"TMD8 Lymphoblastoid cells人彌漫大B淋巴瘤細胞系 細胞背景資料:彌漫大B淋巴瘤;男性 細胞形態(tài):淋巴母細胞樣 貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細胞始脫落時,棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對細胞施加胰酶選擇,因為總是貼壁不牢的細胞先脫落,對腫瘤細胞來說,這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據細胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點,直接加酶消化應該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預熱)總體積1/10v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好,有證據嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡單、省事;效果很好并且不損失細胞! PL 45細胞系相關產品:RK 13細胞、HC-11細胞、Human Embryo Lung-1細胞 HCS-2/8細胞系相關產品:293 c18細胞、PVEC細胞、GM03570細胞 TE8細胞系相關產品:RASMC細胞、NKM-1細胞、PLA-801D細胞 細胞生長:懸浮 TMD8 Lymphoblastoid cells人彌漫大B淋巴瘤細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞的凍存:為避免污染造成的損失,最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉化,需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前,細胞應該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培養(yǎng)基;包含10%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基;50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%甘油的新鮮培養(yǎng)基或50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基,一些普通的培養(yǎng)基成分可能是:50%細胞條件無血清培養(yǎng)基和50%包含有7.5%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有7.5%二甲基亞砜和10%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存:計數將要凍存的活細胞。細胞應該處于對數生長期。以大約200~400g離心5分鐘沉淀細胞,使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以1×10(7)到5×10(7)細胞/ml密度,在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在無血清培養(yǎng)基中,再次懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存:使用分離試劑從基層分離細胞,分離時盡可能溫和,使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中,再次懸浮分離細胞,確定有活力細胞數。以大約200g離心5分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以5×10(6)到1×10(6)細胞/ml密度,在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕的冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉移到液氮中貯存。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 NPA87細胞系相關產品:DU 145細胞、Sc-1細胞、SHEP1細胞 HEK-293-H細胞系相關產品:LK-2細胞、Reh細胞、SHG 44細胞 HSC6細胞系相關產品:HOP 92細胞、Dami細胞、SNU620細胞 L5178-R細胞系相關產品:Karpas-299細胞、GM3190細胞、P3X63-Ag8.653細胞 JEKO細胞系相關產品:H-520細胞、NCIH1975細胞、33604細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系 TMD8 Lymphoblastoid cells人彌漫大B淋巴瘤細胞系 細胞生長特性:懸浮 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通??刂圃冢?2min);2)鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散;3)取部分細胞懸液轉移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當的完全培養(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時);2)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化,請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng);3)如簽收時出現培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。 