"MAVER-1 Lymphoblastoid cells人淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹 細(xì)胞形態(tài):淋巴母細(xì)胞樣 正確的細(xì)胞復(fù)蘇需知事項(xiàng):細(xì)胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復(fù)蘇。那么,細(xì)胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項(xiàng)呢?細(xì)胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細(xì)胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細(xì)胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細(xì)胞:補(bǔ)充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細(xì)胞的前一天補(bǔ)充新的培養(yǎng)液。在細(xì)胞長至70%單層時收獲細(xì)胞,計(jì)數(shù)活細(xì)胞數(shù),用凍存液調(diào)整細(xì)胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細(xì)胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細(xì)胞并用凍存液重懸細(xì)胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細(xì)胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細(xì)胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細(xì)胞的詳細(xì)信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細(xì)胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細(xì)胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點(diǎn):當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細(xì)胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護(hù)面罩和防護(hù)服十分必要;其實(shí),細(xì)胞復(fù)蘇只是一個簡單的實(shí)驗(yàn),不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細(xì)節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護(hù)目鏡;盡量降低DMSO對細(xì)胞的損傷等等。 NCIH2347細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-48細(xì)胞、MFE296細(xì)胞、KOPN8細(xì)胞 NCIH1915細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW260細(xì)胞、293細(xì)胞、MDA 435細(xì)胞 WIL2S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TGW細(xì)胞、HOC細(xì)胞、SF-539細(xì)胞 細(xì)胞生長:懸浮 MAVER-1 Lymphoblastoid cells人淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞系 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞學(xué)在生命科學(xué)科中起著至關(guān)重要的作用,近年來細(xì)胞學(xué)蓬勃發(fā)展,并取得了重大的進(jìn)展,細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室的構(gòu)建也是各個院校生物學(xué)科必備的實(shí)驗(yàn)室。細(xì)胞實(shí)驗(yàn)謹(jǐn)慎復(fù)雜,需要的實(shí)驗(yàn)設(shè)備種類繁多,下面就一些動物細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室必備儀器進(jìn)行簡單介紹:CO2培養(yǎng)箱是細(xì)胞培養(yǎng)的必備儀器,它為細(xì)胞提供了一個體外培養(yǎng)的舒適環(huán)境,如適宜的溫度、濕度、酸堿度、O2濃度等。細(xì)胞在體外培養(yǎng)時很容易受到各種細(xì)菌、微生物的感染,因此,CO2培養(yǎng)箱的滅菌和抑菌能力就顯得尤為重要。純水系統(tǒng):細(xì)胞培養(yǎng)用水一般要求雙蒸水,實(shí)際上普通蒸餾水經(jīng)玻璃器皿中按標(biāo)準(zhǔn)方法蒸餾二次得到的雙蒸水是不能滿足要求的,而且水中的內(nèi)毒素直接參與細(xì)胞凋亡,血清中內(nèi)毒素含量越低,對細(xì)胞毒性越小,越利于細(xì)胞的生長和傳代;內(nèi)毒素含量過高,會直接導(dǎo)致細(xì)胞提前老化。因此建議配置正式的水純化系統(tǒng)。超凈工作臺/生物安全柜:細(xì)胞培養(yǎng)對無菌環(huán)境要求很高,在細(xì)胞操作時,一般需要在100級空氣質(zhì)量條件下進(jìn)行,因此超凈工作臺或生物安全柜就必須配備。液氮罐:為了保存細(xì)胞,特別是不易獲得的突變型細(xì)胞或細(xì)胞株,要將細(xì)胞凍存。凍存的溫度一般為液氮溫度-196℃,因此,需要液氮罐。在此環(huán)境中,一般細(xì)胞可以保存十年具有活性。超低溫冰箱:細(xì)胞的凍存過程需要一系列程序降溫,一般4℃下存放30min,轉(zhuǎn)放-20℃ 1 hour,再轉(zhuǎn)入-70至-80℃過夜,之后才可以轉(zhuǎn)移到液氮內(nèi)(-196℃),這時就必須配備一臺-86℃超低溫冰箱。一般超低溫冰箱保存細(xì)胞可達(dá)數(shù)月,對于不需要長期凍存的細(xì)胞,可暫時放于超低溫冰箱保存。恒溫水?。簭囊旱虺蜏乇渲腥〕黾?xì)胞凍存管需要立即放于37℃水浴中快速復(fù)蘇之后才傳代培養(yǎng),因此,恒溫水浴也是細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室必備儀器。離心機(jī):細(xì)胞培養(yǎng)需要離心收集傳代細(xì)胞,所以需要配置低速的常溫離心機(jī),對于后期細(xì)胞內(nèi)容物的分離則需要高速冷凍離心機(jī)。移液器和細(xì)胞培養(yǎng)的大量耗材:細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中有大量頻繁的移液操作,因此各種微量移液器、瓶口分配器、移液管控制器是必不可少的。各類細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、移液管等耗材更是不可或缺的,而且一次性,用量極大。除上述儀器外,高壓滅菌鍋、倒置顯微鏡也是細(xì)胞培養(yǎng)的必備儀器,發(fā)酵罐、轉(zhuǎn)瓶機(jī)等也常常見于細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室。 