"SHI-1 Lymphoblastoid cells人單核細(xì)胞白血病細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:急性單核細(xì)胞白血??;男性
細(xì)胞形態(tài):淋巴母細(xì)胞樣
細(xì)胞傳代培養(yǎng)實(shí)驗(yàn):體外培養(yǎng)的原代細(xì)胞或細(xì)胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細(xì)胞株或得到大量的同種細(xì)胞,并維持細(xì)胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細(xì)胞形成單層匯合以后,由于密度過(guò)大生存空間不足而引起營(yíng)養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細(xì)胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進(jìn)行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細(xì)胞“一代”指從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細(xì)胞世代或倍增不同。在一代中,細(xì)胞培增3~6次。細(xì)胞傳代后,一般經(jīng)過(guò)三個(gè)階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細(xì)胞分裂指數(shù)表示細(xì)胞增殖的旺盛程度,即細(xì)胞群的分裂相數(shù)/100個(gè)細(xì)胞。一般細(xì)胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細(xì)胞可達(dá)3~5%;細(xì)胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時(shí)期,稱指數(shù)增生期(對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期),適宜進(jìn)行各種試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)步驟:1.將長(zhǎng)成的培養(yǎng)細(xì)胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺(tái)中倒掉瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細(xì)胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細(xì)胞,如果細(xì)胞變圓,相互之間不再連接成片,這時(shí)應(yīng)立即在超凈臺(tái)中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細(xì)胞懸液。3.將細(xì)胞懸液吸出2ml左右,加到另一個(gè)培養(yǎng)瓶中并向每個(gè)瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細(xì)胞在2小時(shí)左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶?jī)?nèi)形成單層,需要再次進(jìn)行傳代。
MFHL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Normal fibroblast-10細(xì)胞、KLN205細(xì)胞、H-2198細(xì)胞
DHL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KASUMI6細(xì)胞、C22細(xì)胞、LM(TK-)細(xì)胞
KP-N-YN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-954細(xì)胞、Bovine ENDometrial cells細(xì)胞、COV504細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng):懸浮
SHI-1 Lymphoblastoid cells人單核細(xì)胞白血病細(xì)胞系
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí),發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好,很容易扎堆生長(zhǎng),用胰酶消化的時(shí)候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來(lái),很難把它們吹散成一個(gè)一個(gè)細(xì)胞。而且長(zhǎng)得也挺快也挺不均勻的,傳代的第二天,有些地方就長(zhǎng)得滿滿的了。想請(qǐng)教一下這是為什么呢?你好,我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣,消化下來(lái)也是一團(tuán)的,但吹打以后就沒(méi)有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻,分皿后在鏡下看一看,移動(dòng)培養(yǎng)皿的時(shí)候盡量動(dòng)作輕,避免晃動(dòng)。細(xì)胞生長(zhǎng)挺快,那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問(wèn)題我覺(jué)得有以下幾種可能:一、細(xì)胞消化后吹打不均勻,造成細(xì)胞成團(tuán)生長(zhǎng):二、細(xì)胞細(xì)化太過(guò),細(xì)胞成片脫落,吹打時(shí)沒(méi)有受力點(diǎn),細(xì)胞聚團(tuán)生長(zhǎng)。解決辦法:根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的情況進(jìn)行多次消化,將同次消化下來(lái)的細(xì)胞放在一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng):一般步驟為:真空泵吸走培養(yǎng)基,1XPBS漂洗兩次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿為例),37度放置數(shù)分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落,加入適量血清,以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊,離心后加入新鮮培養(yǎng)基,按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時(shí)間,若胰酶處理太久,容易造成細(xì)胞貼壁不緊,顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng),嚴(yán)重的時(shí)候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€(gè)人經(jīng)驗(yàn):HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細(xì)胞處理時(shí)間可適當(dāng)放長(zhǎng),一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細(xì)胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
NCI-H69C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK.MEL.28細(xì)胞、KNS42細(xì)胞、HEK;293細(xì)胞
Roswell Park Memorial Institute 6666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-019細(xì)胞、UM2細(xì)胞、LU-65M細(xì)胞
LLC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-RC 52細(xì)胞、Eca 109細(xì)胞、OCI-AML-2細(xì)胞
