"BDCM Lymphoblastoid cells急性髓系細(xì)胞白血病細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹 細(xì)胞形態(tài):淋巴母細(xì)胞樣 細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項(xiàng):1.取細(xì)胞的過程中注意帶好防凍手套,護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要,細(xì)胞凍存管可能漏入液氮,解凍時(shí)凍存管中的氣溫急劇上升,可導(dǎo)致爆炸。2.凍存液的問題:凍存液的配置已是常識(shí),在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對(duì)細(xì)胞不是完全無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對(duì)細(xì)胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢,會(huì)造成細(xì)胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對(duì)細(xì)胞的損傷。4.離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng),第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個(gè),去除DMSO,去除死細(xì)胞,這個(gè)是標(biāo)準(zhǔn)流程,但對(duì)一般人來說,把握不好離心轉(zhuǎn)速和時(shí)間,轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少,細(xì)胞就全被扔掉了,轉(zhuǎn)過了活細(xì)胞會(huì)受壓過大,死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對(duì)細(xì)胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇,結(jié)果無異常。5.細(xì)胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細(xì)胞解凍時(shí)1ml細(xì)胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。6.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問題:試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇1管細(xì)胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細(xì)胞濃度過低,不利于細(xì)胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問題:這個(gè)量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會(huì)比較大,就會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng),從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時(shí)候?qū)σ话慵?xì)胞沒有什么影響,還有一個(gè)說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。 COLO320-DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuO9細(xì)胞、RBMEC細(xì)胞、Cloudman S91 melanoma clone M-3細(xì)胞 FT-293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B104 [Rat neuroblastoma]細(xì)胞、ARH-77細(xì)胞、NPA87-1細(xì)胞 A549/ATCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DU-4475細(xì)胞、ReNcell CX細(xì)胞、CCD-841CoTr細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng):懸浮 BDCM Lymphoblastoid cells急性髓系細(xì)胞白血病細(xì)胞系 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞復(fù)蘇基本方法:1.從液氮罐中取出安剖;有時(shí)因安剖未封嚴(yán),浸入了液氮,取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸,因此應(yīng)帶有防護(hù)眼睛和手套。2.迅速放入盛有36℃~37℃水的搪瓷罐中,扣上蓋并不時(shí)搖動(dòng),盡快解凍。3.剪開紗布口袋,取出安剖,用70%酒精擦拭消毒后,凈化臺(tái)上打開蓋,用吸管吸出細(xì)胞懸液,裝入離心管中,再補(bǔ)加10ml培養(yǎng)液,吹打使細(xì)胞懸浮。4.低速離心(500~1000轉(zhuǎn)/分)5分鐘,取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。5.加入培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后,再移裝入培養(yǎng)瓶中,置溫箱培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T25 flask細(xì)胞時(shí),處理方式為:在寄送過程中,為避免起泡造成細(xì)胞脫落死亡,T25 flask均加滿培養(yǎng)基。請(qǐng)檢查flask外觀,并于顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀況和有無污染現(xiàn)象,若有任何問題,不要打開蓋子,請(qǐng)立即通知細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室。將原封之T25 flask靜置于37°C,5%CO2培養(yǎng)箱中,使細(xì)胞回溫至37°C,并讓運(yùn)送過程中少數(shù)脫落的細(xì)胞可再附著生長(zhǎng)。隔天后,于無菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用),僅留約5-10ml培養(yǎng)基于flask內(nèi),依一般培養(yǎng)方式再將細(xì)胞置入培養(yǎng)箱中,或細(xì)胞已長(zhǎng)滿盤,則將細(xì)胞做傳代培養(yǎng)。 細(xì)胞傳代方法:每周2-3次。 174xCEM.T2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H446細(xì)胞、GA10細(xì)胞、H-460細(xì)胞 HBZY 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS-MNNG細(xì)胞、HEK-293F細(xì)胞、REC1細(xì)胞 T8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lu-65細(xì)胞、SK-SH-SY5Y細(xì)胞、RCC23細(xì)胞 CAL 12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PTK2細(xì)胞、HO8910/PM細(xì)胞、IPLB-SF 21細(xì)胞 Mino細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EoL-1-cell細(xì)胞、LM6細(xì)胞、RPMI.8226細(xì)胞 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 BDCM Lymphoblastoid cells急性髓系細(xì)胞白血病細(xì)胞系 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:懸浮生長(zhǎng) 細(xì)胞形態(tài)特性:淋巴母細(xì)胞 培養(yǎng)細(xì)胞真的不難,最關(guān)鍵幾點(diǎn):1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的,真的很難相信你會(huì)把細(xì)胞養(yǎng)壞;2)動(dòng)作要快,胰酶消化,換液什么,細(xì)胞暴露在空氣中的時(shí)間越少越好。