"L-540 Lymphoblastoid cells人霍奇金淋巴瘤細胞系
細胞背景資料：霍奇金淋巴瘤；女性
細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣
細胞復蘇相關注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
HIEC6細胞系相關產(chǎn)品：JeKo-1細胞、Ramos-RA1細胞、LNCaP FGC細胞
MB468細胞系相關產(chǎn)品：Pt-K2細胞、BT325細胞、HEK-293A細胞
HLFa細胞系相關產(chǎn)品：H1563細胞、SNU-398細胞、H2196細胞
細胞生長：懸浮
L-540 Lymphoblastoid cells人霍奇金淋巴瘤細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結(jié)凍時體積會增加約１０%，必須預留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞，而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”：通常經(jīng)過熱處理之血清，沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”，常會誤認為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會使此沈淀物增多，更會誤認為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測，又沒有污染。一般而言，此小黑點應不會影響細胞之生長，但若懷疑此血清之品質(zhì)，應立即停用，更換另一批號的血清。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
X63-Ag8.653細胞系相關產(chǎn)品：LU451細胞、H-196細胞、SHIN3細胞
Kit225 K6細胞系相關產(chǎn)品：2780細胞、PA12細胞、NCI-H508細胞
D341 Med細胞系相關產(chǎn)品：A172細胞、ZR-75-30細胞、Doubling time: ~50 hours (ATCC).細胞
LM1細胞系相關產(chǎn)品：MDA231-LM2-4175細胞、TCC Sup細胞、149PT細胞
LTEPsm細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H596細胞、ONS76細胞、LC-1/sq細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
L-540 Lymphoblastoid cells人霍奇金淋巴瘤細胞系
細胞生長特性：懸浮
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
培養(yǎng)細胞真的不難，最關鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
HCT GEO細胞系相關產(chǎn)品：ISHI細胞、Rainbow Trout Embryo細胞、T_T_細胞
MIA-Pa-Ca-2細胞系相關產(chǎn)品：451-LU細胞、JEG-3細胞、Panc 08.13細胞
IMR-90細胞系相關產(chǎn)品：LC1細胞、WILL2細胞、MIN6細胞
SW 1271細胞系相關產(chǎn)品：J774 A1細胞、T-T細胞、COLO-699細胞
HCE-2 [50.B1]細胞系相關產(chǎn)品：G-401細胞、HRA-19細胞、NCIH378細胞
Walker-Ca.256細胞系相關產(chǎn)品：Tu 177細胞、WSU-DLCL(2)細胞、KNS42細胞
T98 G細胞系相關產(chǎn)品：Colon38細胞、MMQ細胞、32D.cl3細胞
VeroE6細胞系相關產(chǎn)品：HANK細胞、SF 767細胞、A-20細胞
58F細胞系相關產(chǎn)品：BNL CL2細胞、H1395細胞、NCI-H2135細胞
CoCL2細胞系相關產(chǎn)品：HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細胞、143BTK-細胞、J774A.1細胞
L-540 Lymphoblastoid cells人霍奇金淋巴瘤細胞系
L540細胞系相關產(chǎn)品：MES-SA/Dx5細胞、P31 FUJ細胞、RS(4;11)細胞
OVCAR.5細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2052細胞、LCLC103H細胞、NS1-Ag4細胞
NPA'87細胞系相關產(chǎn)品：Lewis-Lung細胞、HBZY1細胞、87 MG細胞
BTI-Tn5B14細胞系相關產(chǎn)品：Hs 281.T細胞、CNE2細胞、LNCaP-ATCC細胞
D324細胞系相關產(chǎn)品：IMR32細胞、NCI-H211細胞、RMC-1細胞
HT 1197.T細胞系相關產(chǎn)品：RBSMC細胞、RMS 13細胞、KNS-42細胞
HT 1197.T細胞系相關產(chǎn)品：RBSMC細胞、RMS 13細胞、KNS-42細胞
GDM-1細胞系相關產(chǎn)品：MCF7-GFP細胞、B16 melanoma F10細胞、UWB1289細胞
HaCaT細胞系相關產(chǎn)品：HO-1-N-1細胞、Be Wo細胞、MGSMC細胞
hFOB 1.19細胞系相關產(chǎn)品：HTR8細胞、MiaPaCa2細胞、THP-1(ATCC)細胞
