"KCL-22 Lymphoblastoid cells人慢性粒細胞白血病細胞系 細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹 細胞形態(tài):淋巴母細胞樣 細胞復(fù)蘇后貼壁細胞較少的問題分析:總結(jié)1:復(fù)蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細胞沒問題。總結(jié)2:首先應(yīng)該懷疑凍存,實際上復(fù)蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細胞復(fù)蘇時失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復(fù)蘇的時候細胞已進入凋亡程序,不可逆轉(zhuǎn)的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質(zhì)量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。6、如果你細胞污染,你是否能很快看到,我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話,這個細菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當會事。 SHSY-5Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL-1細胞、SKLMS-1細胞、Human Corneal Epithelial cells-Transformed細胞 SF 295細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB 453細胞、SW-1116細胞、HuP-T3細胞 PA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Becker細胞、NUGC-2細胞、NCIH1819細胞 細胞生長:懸浮 KCL-22 Lymphoblastoid cells人慢性粒細胞白血病細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞的衰老:體外細胞培養(yǎng)實驗證明:成纖維細胞:來自胎兒傳代50次后衰老死亡,來自成人傳代20次后衰老死亡(與具體年齡有關(guān);來自小鼠傳代14--28次后衰老死亡,來自烏龜傳代90--125次后衰老死亡。細胞衰老過程中會發(fā)生一系列的變化,包括:蛋白質(zhì)合成速度降低,已有蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)變化,特異蛋白質(zhì)成份出現(xiàn);同時,細胞核,線粒體,膜系統(tǒng)、骨架系統(tǒng)等都有結(jié)構(gòu)、功能的改變。細胞衰老原因,尚無定論,出現(xiàn)過好幾種理論與假說,其中得到較廣泛認可的是“自由基損傷假說”。細胞凋亡:細胞的死亡是個體存活的正?,F(xiàn)象,常見的細胞死亡形式有3種:壞死、凋亡和細胞毒性。多細胞生物的生命活動中,因為環(huán)境因素的突然變化或病原物的入侵,導(dǎo)致一部分細胞死去,稱為細胞的病理死亡,或細胞壞死。壞死是細胞暴露于嚴重的物理或化學(xué)刺激時導(dǎo)致的細胞死亡;細胞毒性是由細胞或者化學(xué)物質(zhì)引起的單純的細胞殺傷事件,不依賴于其它兩種細胞死亡機理,如殺傷T細胞的細胞毒性作用。還有一種情況,一部分細胞的死亡是生物個體正常生命活動(代謝、生長、發(fā)育、分化)的一個必要部分;似乎帶有“犧牲局部,保全整體”的意味。這種情況下的細胞死亡,明顯地受遺傳控制,稱為細胞凋亡。凋亡(Apoptosis)則是程序性的、正常的細胞死亡,是機體清除無用的或者不想要的細胞的手段。它與細胞壞死是兩個截然不同的過程,無論從形態(tài)學(xué)、生物學(xué)還是生化的特征來說,都有明顯的區(qū)別。細胞凋亡現(xiàn)象普遍存在于生物界。細胞凋亡與細胞增殖、分化和衰老起著互補與平衡的作用,在多細胞動物的發(fā)育、形態(tài)建成與維持中扮演至關(guān)重要的角色。作為細胞的一種基本生命現(xiàn)象,凋亡失控的結(jié)果將是可怕的:凋亡不足時,易發(fā)生癌變、病毒性疾病和自身免疫疾病;而凋亡過量則可能產(chǎn)生獲得性免疫缺陷綜合征(HIV)、重癥肝炎與退行性神經(jīng)疾病,如老年性癡呆癥(Alzheimer""s disease)、帕金森氏癥(Parkinson""s disease)。因此研究細胞凋亡及其機理具有重要的理論和實踐意義。 細胞傳代方法:1:2傳代 Hs 606細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L132細胞、NCI-H2081細胞、NTERA-2 clone D1細胞 H766T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs27細胞、EAHY-926細胞、Y3Ag1.2.3細胞 SK-Mel 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 683細胞、KYSE 140細胞、Murine Leydig Tumor Cell line-1細胞 LLC-WRC 256細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuNS1細胞、HEEpiC細胞、MHCC-LM3細胞 3T3-Swiss albino細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPTEC/TERT1細胞、SVG(P12)細胞、ANA-1細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 KCL-22 Lymphoblastoid cells人慢性粒細胞白血病細胞系 細胞生長特性:懸浮 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié):1)一般客戶拿到細胞后,應(yīng)該注意什么?客戶收到細胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責(zé)免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細胞多久能到,是寄凍存的細胞還是復(fù)蘇好的細胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細胞前請確認當?shù)販囟?,如果氣溫低于4度的,則采用郵寄凍存細胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應(yīng),造成細胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。 GS-9L細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-028細胞、Neukoplast細胞、OAW42細胞 HCT GEO細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ISHI細胞、Rainbow Trout Embryo細胞、T_T_細胞 PL5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PSN-1細胞、JM-Jurkat細胞、SK-N-FI細胞 NTERA-2cl.D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHBE細胞、MDA PCa 2b細胞、KCL22S細胞 SKHEP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat 1細胞、Human Liver-7702細胞、KHYG1細胞 CCC-HEL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF763細胞、MDA.MB.231細胞、WM-266-mel細胞 NCI-H345細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOVAS-1細胞、MAC1細胞、K-1735細胞 SK Mel 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VK2細胞、H.Ep. No. 2細胞、GH3細胞 OV-2008細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPAM-WT細胞、MHCCLM3細胞、R1610細胞 H.Ep.-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-886細胞、PLA802細胞、BT-B細胞 KCL-22 Lymphoblastoid cells人慢性粒細胞白血病細胞系 NRCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fu97細胞、8505C細胞、COLO320HSR細胞 CCRF SB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1355細胞、KTCTL-140細胞、A101D細胞 M14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK MEL-28細胞、T1-73細胞、Douglas Foster-1細胞 K562/ADP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SJRH-30細胞、TE-85 clone 5細胞、Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細胞 Hep 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RA細胞、HEK 293FT細胞、HOSEpiC細胞 KYSE-270細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCA 38細胞、NCI-H2108細胞、GM02132C細胞 YD38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AG06814-J細胞、OVCAR-8/ADR細胞、143B細胞 Hela-Ap-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-2/ad細胞、HSKMC細胞、MKN1細胞 OCILY3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Madison細胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞、HEK AD293細胞 C3H10T1/2 clone8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COS-1細胞、MCF10A細胞、NCIH322細胞 INS-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BALL1細胞、22Rv1細胞、COLO 206細胞 Hs 604.