另外,要掌握好胰酶消化時(shí)間,所謂的細(xì)胞狀態(tài)差,很多時(shí)候是傳代的原因;3)有時(shí)間的話,需要細(xì)胞計(jì)數(shù),傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線,不會(huì)臨時(shí)要處理,手足無措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時(shí)間,傳代細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)穿插進(jìn)行,可以節(jié)省很多時(shí)間,也不會(huì)耽誤別人的實(shí)驗(yàn);5)個(gè)人的實(shí)驗(yàn)器具自己收一套,不要和別人混用,最近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人,避免相互干擾。每天對(duì)待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)有哪些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)可以分享呢?1)嚴(yán)格無菌操作,多噴噴酒精,要是對(duì)滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準(zhǔn)備一套;3)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時(shí)候做好支原體衣原體檢測(cè);4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動(dòng)加濕的話盤里的水也會(huì)很臟,勤換(滅菌水加進(jìn)去);5)晚上離開的時(shí)候給傳代細(xì)胞照紫外,超凈臺(tái)是用完就開;6)是同一時(shí)間就你一個(gè)人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。 SUP-B1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 7951細(xì)胞、Hep-G2細(xì)胞、SKLMS1細(xì)胞 Eca-109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL1細(xì)胞、F-36P細(xì)胞、HCMEC(BL12-H)細(xì)胞 OC-316細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ZR75_1細(xì)胞、HT-115細(xì)胞、alpha-TC1.6細(xì)胞 Hs-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNBE2細(xì)胞、NTERA2-D1細(xì)胞、SNU5細(xì)胞 WC00097細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0202細(xì)胞、MFE-296細(xì)胞、SEM細(xì)胞 NIH-OVCAR-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:251 MG細(xì)胞、Mono-Mac-6細(xì)胞、High-5細(xì)胞 PANC.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293T/17細(xì)胞、Kupffer細(xì)胞、SCC 9細(xì)胞 MCF-12A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LSC-1細(xì)胞、SKHEP-1細(xì)胞、EB-2細(xì)胞 SUIT 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:K562/ADR細(xì)胞、P-3J細(xì)胞、SUDHL5細(xì)胞 LN229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 870.T細(xì)胞、H647ell細(xì)胞、Swiss3T3細(xì)胞 BDCM Lymphoblastoid cells急性髓系細(xì)胞白血病細(xì)胞系 SACC83細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BMSCs(mBMSCs)細(xì)胞、MLMA細(xì)胞、SF17細(xì)胞 H2342細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HGE細(xì)胞、3AA細(xì)胞、MC 3T3-E1細(xì)胞 VP303細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Huh-7細(xì)胞、COLO 205細(xì)胞、MOLP-8細(xì)胞 JHH2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS 153細(xì)胞、KCL22細(xì)胞、675T細(xì)胞 S91細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFM192細(xì)胞、Walker-256細(xì)胞、MDAMB134細(xì)胞 IOSE29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C32r細(xì)胞、SCC7細(xì)胞、CORL26細(xì)胞 IOSE29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C32r細(xì)胞、SCC7細(xì)胞、CORL26細(xì)胞 CAMA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 51細(xì)胞、TSU-Pr1細(xì)胞、H929細(xì)胞 OCI Ly3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tokyo Medical and Dental university 8細(xì)胞、MDAMB436細(xì)胞、CESS細(xì)胞 NCIH2023細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP 100細(xì)胞、COLO 206細(xì)胞、Glioma-261細(xì)胞 H-735細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P30/Ohkubo細(xì)胞、LS 1034細(xì)胞、IPAM-WT細(xì)胞 MSB-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI3細(xì)胞、MC57細(xì)胞、NBL-5細(xì)胞 MHCC97H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Melanoma 14細(xì)胞、M-O7e細(xì)胞、H2030細(xì)胞 WM-451Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-453細(xì)胞、H-1666細(xì)胞、LN-18細(xì)胞 PANC.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293T/17細(xì)胞、Kupffer細(xì)胞、SCC 9細(xì)胞 H1395細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MIO-M1細(xì)胞、Hs840_T細(xì)胞、Caco2BBe細(xì)胞 Hopkins-92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKBr3細(xì)胞、H1650細(xì)胞、Panc 4.03細(xì)胞 KYSE-520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bx-PC3細(xì)胞、S180細(xì)胞、H35細(xì)胞 WERI-Rb-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HDLM-2細(xì)胞、RT112細(xì)胞、UM-UC-1細(xì)胞 Hs 839.