RWPE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2073細(xì)胞、EFM192A細(xì)胞、TE3細(xì)胞
Hs 695.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC6細(xì)胞、IBRS-2細(xì)胞、CHL-11細(xì)胞
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
SHI-1 Lymphoblastoid cells人單核細(xì)胞白血病細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:懸浮
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)
細(xì)胞凍存的步驟:1)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無(wú)菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細(xì)胞類型來(lái)選擇;3)將分裝上述細(xì)胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細(xì)胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過(guò)夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過(guò)夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存,但為妥善起見(jiàn),凍存半年后,取出一只凍存管細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長(zhǎng)情況,然后再繼續(xù)凍存。
NCI-1155細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM05372細(xì)胞、MCF7-GFP細(xì)胞、102PT細(xì)胞
H508細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ADR-RES細(xì)胞、U 138 MG細(xì)胞、H-1819細(xì)胞
2T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293A細(xì)胞、rUCMSCs細(xì)胞、NCM460細(xì)胞
Hs821T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ATC241細(xì)胞、HCC2279細(xì)胞、MZ-CRC-1細(xì)胞
WERI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV3121細(xì)胞、AHH1細(xì)胞、HAC-84細(xì)胞
MC-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OE-21細(xì)胞、SUDHL8細(xì)胞、HeLa S3細(xì)胞
7860細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAF II細(xì)胞、IMR90細(xì)胞、RS411細(xì)胞
UCLA RO-81A-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細(xì)胞、Hep3B細(xì)胞、M14-MEL細(xì)胞
DSL6A/C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC-4細(xì)胞、SW 900細(xì)胞、LK-2細(xì)胞
SC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1105細(xì)胞、3AO細(xì)胞、RH30SJ細(xì)胞
SHI-1 Lymphoblastoid cells人單核細(xì)胞白血病細(xì)胞系
HCC-1937細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBMEC細(xì)胞、OE21細(xì)胞、MDAMB330細(xì)胞
UACC-893細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HGC27細(xì)胞、NCIH810細(xì)胞、NB19細(xì)胞
HEC251細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL1-0細(xì)胞、IHH4細(xì)胞、MDA453細(xì)胞
EVSA/T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI/AML-5細(xì)胞、NCI-H196細(xì)胞、A9細(xì)胞
Capan 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAOV3細(xì)胞、BHP 10-3細(xì)胞、NCI-SNU-5細(xì)胞
GM04154B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CG-4細(xì)胞、HCV-29細(xì)胞、SNU-354細(xì)胞
GM04154B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CG-4細(xì)胞、HCV-29細(xì)胞、SNU-354細(xì)胞
SK-HEP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKM-1細(xì)胞、MC3T3-E1細(xì)胞、rRMECs細(xì)胞
HuPT3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LU165細(xì)胞、624-mel細(xì)胞、COLO-738細(xì)胞
RERFLCMS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DI TNC-1細(xì)胞、Murine Leydig Tumor Cell line-1細(xì)胞、CV-1 in Origin Simian-1細(xì)胞
C42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LUDLU-1細(xì)胞、1E8-H細(xì)胞、PLA 802細(xì)胞
Rat Fetal Lung-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JB6 [Mouse]細(xì)胞、HUV-EC-C細(xì)胞、SK-MEL-2細(xì)胞
H716細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colo16細(xì)胞、BRL 3A細(xì)胞、NCI-H1666細(xì)胞
NL20SV細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MA-c細(xì)胞、NCI-SNU-398細(xì)胞、Jiyoye細(xì)胞
DMS 153細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs852T細(xì)胞、CHO細(xì)胞、T/G HA VSMC細(xì)胞
GM02132C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HR-8348細(xì)胞、GLC82細(xì)胞、MC57G細(xì)胞
HC11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM6細(xì)胞、HEC-251細(xì)胞、NUGC4細(xì)胞
786O細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly 1細(xì)胞、NCI/ADR-RES細(xì)胞、NCI-H441-4細(xì)胞
bEND.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ATDC5細(xì)胞、KP-N-NS細(xì)胞、HES [Human embryonic skin fibroblast]細(xì)胞
