"LADMAC Lymphoblastoid cells小鼠骨髓淋巴細胞系
細胞背景資料：骨髓淋巴細胞；C３H
細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣
正確的細胞復(fù)蘇需知事項：細胞凍存好了，接下來要注意什么問題呢？沒錯，就是記得到時間了，拿出來復(fù)蘇。那么，細胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢？細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在？活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞，可能有污染(真菌、支原體等)，如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞：補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至７０%單層時收獲細胞，計數(shù)活細胞數(shù)，用凍存液調(diào)整細胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整)；凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞，有不同類型的凍存液，根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有)：５-１０% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì)；５-１５%甘油；如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長，應(yīng)在５０%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長２４小時)內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細胞類型，日期，凍存人等信息，并保證每凍存管不超過１.５ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi)，因此，此步驟使用干冰，或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意，在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息，做好記錄是非常非常重要的！還有一個最重要的，一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞，以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題！細胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要，熟記以下要點：當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細胞時，有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況，使用保護面罩和防護服十分必要；其實，細胞復(fù)蘇只是一個簡單的實驗，不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié)，不然，也不一定會盡如人意。例如說，人身健康方面：一定要記得做好防凍工作，戴上護目鏡；盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
Hs 832(C).T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2085細胞、NW38細胞、HCC-202細胞
SMA-560細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-361細胞、801-D細胞、Tu-686細胞
PE/CA-PJ-34細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-OV-433細胞、SUM52細胞、S-16細胞
細胞生長：懸浮
LADMAC Lymphoblastoid cells小鼠骨髓淋巴細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞復(fù)蘇基本方法：１．從液氮罐中取出安剖；有時因安剖未封嚴，浸入了液氮，取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸，因此應(yīng)帶有防護眼睛和手套。２．迅速放入盛有３６℃～３７℃水的搪瓷罐中，扣上蓋并不時搖動，盡快解凍。３．剪開紗布口袋，取出安剖，用７０％酒精擦拭消毒后，凈化臺上打開蓋，用吸管吸出細胞懸液，裝入離心管中，再補加１０ml培養(yǎng)液，吹打使細胞懸浮。４．低速離心（５００～１０００轉(zhuǎn)/分）５分鐘，取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。５．加入培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后，再移裝入培養(yǎng)瓶中，置溫箱培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T２５ flask細胞時，處理方式為：在寄送過程中，為避免起泡造成細胞脫落死亡，T２５ flask均加滿培養(yǎng)基。請檢查flask外觀，并于顯微鏡下觀察細胞生長狀況和有無污染現(xiàn)象，若有任何問題，不要打開蓋子，請立即通知細胞實驗室。將原封之T２５ flask靜置于３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱中，使細胞回溫至３７°C，并讓運送過程中少數(shù)脫落的細胞可再附著生長。隔天后，于無菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用)，僅留約５-１０ml培養(yǎng)基于flask內(nèi)，依一般培養(yǎng)方式再將細胞置入培養(yǎng)箱中，或細胞已長滿盤，則將細胞做傳代培養(yǎng)。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
293AD細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AHH-1細胞、GC-1spg細胞、UCLA-SO-14細胞
BxPC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI-7666細胞、M 1細胞、H-345細胞
NTHY-ORI3.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hEEC細胞、Mv1Lu細胞、HMy2.CIR細胞
LS-1034細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2107細胞、OsACL細胞、A 549細胞
A875細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU182細胞、U2932細胞、H820細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
LADMAC Lymphoblastoid cells小鼠骨髓淋巴細胞系
細胞生長特性：懸浮
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié)：１)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適？血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為５%-１５%，不要低于５%或高過２０%，因為含量過低會導(dǎo)致細胞營養(yǎng)不足，過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為１０%，可以適量加減；２)何時須更換培養(yǎng)基？視細胞生長密度而定，或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間，按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換；３)購買的復(fù)蘇細胞，為何會有脫落？因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩，收到后可以離心收集；４)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少，大都是因為離心過程操作上的失誤，造成細胞的物理性損傷，以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心，應(yīng)待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；５)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因？研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–８０°C太久；６)收到的冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當(dāng)，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時，均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
Nb2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-4I細胞、C32-mel細胞、U-251MG細胞
MDA175細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL28細胞、HN6細胞、MDA-MB-435細胞
B78細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI6666細胞、SW-1783細胞、ASH3細胞
751-NA-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SMA-560細胞、SW 480細胞、KYSE 70細胞
Human ErythroLeukemia細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EBC-1細胞、LAN6細胞、GM3570細胞
ketr 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTSMC細胞、Granta-519細胞、OVCAR 4細胞
AD293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-T細胞、MV4:11細胞、ID8/MOSEC細胞
MODE-K細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RC-4B細胞、GM03190A細胞、H-69細胞