細(xì)胞傳代方法:1:3-1:5傳代;2-3天換液1次。 Walker/LLC-WRC 256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM05384細(xì)胞、Panc8.13細(xì)胞、HCT 8細(xì)胞 U-373-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC 3T3-E1細(xì)胞、WSU-DLCL-2細(xì)胞、PANC0327細(xì)胞 RK13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCLP1細(xì)胞、AMJ2C8細(xì)胞、H-2444細(xì)胞 MOLP2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA231細(xì)胞、Panc2.03細(xì)胞、PTK1細(xì)胞 EOC20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV-434細(xì)胞、AgC11x3A細(xì)胞、Madin-Darby Canine Kidney細(xì)胞 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 MAVER-1 Lymphoblastoid cells人淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞系 細(xì)胞生長特性:懸浮生長 細(xì)胞形態(tài)特性:淋巴母細(xì)胞 常見細(xì)胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細(xì)胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因?yàn)楹窟^低會導(dǎo)致細(xì)胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細(xì)胞生長密度而定,或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進(jìn)行更換;3)購買的復(fù)蘇細(xì)胞,為何會有脫落?因?yàn)檫\(yùn)輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少,大都是因?yàn)殡x心過程操作上的失誤,造成細(xì)胞的物理性損傷,以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細(xì)胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細(xì)胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。 Madison 109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-BL2141細(xì)胞、SK RC 52細(xì)胞、H510細(xì)胞 GC-2spd(ts)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細(xì)胞、TMD8細(xì)胞、SKNBE-1細(xì)胞 L1210細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCA-7細(xì)胞、SVG p12細(xì)胞、TE9細(xì)胞 B104 [Rat neuroblastoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C57/B6-L細(xì)胞、HHL5細(xì)胞、C166細(xì)胞 T/G HA VSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:10T1/2細(xì)胞、AsPC-1細(xì)胞、HARAB細(xì)胞 L428細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 2650細(xì)胞、MCF-7/AdrR細(xì)胞、H82細(xì)胞 C4-2 Bone metastatic細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-82細(xì)胞、SW-527細(xì)胞、NBL-7細(xì)胞 KYSE0030細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hOMF細(xì)胞、P31/Fujioka細(xì)胞、Human Epithelioma-2細(xì)胞 H-378細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW839細(xì)胞、NCI-H87細(xì)胞、Alpha Mouse Liver 12細(xì)胞 GB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 680N細(xì)胞、HL1細(xì)胞、rUCMSCs細(xì)胞 MAVER-1 Lymphoblastoid cells人淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞系 293EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM-3573細(xì)胞、A375-MEL細(xì)胞、Hs-281-T細(xì)胞 PLA802細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CaES-17細(xì)胞、HS-5細(xì)胞、CCD-19Lu細(xì)胞 Karpas 422細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WC00059細(xì)胞、NS-1細(xì)胞、TC7細(xì)胞 Bac12F5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RERF-LCMS細(xì)胞、WEHI 164細(xì)胞、H-28細(xì)胞 KS-SLK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-668細(xì)胞、Mink Lung細(xì)胞、Nthy-ori 3-1細(xì)胞 WIL2S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TGW細(xì)胞、HOC細(xì)胞、SF-539細(xì)胞 L-cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCI-SCC-090細(xì)胞、HCT 116細(xì)胞、Hopkins-92細(xì)胞 JIMT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TFK1細(xì)胞、H-1568細(xì)胞、BJA-B細(xì)胞 FHs74 Int細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRC-99細(xì)胞、Med 283細(xì)胞、LO2細(xì)胞 CAL-62細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:mRMEC細(xì)胞、KYSE180細(xì)胞、HS766T細(xì)胞 C4-2 