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2073細胞、L(TK-)細胞、U266-B1細胞 RPMI7951細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE(2)-C細胞、HT144細胞、TGW-nu細胞 COLO-357細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU449細胞、S91細胞、MM1.S細胞 Hs 852.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IR 983F細胞、HS852.T細胞、NTC-200細胞 OCI-LY-18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ROS17/2.8細胞、MCA38細胞、HCC-9724細胞 H-1373細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCO細胞、CHP 212細胞、MCFs細胞 ISHI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF17細胞、MC-26細胞、NCI-SNU-387細胞 Hs821T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ATC241細胞、HCC2279細胞、MZ-CRC-1細胞 3T3 J2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Henrietta Lacks cells細胞、RPMI 8402細胞、G-401細胞 HBVSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-27細胞、Kelly細胞、OCI AML4細胞 KYSE180細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RSC-96細胞、SU4細胞、JROECL21細胞 SW 626細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-1/sq細胞、HK-2 [Human kidney]細胞、159 PT細胞 H2342細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HGE細胞、3AA細胞、MC 3T3-E1細胞 SUDHL5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T98-G細胞、NEC-8細胞、KP 4細胞 HTR-8/SV-neo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T24細胞、Doubling time: ~50 hours (ATCC).細胞、H1666_DA細胞 KYSE410細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PTK-1細胞、HOS (TE85, Clone F5)細胞、WPE-int細胞 Hs578Bst細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC10 RGB細胞、A427細胞、EFM192C細胞 LSECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H295細胞、QGY7701細胞、DHL10細胞 H2198細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Malme3M細胞、NK10a細胞、TB-1 Lu細胞 L615細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM02132C細胞、KOSC-2細胞、Earles's cells細胞 Wien 133細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1404細胞、KLM-1細胞、MNNG細胞 H1184細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV-CA 432細胞、KCL22S細胞、YAC細胞 RSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DH-L5細胞、TKB1細胞、UWB1.289細胞 CHO-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OPM-2細胞、NTera2 cl.D1細胞、KMB17細胞 TK.10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa/DDP細胞、ECV-304細胞、TOV112細胞 OCILY3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Madison細胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞、HEK AD293細胞 SNK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1882細胞、NCI-H847細胞、Human Hepatocyte Line 5細胞 WC00079細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A549ATCC細胞、MKN74細胞、D 407細胞 Helacyton gartleri細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCGC細胞、VP229細胞、RBL.2H3細胞 NCI-1155細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM05372細胞、MCF7-GFP細胞、102PT細胞 MBT2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-9/GR細胞、M-14細胞、MHCC97H細胞 TE-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNBE細胞、U2-OS細胞、SuDHL 1細胞 G361mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VP 267細胞、HCC-202細胞、HPB/ALL細胞 8226細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT-15細胞、H-1930細胞、NCI H295R細胞 HARA-B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUCCT1細胞、MARC145細胞、DR2R1610細胞 DMS114細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LL/2細胞、Nb 2細胞、HCC-9204細胞 SU-DH-L5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC 61細胞、RetroPack PT67細胞、EBTr細胞 R D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 120細胞、MDA-MB-175VII細胞、SUM 149細胞 H 9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tadarida brasiliensis 1 lung細胞、BE(2)C細胞、P3/NS1/1-Ag4.1細胞 751-NA-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SMA-560細胞、SW 480細胞、KYSE 70細胞 KCL-22 Lymphoblastoid cells人慢性粒細胞白血病細胞系 IMR90細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Natural Killer-92細胞、Line 522細胞、COLO684細胞 TE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2228細胞、OKa-C-1細胞、OCI Ly19細胞 NG10815細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P30-OHK細胞、Michigan Cancer Foundation-12A細胞、Kit225細胞 PL5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PSN-1細胞、KMH-2細胞、NCI-H2110細胞 "
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