Murine Carcinoma-38細胞系相關產品:SNU-739細胞、95-D細胞、87MG細胞 CCRF-SB細胞系相關產品:RT-BM 1細胞、NS1-1 Ag4.1細胞、C12細胞 OE21細胞系相關產品:NCI-H508細胞、ECV304細胞、H64細胞 UCD-MLA-144細胞系相關產品:SW-900細胞、L132細胞、SK MEL 5細胞 A875細胞系相關產品:SNU182細胞、U2932細胞、H820細胞 T/G HA-VSMC細胞系相關產品:OVCAR-433細胞、PLC/PRF5細胞、NCI-H1563細胞 KYSE-150細胞系相關產品:BJA-B細胞、74Int細胞、Ly1細胞 SNU-761細胞系相關產品:HM1900細胞、MES 13細胞、769P細胞 CHO/dhFr-細胞系相關產品:MDBK細胞、NOK細胞、HT 115細胞 SW527細胞系相關產品:R3/1細胞、P3/NS-1細胞、RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細胞 TMD8 Lymphoblastoid cells人彌漫大B淋巴瘤細胞系 NCI-H1385細胞系相關產品:TCCSUP細胞、H1703細胞、LYR細胞 SKN-SH細胞系相關產品:Hs606細胞、GOS-3細胞、B16-F0細胞 C17細胞系相關產品:MDA-453細胞、SK-MEL-31細胞、Tn5B1-4細胞 Hs 636 T細胞系相關產品:SNG-M細胞、Hs.27細胞、A-101D細胞 M-14細胞系相關產品:SW626細胞、NIH 3T6細胞、BNL-CL.2細胞 MCF7ADR細胞系相關產品:SNU-5細胞、A549ATCC細胞、BrCL12細胞 MCF7ADR細胞系相關產品:SNU-5細胞、A549ATCC細胞、BrCL12細胞 H87細胞系相關產品:LNCaP-ATCC細胞、HEK293F細胞、RC-2細胞 RLE-6TN細胞系相關產品:C3H10T1/2CL8細胞、U-251MG細胞、RWPE-1細胞 Caco2-BBE細胞系相關產品:Hs729細胞、OCI-AML5細胞、Embryonic Bovine Tracheal cells細胞 LAPC-4細胞系相關產品:MESSA Dx5細胞、COR-L51細胞、B95.8細胞 CV-1 in Origin Simian-1細胞系相關產品:H-1993細胞、PG-4 (S+L-)細胞、TF-1a細胞 TE-10細胞系相關產品:NGEC細胞、SK-N-BE(2)-C細胞、SUPB-15細胞 HCC9724細胞系相關產品:BIU87細胞、MRAEC細胞、T-47D細胞 RAOEC細胞系相關產品:KNS62細胞、WSU-HN13細胞、H-1355細胞 AML-2細胞系相關產品:OCI-Ly7細胞、NCI-H1755細胞、C-28I2細胞 HEK 293 EBNA細胞系相關產品:Rca-B細胞、Hs 683.T細胞、CHL-CL-11細胞 Colon38細胞系相關產品:H125細胞、RC13細胞、JF305細胞 OCILY-19細胞系相關產品:HLEB3細胞、SUM149細胞、CV-1細胞 OCILY-19細胞系相關產品:HLEB3細胞、SUM149細胞、CV-1細胞 C32 mel細胞系相關產品:MESSA-DX5細胞、C1R細胞、NGEC細胞 MDA MB231細胞系相關產品:GS-9L細胞、T-ALL1細胞、KMST-6細胞 H1618細胞系相關產品:TE-12細胞、TCMK-1細胞、H810細胞 MN-60細胞系相關產品:Wien133細胞、H-838細胞、HCC1599細胞 H35細胞系相關產品:OV 2008細胞、6T-CEM細胞、OVCAR8細胞 WB F344細胞系相關產品:T-HSC細胞、LS-174T細胞、RPMI8226/S細胞 TE-9細胞系相關產品:DMS-79細胞、MCF/Adr細胞、ECC10細胞 MESSA-DX5細胞系相關產品:GLC-15細胞、PLA801D細胞、OCI-AML2細胞 SNU-484細胞系相關產品:T.T細胞、KTC-1細胞、EBNA293細胞 SJ-Rh 30細胞系相關產品:LLC PK1細胞、H716細胞、RKN細胞 WIL2-S細胞系相關產品:COLO 824細胞、TH1細胞、HRPEpiC細胞 McG-1細胞系相關產品:Y3.AG.1.2.3細胞、HPDEC細胞、ECV-304細胞 OVCAR-8細胞系相關產品:578T細胞、Epstein-Barr-1細胞、BJA-B1細胞 CaES-17細胞系相關產品:MDA453細胞、MNNGHOS細胞、H211細胞 F-81細胞系相關產品:BIC細胞、WM266細胞、X63細胞 NCIH2171細胞系相關產品:CAL-148細胞、NCI-H2073細胞、LICR-LON-HN6細胞 Medical University of Graz-Chordoma 1細胞系相關產品:HEH2細胞、CA46細胞、B95-8細胞 HCT15細胞系相關產品:P-3J細胞、HuT 102細胞、OVCAR 8細胞 RL-95-2細胞系相關產品:SK-ES-1細胞、Y3-Ag123細胞、SUDHL2細胞 HCT/FU細胞系相關產品:Hs 27細胞、Panc-1-P細胞、HUVSMC細胞 PC3M-IE8細胞系相關產品:NWA細胞、SW-1417細胞、X63.Ag8.653細胞 Huh 7.5.1細胞系相關產品:LM(TK-)細胞、SuDHL 2細胞、UM2細胞 SACC-83細胞系相關產品:LM-TK-細胞、SGC996細胞、HCC-38細胞 RMG-I細胞系相關產品:HMCB細胞、C3H-10T1/2細胞、293T/17細胞 SU86_86細胞系相關產品:HFL-I細胞、Melan-a細胞、L-Wnt3A細胞 FCCH1024細胞系相關產品:751-NA細胞、KBM-7細胞、Emory University-3細胞 U-87 MG細胞系相關產品:LAC細胞、L-6TG細胞、ST 486細胞 Dysplastic Oral Keratinocyte細胞系相關產品:ACC2細胞、SK-RC-42細胞、SKMEL1細胞 NCI-H1869細胞系相關產品:LS-1034細胞、ssMCF7細胞、TGHAVSMC細胞 Hep 3B2細胞系相關產品:JKT-1細胞、CCD-841-CoN細胞、769-P細胞 SKml2細胞系相關產品:P3/X63-Ag8細胞、C-32細胞、MOLM16細胞 TMD8 Lymphoblastoid cells人彌漫大B淋巴瘤細胞系 SACCLM細胞系相關產品:HEK 293細胞、HCT/Taxo1細胞、Det. 562細胞 LLC細胞系相關產品:SK-RC 52細胞、GM02132C細胞、Roswell Park Memorial Institute 1788細胞 GAK細胞系相關產品:RSC-364細胞、PLA-801D細胞、D-283 Med細胞 OE21細胞系相關產品:NCI-H508細胞、H2452細胞、R-1059-D細胞 "
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