"RPMI-1788 Lymphoblastoid cells人外周血B淋巴細胞系
細胞背景資料：B淋巴細胞；EBV轉化
細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣
細胞復蘇相關注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉速和時間，轉的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇，結果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結為復蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
P3/NS-1細胞系相關產(chǎn)品：3LL細胞、SUM-102PT細胞、IPLB-Sf21細胞
Mouse INsulinoma 6細胞系相關產(chǎn)品：U251MG細胞、H1436細胞、WI38細胞
KOSC2細胞系相關產(chǎn)品：TALL-104細胞、SU-DHL2細胞、HGF-1細胞
細胞生長：懸浮
RPMI-1788 Lymphoblastoid cells人外周血B淋巴細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細胞時，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細胞和你一樣，消化下來也是一團的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細胞生長挺快，那么細胞的增殖能力應該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能：一、細胞消化后吹打不均勻，造成細胞成團生長：二、細胞細化太過，細胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細胞聚團生長。解決辦法：根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化，將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談談個人經(jīng)驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細胞處理時間可適當放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
VK2 (E6/E7)細胞系相關產(chǎn)品：COLO-320細胞、GM0637細胞、CNE1-LUC細胞
TE7細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1417細胞、CPA 47細胞、UM-UC-14細胞
KYSE-140細胞系相關產(chǎn)品：MDA-MB-453細胞、PCI-SG231細胞、BV-2細胞
SK-LU-1細胞系相關產(chǎn)品：OCI-Ly 3細胞、LN 382細胞、211H細胞
RGC-6細胞系相關產(chǎn)品：RPMI7666細胞、RKO-AS45-1細胞、RCC10 RGB細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
RPMI-1788 Lymphoblastoid cells人外周血B淋巴細胞系
細胞生長特性：懸浮
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
培養(yǎng)細胞真的不難，最關鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
THLE-3細胞系相關產(chǎn)品：Human podocyte細胞、SKMES細胞、95D細胞
b.End3細胞系相關產(chǎn)品：Calu 6細胞、C1498細胞、8305-C細胞
A375-S2細胞系相關產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 7666細胞、SU-DHL-16細胞、C8166細胞
K299細胞系相關產(chǎn)品：CL34細胞、H-2347細胞、NK-92細胞
MA-104細胞系相關產(chǎn)品：Rin-M-5F細胞、RT4-D6P2T細胞、UMR106細胞
COLO-824細胞系相關產(chǎn)品：Med 341細胞、Rat Skin 1細胞、M1細胞
SUM 52PE細胞系相關產(chǎn)品：OKa-C-1細胞、HT 1376細胞、NCI-H2198細胞
rUCMSCs細胞系相關產(chǎn)品：HEK.EBNA細胞、SB細胞、ME16C細胞
OVCA433細胞系相關產(chǎn)品：EC-9706細胞、JCA-1細胞、NCI-H2029細胞
H1436細胞系相關產(chǎn)品：Hep 2細胞、NRK clone 49F細胞、D6P2T細胞
RPMI-1788 Lymphoblastoid cells人外周血B淋巴細胞系
AX-Mel細胞系相關產(chǎn)品：TCMK-1細胞、OCUM-1細胞、AE 1201細胞
Rat-2細胞系相關產(chǎn)品：KMS18細胞、Kit225-K6細胞、526細胞
M-G63細胞系相關產(chǎn)品：SKMel-5細胞、SUIT-2細胞、HLE-B3細胞
H-1395細胞系相關產(chǎn)品：A549-Taxol細胞、NCI-322細胞、UO-31細胞
HRPEpiC細胞系相關產(chǎn)品：HDQ-P1細胞、RSC-364細胞、QBI-HEK 293A細胞
JB6Cl30細胞系相關產(chǎn)品：MLO-Y4細胞、H661細胞、DHL4細胞
JB6Cl30細胞系相關產(chǎn)品：MLO-Y4細胞、H661細胞、DHL4細胞
HPAF-I細胞系相關產(chǎn)品：KM.12細胞、HC11 Mammary Epithelium細胞、Hs 832(C).T細胞
HOS-TE85細胞系相關產(chǎn)品：SkMel31細胞、MS1細胞、OCI/AML-4細胞
HEK AD293細胞系相關產(chǎn)品：P3-X63.Ag8.653細胞、C918細胞、SF-767細胞
