"P388D1 Lymphoblastoid cells小鼠淋巴樣瘤細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹 細(xì)胞形態(tài):淋巴母細(xì)胞樣 貼壁消化難題:1,先用PBS 把細(xì)胞洗兩遍,使瓶?jī)?nèi)沒有血清了,減少對(duì)胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細(xì)胞有些消化下來時(shí),拿著瓶口,運(yùn)用手腕的力量輕輕震蕩瓶?jī)?nèi)液體,這樣細(xì)胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團(tuán)、絮狀:消化液里加入edta可以減少細(xì)胞成團(tuán)的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進(jìn)口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細(xì)胞貼壁要求不是很嚴(yán)格的話,一般不需要進(jìn)行離心。鼻咽癌細(xì)胞的貼壁能力很強(qiáng),用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時(shí)要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細(xì)胞室溫下受損以及在此溫度時(shí)胰酶活性最強(qiáng))至細(xì)胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細(xì)胞脫落(有流下來的趨勢(shì)),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細(xì)胞很多且需要大量細(xì)胞實(shí)驗(yàn),則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細(xì)吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細(xì)胞聚集成團(tuán)塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細(xì)胞或細(xì)胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細(xì)胞,收集全部的細(xì)胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細(xì)胞在培養(yǎng)的過程中會(huì)死亡脫落,在換液的時(shí)候可以清除掉! T98細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUPB-15細(xì)胞、CF PAC-1細(xì)胞、MV-4-11細(xì)胞 XWLC-05細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1770細(xì)胞、V79-1細(xì)胞、Hela-mock細(xì)胞 LADMAC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TO175T細(xì)胞、MRC 5細(xì)胞、FHCRC subclone 11細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng):懸浮 P388D1 Lymphoblastoid cells小鼠淋巴樣瘤細(xì)胞系 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞傳代的一般方法:開始細(xì)胞傳代前,仔細(xì)檢查細(xì)胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細(xì)胞(單層細(xì)胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細(xì)胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細(xì)胞吹打管(20ml)(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)、C02 孵箱、超凈臺(tái)、倒置顯微鏡、4℃、-20℃冰箱;操作步驟:鏡檢細(xì)胞,挑選生長(zhǎng)狀態(tài)良好,細(xì)胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細(xì)胞。配制細(xì)胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內(nèi),加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細(xì)胞;先用PBS洗液沖洗細(xì)胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細(xì)胞瓶?jī)?nèi)加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細(xì)胞瓶平放,使消化液完全覆蓋細(xì)胞表面。至細(xì)胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液吹打分散細(xì)胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝,然后補(bǔ)加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。(由細(xì)胞接種濃度決定);填寫傳代記錄。 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 NCI-H735細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA433細(xì)胞、MES-SA Dx5細(xì)胞、OsACL細(xì)胞 CW2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Epstein-Barr-2細(xì)胞、MJ細(xì)胞、HS 683T細(xì)胞 HEL 299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2085細(xì)胞、MM.1S細(xì)胞、L-5178-Y細(xì)胞 Emory University-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ME 180細(xì)胞、MDA-MB-157細(xì)胞、HIT clone T15細(xì)胞 LTEP-s細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IEC6細(xì)胞、CCRF-CEM/S細(xì)胞、TR 146細(xì)胞 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 P388D1 Lymphoblastoid cells小鼠淋巴樣瘤細(xì)胞系 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:懸浮 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書 細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項(xiàng):1)如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞,而收到時(shí)呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請(qǐng)將懸浮的細(xì)胞即時(shí)離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員會(huì)跟進(jìn)解決;2)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢;適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細(xì)胞生長(zhǎng)密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長(zhǎng)不均:貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長(zhǎng),可將細(xì)胞進(jìn)行消化,重懸打散細(xì)胞,加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。 Ramos 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBE 135-E6/E7細(xì)胞、SK-N-BE-2c細(xì)胞、Sc-1細(xì)胞 H292細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU620細(xì)胞、BALB/3T3 clone A31細(xì)胞、NCI-H157細(xì)胞 293-F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3M-IE8細(xì)胞、JIII細(xì)胞、C8161細(xì)胞 ECV304細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H82細(xì)胞、3T3L1細(xì)胞、GOS-3細(xì)胞 HCFB(HCF)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI-231細(xì)胞、MG63細(xì)胞、OVCAR 420細(xì)胞 Bat lung細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEP-sm細(xì)胞、SHI1細(xì)胞、H-187細(xì)胞 Tn-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC97H細(xì)胞、AG06814-M細(xì)胞、16-HBE細(xì)胞 MDA-MB 231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT 116細(xì)胞、UM-UC-1細(xì)胞、HCC1806細(xì)胞 SNUC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC3細(xì)胞、PY8119細(xì)胞、AML-EOL-1細(xì)胞 PC-3M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Murine Lung Epithelial-12細(xì)胞、NCIH128細(xì)胞、8226/S細(xì)胞 P388D1 Lymphoblastoid cells小鼠淋巴樣瘤細(xì)胞系 SK-N-BE2C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB468細(xì)胞、TE 32.T細(xì)胞、OVCAR-432細(xì)胞 ARO81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SN12C細(xì)胞、Y3-Ag1,2,3細(xì)胞、Baby Hamster Kidney from litter No. 21細(xì)胞 NCI-H345細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOVAS-1細(xì)胞、MAC1細(xì)胞、K-1735細(xì)胞 L cell