"6T-CEM Lymphoblastoid cells人T細胞白血病細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣
細胞復蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
NCI-522細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SR細胞、He La細胞、TE14細胞
HCC-1569細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WSUDLCL2細胞、AN3 CA細胞、Hs606T細胞
hTERT RPE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QGY-7703細胞、CCRFCEM細胞、G519細胞
細胞生長：懸浮
6T-CEM Lymphoblastoid cells人T細胞白血病細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結(jié)凍時體積會增加約１０%，必須預留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞，而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”：通常經(jīng)過熱處理之血清，沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”，常會誤認為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會使此沈淀物增多，更會誤認為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測，又沒有污染。一般而言，此小黑點應(yīng)不會影響細胞之生長，但若懷疑此血清之品質(zhì)，應(yīng)立即停用，更換另一批號的血清。
細胞傳代方法：１：２傳代
Kelly細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OSC19細胞、CHL-IU細胞、CCD-1095Sk細胞
OCIAML4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NG10815細胞、A2780/Taxol細胞、3T3 clone A31細胞
NHLF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：149PT細胞、A-1847細胞、Anglne細胞
HEK 293FT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CBRH7919細胞、HBE細胞、IAR 20細胞
Hs695細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB4細胞、C-33-A細胞、M109細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
6T-CEM Lymphoblastoid cells人T細胞白血病細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
Centre Antoine Lacassagne-148細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARO-81細胞、A2058細胞、AdHek細胞
MCF10A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H647細胞、GP5d細胞、CV-1.K細胞
EA hy 926細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00637B細胞、SUDHL-6細胞、HS-68細胞
B16/BL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ketr 3細胞、Huh-7.5細胞、RWPE2細胞
SW 48細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCe-8693細胞、MFHL-2細胞、Detroit-562細胞
MLMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-266細胞、GDM-1細胞、HuT-78細胞
CV-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD 1112SK細胞、HCPEpiC細胞、WiDrTC細胞
CT26細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-EMC-SS細胞、GM03569B細胞、H-526細胞
NCIH1836細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-451Lu細胞、HUT-125細胞、OVCAR 433細胞
OK-WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BBE細胞、AML-193細胞、PLA-801C細胞
6T-CEM Lymphoblastoid cells人T細胞白血病細胞系
HMO6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NG 108-15細胞、CNE2Z細胞、H-378細胞
BTI-TN5B1-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HASMC細胞、NTera 2/cl.D1細胞、Human Pancreatic Duct Epithelial細胞
OSRC2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GL261細胞、Hep 3B2.1-7細胞、CA-OV-3細胞
IEC 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H865細胞、H4細胞、Hs 606.T細胞
A 253細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P31 FUJ細胞、HFLS-RA細胞、FOXNY細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep-3B細胞、KM12 SM細胞、HEK293E細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep-3B細胞、KM12 SM細胞、HEK293E細胞
Ramos細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL51細胞、PC-9細胞、C32 mel細胞
C-26細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-878細胞、NS-1-Ag4-1細胞、J-774A.1細胞
Co-115細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIN Cl-5F細胞、HCT-FET細胞、MDAMB415細胞
SNU-1040細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL-2細胞、MSC細胞、SW-1353細胞
CA 46細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D283 Med細胞、WERI-Rb 1細胞、Colo741細胞
HSC 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P1-Raji細胞、YES2細胞、SNU368細胞
IMR90細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Natural Killer-92細胞、Line 522細胞、COLO684細胞
HTori-3.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL-7405細胞、TEC細胞、P3HR-1細胞
OVMANA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-5細胞、LIXC-002細胞、PA317細胞
MEC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAF-I細胞、HCC-2935細胞、NCI-H889細胞
CCD-112 CoN細胞系相關(guān)產(chǎn)品：266 Bl細胞、H211細胞、Panc-02細胞
NuTu 19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGE細胞、PT-K75細胞、HB611細胞
P3-X63-Ag8-6-5-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JJN-3細胞、CT26細胞、HEK293-EBNA1細胞
AGS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Glioma 261細胞、B 95.8細胞、H-596細胞
RKOE6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 190PT細胞、BCECs細胞、BC-3-H-I細胞
HAVSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC95細胞、P3/NS1/1-Ag4-1細胞、Colon-38細胞
H740細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Neuro2a細胞、SUM-190細胞、IOSE80細胞
NCIH295R細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TI-73細胞、NCIH1755細胞、NCI-H2591細胞
SUM190PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLA-801C細胞、MLE 12細胞、NOMO1細胞
HCC366細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-363細胞、KYSE70細胞、GM00637H細胞
NCI-H2106細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Institute for Medical Research-32細胞、SK-OV-433細胞、VMM-5A細胞
HCC-95細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit-225細胞、HDQ-P1細胞、DMS-273細胞
LP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE520細胞、Colon26細胞、HIBEC細胞
2V6.11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPLB-Sf21AE細胞、NCIH1299細胞、WC00044細胞
HBdSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 52細胞、IHH細胞、H526細胞
2V6.11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPLB-Sf21AE細胞、NCIH1299細胞、WC00044細胞
SGC7901/DDP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCC 97-H細胞、SUM190PT細胞、Co-115細胞
NCIH548細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 679細胞、HGC27細胞、NCI-H838細胞
MOLT-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL92.1.7細胞、RGC-5細胞、SNU668細胞
WRL-68細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS411細胞、MeT-5A細胞、SUDHL-5細胞
NTERA2-D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGBC11TKB細胞、H378細胞、BT-549細胞
NTERA2-D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGBC11TKB細胞、H378細胞、BT-549細胞
SW48細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2452細胞、LAN5細胞、RS4:11細胞
ACT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-2-Ad細胞、SW1990細胞、H1688細胞
253JB-V細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV2008細胞、HSC-6細胞、NCI-HUT-520細胞
JJN3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DrG細胞、SK-RC 39細胞、MiaPaca.2細胞
P3X63 Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Factor Dependent Cell-Paterson 1細胞、HHL-5細胞、MDA231-LM2-4175細胞
SK-ES-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CD18/HPAF細胞、GCT細胞、N87細胞
C 643細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPC-TW 01細胞、HTh74細胞、MDA-453細胞
OCI/AML4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE-2c細胞、MPC11細胞、OCI/AML4細胞
MKN 7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCAEC細胞、COR-L279細胞、JEG-3細胞
NCIH1623細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRC5細胞、PLA801-95D細胞、HRA19細胞
Opossum Kidney細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK RC 52細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細胞、NHA細胞
Calu 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAN6細胞、H220細胞、K299細胞
6T-CEM Lymphoblastoid cells人T細胞白血病細胞系
P3-X63-Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IMR 32細胞、SMMC 7721細胞、HCC-15細胞
Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC 12細胞、MONO-MAC 6細胞、KYSE0030細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RINm-5F細胞、AML-12細胞、SK.OV.3細胞
EA hy 926細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00637B細胞、NCIH1155細胞、Sp 2817細胞
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