KYSE180細胞系相關產(chǎn)品：RSC-96細胞、SU4細胞、JROECL21細胞
Duke University 145細胞系相關產(chǎn)品：M619細胞、D-283 Med細胞、Japanese Tissue Culture-39細胞
NCIN87細胞系相關產(chǎn)品：H1876細胞、NCIH841細胞、NCI-H2405細胞
Central Adrenergic TH-expressing a細胞系相關產(chǎn)品：MPC-11細胞、H-128細胞、LAPC4細胞
AZ521細胞系相關產(chǎn)品：3T6 Swiss Albino細胞、X63Ag8-653細胞、Uhth-74細胞
JurkatE6-1細胞系相關產(chǎn)品：Walker-256-TC細胞、NR8383.1細胞、28SC細胞
RL細胞系相關產(chǎn)品：SCC90細胞、NCIH596細胞、C22細胞
LCD細胞系相關產(chǎn)品：NCI-SNU-520細胞、ISHI細胞、GM12878細胞
NCI-H1672細胞系相關產(chǎn)品：BL2141細胞、Turbot Embryonic Cell line細胞、OVCA432_Bast細胞
Kuramochi細胞系相關產(chǎn)品：OCI-AML-4細胞、OP9細胞、SNU-C1細胞
HuO9細胞系相關產(chǎn)品：SW1990細胞、MDA-436細胞、BT.549細胞
H-1930細胞系相關產(chǎn)品：PaCa2細胞、HS-294-T細胞、253J-BV細胞
hTERT-HME-1細胞系相關產(chǎn)品：293-EBNA細胞、HGF-1細胞、KOPN-8細胞
TE14細胞系相關產(chǎn)品：C3H/10T1/2 clone 8細胞、OVCAR10細胞、7404細胞
RL952細胞系相關產(chǎn)品：MV-4:11細胞、IA-LM細胞、Sf-21細胞
U138MG細胞系相關產(chǎn)品：HT3細胞、Y3.AG.1.2.3細胞、MSTO-211 H細胞
Hi-5細胞系相關產(chǎn)品：HCC1438細胞、SNU-C2A細胞、As-PC1細胞
SK BR 03細胞系相關產(chǎn)品：3T3NIH細胞、KTC1細胞、Hs 739.T細胞
UCLA-SO-M20細胞系相關產(chǎn)品：HCC-2935細胞、Henrietta Lacks cells細胞、BC-3H-1細胞
HUSMC細胞系相關產(chǎn)品：H-847細胞、Hep G2細胞、COLO 320F細胞
SK-BR3細胞系相關產(chǎn)品：MKN-74細胞、DMS-114細胞、Tohoku Hospital Pediatrics-1細胞
COR-L279細胞系相關產(chǎn)品：NS1細胞、Caov-4細胞、HCC0015細胞
Super Tube細胞系相關產(chǎn)品：SCCVII/St細胞、COR-L23/P細胞、TE5細胞
OKa-C-1細胞系相關產(chǎn)品：RPMI-1788細胞、C33細胞、N-87細胞
EM3細胞系相關產(chǎn)品：WISH細胞、BRL3A細胞、Mino細胞
AG 9細胞系相關產(chǎn)品：Ramos-RA1細胞、IAR20細胞、NCIH345細胞
Human Embryonic Skin細胞系相關產(chǎn)品：BeWo細胞、UMUC3細胞、SUDHL1細胞
NCIH2009細胞系相關產(chǎn)品：FD-LSC-1細胞、CCD1095Sk細胞、CT26.WT細胞
MES-SA/Dx5細胞系相關產(chǎn)品：Glioma-261細胞、B16-F1細胞、HANK1細胞
NCI660細胞系相關產(chǎn)品：87 MG細胞、NCI-H23細胞、MV 4;11細胞
FL62891細胞系相關產(chǎn)品：PCI-SG231細胞、SNU-601細胞、SNU-668細胞
ONS-76細胞系相關產(chǎn)品：3D4/21細胞、SC細胞、KRC Y細胞
SN12CPM6細胞系相關產(chǎn)品：SV40-HCEC細胞、COLO 320HSR細胞、Hs-274-T細胞
WM2664細胞系相關產(chǎn)品：A-172 MG細胞、P3J HR1-K細胞、KYSE 50細胞
NCI-H1882細胞系相關產(chǎn)品：HOPC細胞、SEM細胞、SKCO-1細胞
LOUNH91細胞系相關產(chǎn)品：CCD-112 CoN細胞、HSC-T6細胞、Vx-2細胞
NCIH1975細胞系相關產(chǎn)品：SW 480細胞、Tb 1 Lu細胞、ME-1 [Human leukemia]細胞
H-2087細胞系相關產(chǎn)品：PL-12細胞、NIH/3T3細胞、MDA-MB-453細胞
HHUA細胞系相關產(chǎn)品：U266BL細胞、Hs-578Bst細胞、NK92-MI細胞
MRMT-1細胞系相關產(chǎn)品：HOEC細胞、SNU-638細胞、CORL88細胞
H-676細胞系相關產(chǎn)品：X63-Ag 8.6.5.3細胞、Hs742T細胞、H1238細胞
L-540 Lymphoblastoid cells人霍奇金淋巴瘤細胞系
NRK49F細胞系相關產(chǎn)品：SN4741細胞、GM04678細胞、3T3-L1 ad細胞
NCI-H650細胞系相關產(chǎn)品：SK 1細胞、JKT1細胞、SW 1463細胞
NCI-H2030細胞系相關產(chǎn)品：TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、HuH28細胞、P30 OHK細胞
IMR32細胞系相關產(chǎn)品：Tu686細胞、SUDHL-5細胞、CP-70細胞
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