line細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IBMF-7細(xì)胞、Hs839T細(xì)胞、SUM102PT細(xì)胞 MOVAS-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Liver-7702細(xì)胞、NCI-H460細(xì)胞、WM266細(xì)胞 H1618細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-12細(xì)胞、TCMK-1細(xì)胞、H810細(xì)胞 THPI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE(2C)細(xì)胞、NBL-12細(xì)胞、HS940細(xì)胞 SW 900細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H295R-S1細(xì)胞、H1563細(xì)胞、Tb1.Lu細(xì)胞 MRAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP C4-2B細(xì)胞、LS-123細(xì)胞、RAMSCs細(xì)胞 U-373MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Astrocyte type I clone細(xì)胞、FU-97細(xì)胞、DoTc2 4510細(xì)胞 NKL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細(xì)胞、C4-2 B細(xì)胞、SW 1222細(xì)胞 NCI-H2073細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Gerner 7666細(xì)胞、HS-68細(xì)胞、B35細(xì)胞 COLO678細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P30 OHK細(xì)胞、PANC403細(xì)胞、H9細(xì)胞 HPMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FF-WT-BJ細(xì)胞、HEL-92_1_7細(xì)胞、RFL6細(xì)胞 HCEC-B4G12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AX-Mel細(xì)胞、MNNG細(xì)胞、H-1975細(xì)胞 BEL7404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Detroit562細(xì)胞、LNCaP FGC細(xì)胞、SACC83細(xì)胞 AG06814-N細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-838細(xì)胞、SKNO1細(xì)胞、TE8細(xì)胞 HCC0070細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1395細(xì)胞、TO 175.T細(xì)胞、DHL-16細(xì)胞 Cloudman S91 melanoma clone M-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:451Lu細(xì)胞、BNL CL.2細(xì)胞、HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細(xì)胞 GM-346細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVHM細(xì)胞、KM H-2細(xì)胞、NBLS細(xì)胞 SNU-475細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SuDHL 10細(xì)胞、TF-1a細(xì)胞、SuDHL 10細(xì)胞 CEM.C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:10RGB細(xì)胞、NCIH23細(xì)胞、MN-9D細(xì)胞 GalK 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Homo sapiens No. 578, breast cells細(xì)胞、HEB細(xì)胞、WiDr細(xì)胞 Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHEE細(xì)胞、NCI-H660細(xì)胞、NS-1-Ag4-1細(xì)胞 EFM192B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-394細(xì)胞、NCI-H2227細(xì)胞、Helacyton gartleri細(xì)胞 Y3Ag1.2.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKLMS1細(xì)胞、SNU16細(xì)胞、MDA MB 361細(xì)胞 MG-HU-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-32細(xì)胞、CCD-1112sk細(xì)胞、LTEPa2細(xì)胞 SK Mel 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VK2細(xì)胞、H.Ep. No. 2細(xì)胞、GH3細(xì)胞 NCM356細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCK II細(xì)胞、REC1細(xì)胞、AK細(xì)胞 HC11 Mammary Epithelium細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:F98細(xì)胞、H-1734細(xì)胞、4T1.2細(xì)胞 SUM-52PE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM01232E細(xì)胞、LLC-PK1細(xì)胞、U-226AR1細(xì)胞 MDA-kb2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-699細(xì)胞、ketr 3細(xì)胞、P3/NS1/1-Ag4-1細(xì)胞 Panc 04.03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mono-Mac-1細(xì)胞、T2(174 x CEM.T2)細(xì)胞、L428細(xì)胞 FAK+/+細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1869細(xì)胞、Melanoma 14細(xì)胞、RD-ES細(xì)胞 COR-L88細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FLC-7細(xì)胞、JCA1細(xì)胞、H-1385細(xì)胞 KYSE-180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM190細(xì)胞、PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細(xì)胞、SKNBE(1)細(xì)胞 AU 565細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Det 562細(xì)胞、OCM1細(xì)胞、WC00097細(xì)胞 Panc 04.03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mono-Mac-1細(xì)胞、T2(174 x CEM.T2)細(xì)胞、L428細(xì)胞 V-79-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBZY 1細(xì)胞、C3H/10T1/2 clone 8細(xì)胞、A204細(xì)胞 HTR8/SVneo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COS7細(xì)胞、P19細(xì)胞、Hela-Ap-1細(xì)胞 WC00044細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK 293 EBNA細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細(xì)胞、MDA-175細(xì)胞 Ej138細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hi5細(xì)胞、MB-49細(xì)胞、G422細(xì)胞 3T3J2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMRC2細(xì)胞、CAL-39細(xì)胞、HEK-293-FT細(xì)胞 QBI-293A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:G401細(xì)胞、C33-A細(xì)胞、Hs729細(xì)胞 IAR20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1222細(xì)胞、WIL2-S細(xì)胞、NCIH1573細(xì)胞 CAL27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA MB 231細(xì)胞、R.K.13細(xì)胞、TO175T細(xì)胞 UK Pan-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPMEC細(xì)胞、DAN-G細(xì)胞、RBE4細(xì)胞 CL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEL 7404細(xì)胞、HEL-92細(xì)胞、MiaPaCa-2細(xì)胞 SK-CO-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1734細(xì)胞、NCI-H1437細(xì)胞、CV 1細(xì)胞 HFT-8810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1155細(xì)胞、TJ905細(xì)胞、Capan2細(xì)胞 M109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JAR細(xì)胞、RGC5細(xì)胞、Hs895.T細(xì)胞 P388D1 Lymphoblastoid cells小鼠淋巴樣瘤細(xì)胞系 IPLB-Sf21-AE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU1細(xì)胞、H-1648細(xì)胞、MT-2J細(xì)胞 MDA-330細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SPC-A-1細(xì)胞、SK-RC-39細(xì)胞、GRSL細(xì)胞 RH-30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IAR-20細(xì)胞、PC 61細(xì)胞、Cattle chondrocytes細(xì)胞 293-F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3M-IE8細(xì)胞、Panc 05.04細(xì)胞、CHO cell clone K1細(xì)胞 "
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