B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AR41P細(xì)胞、EB-3細(xì)胞、Panc-813細(xì)胞 MC3T3-E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-RC-42細(xì)胞、LNCaP細(xì)胞、FLC7細(xì)胞 B4G12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MUM2B細(xì)胞、PCI:SG231細(xì)胞、Hs-578Bst細(xì)胞 MG63細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1271細(xì)胞、VP 229細(xì)胞、SW 13細(xì)胞 C33A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1770細(xì)胞、HCC2157細(xì)胞、Chinese Hamster Ovary細(xì)胞 LK2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H3396細(xì)胞、PaTu 8988 S細(xì)胞、PC-3M 2B4細(xì)胞 MV-522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 102細(xì)胞、451-LU細(xì)胞、Caki2細(xì)胞 CHO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MT-2細(xì)胞、EVSAT細(xì)胞、HECCL-1細(xì)胞 TC-1 [Mouse lung]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 274細(xì)胞、HuH-28細(xì)胞、NCIH2023細(xì)胞 Hepatoma-22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI.H522細(xì)胞、Colo320細(xì)胞、B-104細(xì)胞 A-427細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D407細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-62細(xì)胞、SL-1細(xì)胞 MDAPCa-2b細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TOV-112D細(xì)胞、U-373MG細(xì)胞、HS-683細(xì)胞 U-226AR1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1417細(xì)胞、U-937細(xì)胞、WML2細(xì)胞 HCC2218細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 819.T細(xì)胞、rHSC-99細(xì)胞、HCC-78細(xì)胞 SBC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-M[TK-]細(xì)胞、RPE1細(xì)胞、WERI Rb-1細(xì)胞 U118-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SV-HUC細(xì)胞、brain-derived Endothelial cells.3細(xì)胞、GH 3細(xì)胞 CCRF/CEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-1細(xì)胞、PL 5細(xì)胞、DHBE細(xì)胞 Kasumi-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1623細(xì)胞、HL-60 Clone 15細(xì)胞、NCI-H1155細(xì)胞 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Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs822T細(xì)胞、SNU-449細(xì)胞、U266 B1細(xì)胞 RenCa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIE 115細(xì)胞、SVOG細(xì)胞、MT-2細(xì)胞 DB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RGB細(xì)胞、NBL-3細(xì)胞、HEL299細(xì)胞 SK-MEL24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IGROV 1細(xì)胞、EFM192B細(xì)胞、COLO-1細(xì)胞 Hs 739.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U138-MG細(xì)胞、HUVSMC細(xì)胞、OVCA 432細(xì)胞 AML-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL 299細(xì)胞、H1672細(xì)胞、CEF細(xì)胞 H-2444細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL85-1細(xì)胞、PA-1細(xì)胞、NCI-H1341細(xì)胞 COLO-320DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H510A細(xì)胞、L-cell細(xì)胞、PK-15細(xì)胞 ME1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE9細(xì)胞、Tb 1 Lu (NBL-12)細(xì)胞、NCI-H2228細(xì)胞 Human Embryo Lung-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1437細(xì)胞、SKNBE(1)細(xì)胞、TKB-1細(xì)胞 MAVER-1 Lymphoblastoid cells人淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞系 ME 180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細(xì)胞、RD 2細(xì)胞、IR 983F細(xì)胞 IEC 18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H865細(xì)胞、DMS273細(xì)胞、RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細(xì)胞 Epithelioma Papulosum Cyprini細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EOMA細(xì)胞、Caco-2/BBe 1細(xì)胞、AR41P細(xì)胞 L-1210細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Cattle chondrocytes細(xì)胞、MALME 3M細(xì)胞、MOLT.4細(xì)胞 "
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