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H661細(xì)胞、HEK 293細(xì)胞、HEK293-A細(xì)胞 MCF-7ADR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker-Ca.256細(xì)胞、KASUMI1細(xì)胞、EJ 138細(xì)胞 WIL2S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TGW細(xì)胞、HOC細(xì)胞、SF-539細(xì)胞 U251-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Leukemia L1210細(xì)胞、DMS-153細(xì)胞、CCD33Co細(xì)胞 C41細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293-A細(xì)胞、C2A細(xì)胞、EMT6細(xì)胞 huH 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lewis lung carcinoma細(xì)胞、D283 Med細(xì)胞、343MG細(xì)胞 HOPC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UACC-893細(xì)胞、Normal Rat Kidney細(xì)胞、H209細(xì)胞 H4IIE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1975細(xì)胞、M109細(xì)胞、C4I細(xì)胞 Tohoku Hospital Pediatrics-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2107細(xì)胞、NCI-H1581細(xì)胞、NFS-60細(xì)胞 GM-346細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVHM細(xì)胞、KM H-2細(xì)胞、NBLS細(xì)胞 TKB-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Embryo Lung-1細(xì)胞、AMC-HN-8細(xì)胞、KYSE270細(xì)胞 P3JHR-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SV40-MES13細(xì)胞、NCI-H920細(xì)胞、SKNBE細(xì)胞 SK MEL-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mv 1 Lu細(xì)胞、SK-ChA1細(xì)胞、RGCs細(xì)胞 Karpas-422細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colon 38細(xì)胞、T.T細(xì)胞、Caco-2/ATCC細(xì)胞 BMSC/hBMSCs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-398細(xì)胞、H-820細(xì)胞、251MG細(xì)胞 NCI-H838細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hTERT-RPE-1細(xì)胞、R1610細(xì)胞、Okayama University Medical School-23細(xì)胞 MCF12A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EST50細(xì)胞、NCI-SNU-C2B細(xì)胞、GC-2細(xì)胞 MLO-Y4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HELF細(xì)胞、Hs 832(C).T細(xì)胞、Jiyoye (P-2003)細(xì)胞 DC 2.4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:526細(xì)胞、HFLS-OA細(xì)胞、NBL-S細(xì)胞 CO115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK.MEL.5細(xì)胞、PECAPJ34細(xì)胞、MADB-106細(xì)胞 AN3-CA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA-SO-M20細(xì)胞、GM16136細(xì)胞、SNK-1細(xì)胞 MOLP-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 742.T細(xì)胞、HSC-4細(xì)胞、SNU475細(xì)胞 Lu-165細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEY A8細(xì)胞、HuO9細(xì)胞、HCC 70細(xì)胞 Neuro2a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DKMG細(xì)胞、IPAM-WT細(xì)胞、H-1651細(xì)胞 NCI-H1623細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 320HSR細(xì)胞、HHUA細(xì)胞、ST486細(xì)胞 SK-MEL-31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO cell clone K1細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-39細(xì)胞、PC 61.5.3細(xì)胞 H-1417細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CFPAC1細(xì)胞、NCIH1581細(xì)胞、KOSC-2 cl3-43細(xì)胞 Mo 59J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GA-10 clone 4細(xì)胞、HuTu 80細(xì)胞、Ca759細(xì)胞 H-1693細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3 LL細(xì)胞、Hs 274細(xì)胞、IHH4細(xì)胞 LuCL4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CD 18細(xì)胞、BC-025細(xì)胞、Baby Hamster Kidney 21細(xì)胞 NCIH1299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1650_CO細(xì)胞、JS1細(xì)胞、Swiss 3T6細(xì)胞 Hs737T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KLN 205細(xì)胞、MDAMB468細(xì)胞、HA細(xì)胞 BDCM Lymphoblastoid cells急性髓系細(xì)胞白血病細(xì)胞系 HT1376細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RH30SJ細(xì)胞、RL-65細(xì)胞、NK62a細(xì)胞 BE(2)M-17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63 AG8-653細(xì)胞、Walker/LLC-WRC256細(xì)胞、M-O7e細(xì)胞 RS4:11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-3/M細(xì)胞、Becker細(xì)胞、LC-2-Ad細(xì)胞 OC-316細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ZR75_1細(xì)胞、BALL-1細(xì)胞、CORL105細(xì)胞 "
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