RT4-D6-P2T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAKI.1細(xì)胞、H-2196細(xì)胞、AR-42J細(xì)胞
Lung cancer-1/squamous細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UM-UC-3細(xì)胞、QBC-939細(xì)胞、H220細(xì)胞
343 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUD6細(xì)胞、alpha-TC1.6細(xì)胞、H-747細(xì)胞
NOMO1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Keio University-19-19細(xì)胞、Evsa T細(xì)胞、Kit 225 K6細(xì)胞
Clone Y1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR-L23/P細(xì)胞、RPE1-hTERT細(xì)胞、H1876細(xì)胞
OCILY7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-520細(xì)胞、PT-67細(xì)胞、Hs839T細(xì)胞
NCI-SNU-886細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SJSA-1細(xì)胞、MGC-803細(xì)胞、R 2 C細(xì)胞
SU-DHL-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CII細(xì)胞、HMrSV5細(xì)胞、MCA38細(xì)胞
NCI-SNU-886細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SJSA-1細(xì)胞、MGC-803細(xì)胞、R 2 C細(xì)胞
JVM-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE180細(xì)胞、HEL92.1.7細(xì)胞、Tca8113細(xì)胞
RCC-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A549細(xì)胞、KPL1細(xì)胞、COLO 320 HSR細(xì)胞
SUNE 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Buffalo Rat Liver-3A細(xì)胞、SUDHL6細(xì)胞、GLAG-66細(xì)胞
Madison lung細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI-279細(xì)胞、CFPAC-1細(xì)胞、K 562細(xì)胞
OVSAHO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM-266-mel細(xì)胞、Hs683T細(xì)胞、UWB1.289+BRCA1細(xì)胞
H-460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GLC-82細(xì)胞、RT-4細(xì)胞、B16F0細(xì)胞
QBI-HEK 293A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EU-2細(xì)胞、MN9D細(xì)胞、CHAGOK1細(xì)胞
NCI-H1975細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS-174細(xì)胞、H-889細(xì)胞、Jurkat-E6細(xì)胞
NWA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H2106細(xì)胞、OCI AML3細(xì)胞、Natural Killer-92細(xì)胞
OVCA 420細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE 80細(xì)胞、RT-112細(xì)胞、NK92MI細(xì)胞
CD18/HPAF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB-9細(xì)胞、RL95-2細(xì)胞、Chinese Hamster Lung細(xì)胞
HCC0078細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT144細(xì)胞、OVCAR-4細(xì)胞、HRCEC細(xì)胞
Hs695T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat Basophilic Leukemia-1細(xì)胞、COLO320/DM細(xì)胞、SUPM2細(xì)胞
S3 HeLa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB 231細(xì)胞、MPVECs細(xì)胞、Melan-a細(xì)胞
NCI-SNU-886細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SJSA-1細(xì)胞、MGC-803細(xì)胞、R 2 C細(xì)胞
WiDr-TC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Los Angeles Prostate Cancer-4細(xì)胞、SUM-190PT細(xì)胞、WIL2 Secreting細(xì)胞
EA hy 926細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM00637B細(xì)胞、SUDHL-6細(xì)胞、HS-68細(xì)胞
SUPM2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM05887A細(xì)胞、JAR細(xì)胞、Tu177細(xì)胞
Ketr3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRA19細(xì)胞、VE細(xì)胞、RPMI7666細(xì)胞
DHL4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IALM細(xì)胞、CALU 1細(xì)胞、GDM1細(xì)胞
HepG2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-148細(xì)胞、Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細(xì)胞、JKT1細(xì)胞
TOV-21G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H22-H8D8細(xì)胞、H865細(xì)胞、SNU-251細(xì)胞
Hs729細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 08.13細(xì)胞、HONE1細(xì)胞、MC3T3-E細(xì)胞
SHI-1 Lymphoblastoid cells人單核細(xì)胞白血病細(xì)胞系
BC-025細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos G6.C10細(xì)胞、Human Microglia Clone 3細(xì)胞、NCI-H748細(xì)胞
EFM192A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63-Ag8-653細(xì)胞、NCIH510細(xì)胞、NCIH460細(xì)胞
AML-193細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU878細(xì)胞、Hs 636 T細(xì)胞、YH-13細(xì)胞
2T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293A細(xì)胞、BT325細(xì)胞、OVCA-432細(xì)胞
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