BEAS 2B細胞系相關產(chǎn)品：NTERA-2細胞、MM1.S細胞、NCI-HUT-125細胞
HEYA8細胞系相關產(chǎn)品：Hs675T細胞、SJRH30細胞、FET細胞
MDA-MB-231細胞系相關產(chǎn)品：KYSE70細胞、MLA-144細胞、CTX TNA2細胞
Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細胞系相關產(chǎn)品：FU-97細胞、OCM-1細胞、WM-451Lu細胞
Hs 611.T細胞系相關產(chǎn)品：PE/CA-PJ34 (clone C12)細胞、P3/X63-Ag8細胞、HPAF/CD18細胞
Hs-600-T細胞系相關產(chǎn)品：H-1781細胞、TMK1細胞、FM88細胞
DV-90細胞系相關產(chǎn)品：Eca-109細胞、Wayne State University-Head and Neck 13細胞、Duck embryo細胞
L- cell細胞系相關產(chǎn)品：UMR 106細胞、32D CL3細胞、SK MEL-28細胞
OB2細胞系相關產(chǎn)品：Lieming Xu-2細胞、OCI/AML4細胞、A2780細胞
Hs 695.T細胞系相關產(chǎn)品：HSC6細胞、IBRS-2細胞、CHL-11細胞
CCLP1細胞系相關產(chǎn)品：HS0578T細胞、P3X63-Ag8.653細胞、F442-A細胞
SK Mel28細胞系相關產(chǎn)品：USMC細胞、KU 812F細胞、RWPE-2細胞
HCASMC細胞系相關產(chǎn)品：NR-8383細胞、J-774細胞、MA-104細胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細胞系相關產(chǎn)品：H-676B細胞、Centre Antoine Lacassagne-148細胞、RIN-m 14B細胞
HS-445細胞系相關產(chǎn)品：PC.3細胞、HLE-SRA-01/04細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細胞
OCI-AML-5細胞系相關產(chǎn)品：SNU398細胞、16HBE細胞、SK-N-BE(2C)細胞
LAN-6細胞系相關產(chǎn)品：H82sclc細胞、207細胞、CFPAC細胞
MEG-01細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H165細胞、CAL 33細胞、LOU-NH91細胞
A1847細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H345細胞、NCI-H647細胞、P-2003細胞
SK MEL 5細胞系相關產(chǎn)品：OVCA 420細胞、AKR細胞、Case 3細胞
H1437細胞系相關產(chǎn)品：C918細胞、THP1細胞、HGC27細胞
Hut292細胞系相關產(chǎn)品：H650細胞、GM3569細胞、H-841細胞
MPP89細胞系相關產(chǎn)品：HNEpC細胞、MBdSMC細胞、KS-SLK細胞
OE21細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H508細胞、ECV304細胞、H64細胞
Helacyton gartleri細胞系相關產(chǎn)品：HCGC細胞、VP229細胞、RBL.2H3細胞
BEND細胞系相關產(chǎn)品：SJ-Rh 30細胞、HBMEC細胞、MOLP-2細胞
THP-1細胞系相關產(chǎn)品：OVCAR420細胞、P388-D1細胞、High Five細胞
870細胞系相關產(chǎn)品：H1650細胞、BTI-Tn5B14細胞、EFO 27細胞
NCI-H748細胞系相關產(chǎn)品：ARH 77細胞、Embryonic Bovine Tracheal cells細胞、COR-L26細胞
H-1876細胞系相關產(chǎn)品：DHL-6細胞、SNU-182細胞、AML-193細胞
B16/F1細胞系相關產(chǎn)品：H345細胞、HEK293E細胞、NCIH1648細胞
OCI/AML4細胞系相關產(chǎn)品：SK-N-BE-2c細胞、MPC11細胞、OCI/AML4細胞
CT 26細胞系相關產(chǎn)品：NCI/ADR-RES細胞、CMT 64細胞、GM-346細胞
NUGC-3細胞系相關產(chǎn)品：H-735細胞、MOLT 16細胞、HTR-8/SV neo細胞
GM04680細胞系相關產(chǎn)品：PL11細胞、KYSE270細胞、WSU-HN13細胞
NCIH1869細胞系相關產(chǎn)品：H2.35細胞、NCI-H345細胞、NCI-H-295細胞
GP293細胞系相關產(chǎn)品：KU 812細胞、CL-11細胞、BMSC/hBMSCs細胞
L-428細胞系相關產(chǎn)品：NBLS細胞、SKGIIIA細胞、SNU-638細胞
LC-2/ad細胞系相關產(chǎn)品：TE-85 clone 5細胞、SDBMSC細胞、AG 9細胞
KYSE 30細胞系相關產(chǎn)品：P3HR1細胞、EA.Hy926細胞、PCI-04B細胞
D407 RPE細胞系相關產(chǎn)品：NCI H508細胞、SuDHL 10細胞、GM05384細胞
RPMI-1788 Lymphoblastoid cells人外周血B淋巴細胞系
Clone Y1細胞系相關產(chǎn)品：COR-L23/P細胞、RPE1-hTERT細胞、H1876細胞
AN3CA細胞系相關產(chǎn)品：MB 157細胞、M-G63細胞、CHO-K1細胞
TE-32細胞系相關產(chǎn)品：P3-Jiyoye細胞、Hepatoma 22細胞、IPEC-1細胞
A375-S2細胞系相關產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 7666細胞、38C-13細胞、AMJ2-C8細胞
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