PG-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SuDHL 5細胞、786-O細胞、Karpas299細胞
YD38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AG06814-J細胞、OVCAR-8/ADR細胞、143B細胞
LADMAC Lymphoblastoid cells小鼠骨髓淋巴細胞系
HANK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAF-II/CD18細胞、Hs274T細胞、NCI-H1618細胞
L cell line細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IBMF-7細胞、Hs839T細胞、SUM102PT細胞
BJ1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞、T241細胞、NCI-H510A細胞
SNU668細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Malme-3M細胞、H-446細胞、DU 4475細胞
CALU1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LUDLU1細胞、NCI-HUT-69細胞、H1770細胞
MNNG-HOS (Cl#5)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P31-FUJ細胞、HCGC細胞、Hi-5細胞
MNNG-HOS (Cl#5)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P31-FUJ細胞、HCGC細胞、Hi-5細胞
BIU-87細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUT 28細胞、COLO320DM細胞、MDA-MB-468-RED細胞
Strain L-929細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LED-WiDr細胞、H1915細胞、MT-4細胞
B16F10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CFPAC細胞、SupB15WT細胞、NB1RGB細胞
RBL2H3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：b.End3細胞、NCTC 929細胞、NCI-SNU-449細胞
B-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-86-86細胞、U-2 OS細胞、H1975細胞
HEK 293-F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TR 146細胞、Chang liver細胞、RPMI No. 1846細胞
D562細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIA-PaCa-2細胞、HFT8810細胞、SHSY5Y細胞
SUM 149PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3-LL細胞、SHEE細胞、PE CA PJ34細胞
SGC996細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEI-193細胞、HDF-a細胞、SNU-407細胞
hTERT-RPE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs821T細胞、STTG1細胞、DR2R 1610細胞
SK HEP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293-H細胞、HTR8細胞、HTori 3細胞
FL 62891細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL60細胞、NCI-SNU-216細胞、KPL-1細胞
OCI AML4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF細胞、H-1770細胞、T-HEECs細胞
H-2452細胞系相關(guān)產(chǎn)品：S-16細胞、hOMF細胞、BCaP 37細胞
WI-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RD細胞、LMTK-細胞、OCI-AML3細胞
BHK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TEC細胞、I90細胞、H2085細胞
OCI-AML-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-294T細胞、MHCC-97細胞、UMUC3細胞
CT26-clone 25細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRCV細胞、Hce8693細胞、SF 539細胞
NCI-H-128細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 8226/S細胞、NRK-49F細胞、C-127細胞
Mahlavu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp2/0-Ag14細胞、MB468細胞、HO-1-N-1細胞
COLO320 DM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC 7860細胞、A431/P細胞、MDA-1386細胞
BI-Mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KHYG-1細胞、SkChA1細胞、SW.620細胞
OUMS23細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA795細胞、WEHI-164細胞、Panc 03.27細胞
HPAF/CD18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUS-M1細胞、PANC 813細胞、BSC-40細胞
NCI-SNU-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IHH細胞、NTERA-2細胞、T98細胞
HNTEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES-SA細胞、NRK clone 52E細胞、MCM細胞
Hep 3B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Factor Dependent Continuous-Paterson 1細胞、SNGM細胞、HEK 293 c18細胞
SKBr3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-281-T細胞、HFTF細胞、OAW 42細胞
NL20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIN m5F細胞、MLFC細胞、LTEP-sm 1細胞
SUM159PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS153細胞、KMH2細胞、BJA-B-1細胞
6T-CEM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-449細胞、MALME 3M細胞、Cattle chondrocytes細胞
HCT 15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV 434細胞、NCIH2170細胞、MSTO211H細胞
Hs 578T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-AS細胞、F98細胞、WM 239-A細胞
HCC1954 BL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞、HPC-Y5細胞、SW 900細胞
NCI-SNU-1040細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL-2細胞、NIE 115細胞、H-1417細胞
H4IIE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1975細胞、M109細胞、C4I細胞
A427細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD 841 CoN細胞、SW 954細胞、RH-35細胞
H-2196細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTori 3細胞、PANC3.27細胞、C1R細胞
N-2a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL16細胞、B16-BL6細胞、NCI.H226細胞
PANC 327細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HepG2/C3A細胞、PC-3M IE8細胞、2E8細胞
Liver-02細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC-4細胞、GM00637F細胞、Ca-Ski細胞
RH-35細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2452細胞、Psi2-DAP細胞、H498細胞
McARH7777細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIADR.RES細胞、MRCV細胞、MASMC細胞
Malme-3 M細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KNS-62細胞、NS1-Ag 4/1細胞、SRS-82細胞
LADMAC Lymphoblastoid cells小鼠骨髓淋巴細胞系
HSC-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC3M-2B4細胞、OVCAR.8細胞、Ca Ski細胞
KNS-62細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMNSAH-DF-1細胞、tdott細胞、HEK 293 c18細胞
Hep 3B2.1-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB134細胞、ML2細胞、SPC-A-1細胞
B78細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI6666細胞、KYSE-150細胞、COS-7細胞
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