脹體積之空間,否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌,不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾,勿直接過濾血清。瓶裝(500ml)血清解凍步驟(逐步解凍法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室溫下全溶后再分裝,一般以50ml無菌離心管可分裝40~45ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞,而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物:發(fā)生之原因有許多種,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成,這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物,可用離心3000rpm,5min去除,或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物,因?yàn)闀枞^濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點(diǎn)”:通常經(jīng)過熱處理之血清,沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點(diǎn)”,常會誤認(rèn)為血清遭受污染,而將血清放在37℃中欲培養(yǎng)此“微生物”,但在37℃環(huán)境下,又會使此沈淀物增多,更會誤認(rèn)為微生物之增殖,但以培養(yǎng)細(xì)菌之培養(yǎng)基檢測,又沒有污染。一般而言,此小黑點(diǎn)應(yīng)不會影響細(xì)胞之生長,但若懷疑此血清之品質(zhì),應(yīng)立即停用,更換另一批號的血清。
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
H1954細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Eca109細(xì)胞、HEK-293-FT細(xì)胞、EAC細(xì)胞
NUGC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP C4-2細(xì)胞、HBE 135-E6/E7細(xì)胞、H1703細(xì)胞
HAVSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC95細(xì)胞、P3/NS1/1-Ag4-1細(xì)胞、Colon-38細(xì)胞
NuTu-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUP-B15細(xì)胞、WI 38細(xì)胞、Tb 1-Lu細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GLRK 13細(xì)胞、EJ1細(xì)胞、HTR-8/SVneo細(xì)胞
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
MOLM-16 Lymphoblastoid cells人急性髓系白血病細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性:懸浮
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難,最關(guān)鍵幾點(diǎn):1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的,真的很難相信你會把細(xì)胞養(yǎng)壞;2)動作要快,胰酶消化,換液什么,細(xì)胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外,要掌握好胰酶消化時間,所謂的細(xì)胞狀態(tài)差,很多時候是傳代的原因;3)有時間的話,需要細(xì)胞計數(shù),傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細(xì)胞的生長曲線,不會臨時要處理,手足無措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時間,傳代細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)穿插進(jìn)行,可以節(jié)省很多時間,也不會耽誤別人的實(shí)驗(yàn);5)個人的實(shí)驗(yàn)器具自己收一套,不要和別人混用,最近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人,避免相互干擾。每天對待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細(xì)胞時有哪些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)可以分享呢?1)嚴(yán)格無菌操作,多噴噴酒精,要是對滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準(zhǔn)備一套;3)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時候做好支原體衣原體檢測;4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟,勤換(滅菌水加進(jìn)去);5)晚上離開的時候給傳代細(xì)胞照紫外,超凈臺是用完就開;6)是同一時間就你一個人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
WM115-mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-Wnt3A細(xì)胞、SK-MES1細(xì)胞、Pt K1細(xì)胞
Calf Pulmonary Artery 47細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKRC-20細(xì)胞、MKN-74細(xì)胞、Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細(xì)胞
HOS (TE85)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H4-IIE-C3細(xì)胞、HT-1080細(xì)胞、PANC-08-13細(xì)胞
HKBML細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL-1細(xì)胞、8226細(xì)胞、SW 962細(xì)胞
A3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF-763細(xì)胞、X63-Ag8-653細(xì)胞、NPA87細(xì)胞
GM 2132細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM04154B細(xì)胞、GI-1細(xì)胞、EFM-192A細(xì)胞
CCRF-CEM/S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc05.04細(xì)胞、PANC0403細(xì)胞、MLOY4細(xì)胞
OPM-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK-92MI細(xì)胞、OVCAR-420細(xì)胞、MSC細(xì)胞
ATC241細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 1080.T細(xì)胞、CA922細(xì)胞、MDBK細(xì)胞
MDA-MB-468細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:V79-4細(xì)胞、H82細(xì)胞、Ra No. 1細(xì)胞
MOLM-16 Lymphoblastoid cells人急性髓系白血病細(xì)胞系
H211細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA-SO-M21細(xì)胞、HCa/16A3-F細(xì)胞、HGE細(xì)胞
COLO 206細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1650細(xì)胞、MC-3T3-E1細(xì)胞、HEC-1-A細(xì)胞
OVCAR 432細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ME16C細(xì)胞、Sarcoma OSteogenic-2細(xì)胞、HEI193細(xì)胞
NRK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DC2.4細(xì)胞、Sp2/O-Ag14細(xì)胞、NCTC-3960細(xì)胞
SW48細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2452細(xì)胞、LAN5細(xì)胞、RS4:11細(xì)胞
F442-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLT-16細(xì)胞、DH 82細(xì)胞、UCLA-SO-M14細(xì)胞
F442-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLT-16細(xì)胞、DH 82細(xì)胞、UCLA-SO-M14細(xì)胞
GA10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-322細(xì)胞、HCT116/L細(xì)胞、TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞
PNT1-a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL4細(xì)胞、GC-1細(xì)胞、MSTO-211細(xì)胞
MSTO-211細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC2細(xì)胞、TFK1細(xì)胞、SK.MEL.2細(xì)胞
YES 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU520細(xì)胞、Factor Dependent Continuous-Paterson 1細(xì)胞、SUM-159細(xì)胞
MDA MB 134VI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE410細(xì)胞、DHL-4細(xì)胞、PK-136細(xì)胞
HuCC-T1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOP 62細(xì)胞、P3HR1-BL細(xì)胞、H-209細(xì)胞
3T3-J2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Potorous tridactylus Kidney 1細(xì)胞、C-127細(xì)胞、VK2細(xì)胞
TE 85 ClF-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IGROV細(xì)胞、Neuro 2a細(xì)胞、NCI-SNU-886細(xì)胞
NSI/1-Ag4-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2066細(xì)胞、Nthy-ori 3.1細(xì)胞、alpha TC1 clone 6細(xì)胞
CAOV4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:G-292, clone A141B1細(xì)胞、Hs 766細(xì)胞、Panc08.13細(xì)胞
H295R-S1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AU565細(xì)胞、AN3-CA細(xì)胞、HEK-2細(xì)胞
J 111細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2030細(xì)胞、MRMT-1細(xì)胞、L929細(xì)胞
GC-1 spg細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H3255細(xì)胞、CHL-CL-11細(xì)胞、NMC-G1細(xì)胞
WM-115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1944細(xì)胞、MHHCALL2細(xì)胞、SK-BR-3細(xì)胞
NTC-200細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-05.04細(xì)胞、MDAMB-231細(xì)胞、K7M2 wt細(xì)胞
Hs688(A)T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM266-4細(xì)胞、mousepodocyte細(xì)胞、HTR8/SVneo細(xì)胞
SCL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNCL-2細(xì)胞、LNCaP subline C4-2細(xì)胞、PIG3細(xì)胞
SP-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FBHE細(xì)胞、U-226AR1細(xì)胞、BNL 1ME A.7R.1細(xì)胞
MDA 231-LM2-4175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細(xì)胞、Ca761細(xì)胞、H719細(xì)胞
MDA435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NUGC-3細(xì)胞、MFE280細(xì)胞、JEG3細(xì)胞
MAVER-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AML-193細(xì)胞、NCI-H2170細(xì)胞、SNU-520細(xì)胞
MPC 11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KLE細(xì)胞、H1105細(xì)胞、SEG-1細(xì)胞
H-510A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUT28細(xì)胞、Line 207細(xì)胞、McCoy細(xì)胞
WB F344細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-HSC細(xì)胞、LS-174T細(xì)胞、RPMI8226/S細(xì)胞
NCIH1650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MUTZ1細(xì)胞、Anip973細(xì)胞、32Dc3細(xì)胞
NOMO-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:786-O細(xì)胞、CII細(xì)胞、HEK293T/17細(xì)胞
NCI-H2347細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KATO III細(xì)胞、32D/cl3細(xì)胞、KAT-5細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCKII細(xì)胞、NCI-HUT-596細(xì)胞、SK-ES細(xì)胞
HO-8910PM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T6細(xì)胞、TYKnu細(xì)胞、T98G細(xì)胞
MC-116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SBC3細(xì)胞、NPA87-1細(xì)胞、H-510細(xì)胞
VeroE6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HANK細(xì)胞、SF 767細(xì)胞、A-20細(xì)胞
MDA-MB-134-VI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB436細(xì)胞、TGW-nu細(xì)胞、RAOEC細(xì)胞
H-EMC-SS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BSC-40細(xì)胞、HS 683T細(xì)胞、U-373 MG細(xì)胞
HuP-T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-CO-1細(xì)胞、SMMC-7721細(xì)胞、HCT-116細(xì)胞
CLONE M3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63-Ag 8.653細(xì)胞、A3細(xì)胞、HPAF-II細(xì)胞
LAC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SGC 7901細(xì)胞、CFSC-8B細(xì)胞、Panc 5.04細(xì)胞
EB-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUP-M2細(xì)胞、CTLA4 Ig-24細(xì)胞、SUD6細(xì)胞
R3/1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JS1細(xì)胞、NK-10A細(xì)胞、HSC2細(xì)胞
OS-732細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:6T-CEM細(xì)胞、H-EMC-SS細(xì)胞、M-1細(xì)胞
NCIH2023細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP 100細(xì)胞、COLO 206細(xì)胞、Glioma-261細(xì)胞
G361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EBNA-293細(xì)胞、H-1755細(xì)胞、Ly10細(xì)胞
CAL39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-UT-1細(xì)胞、RBE細(xì)胞、BT-20細(xì)胞
COLO 699細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE671/RD細(xì)胞、UCD-MLA-144細(xì)胞、ZR-75-30細(xì)胞
ChaGo-K-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Michigan Cancer Foundation-7細(xì)胞、LS123細(xì)胞、CAKI1細(xì)胞
MOLM-16 Lymphoblastoid cells人急性髓系白血病細(xì)胞系
KU-812-F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SEM細(xì)胞、Mevo細(xì)胞、OCIAML2細(xì)胞
EFO27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2171細(xì)胞、SNU601細(xì)胞、Human Liver-7702細(xì)胞
EU-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC0203細(xì)胞、H-358細(xì)胞、MM96L細(xì)胞
Hopkins-92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKBr3細(xì)胞、PC.3細(xì)胞、LTPA細(xì)胞
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