"NFS-60 Lymphoblastoid cellsG-CSF依賴性小鼠白血病細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣
貼壁消化難題：１，先用PBS 把細胞洗兩遍，使瓶內(nèi)沒有血清了，減少對胰酶的中和，然后用新配的０.２５%的胰酶加入３ml左右，放在３７度，然后可以在細胞有些消化下來時，拿著瓶口，運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體，這樣細胞很快就下來了，還不需要吹打，分散也均勻；２，成團、絮狀：消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象，血清可以終止胰酶的作用，如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉，也可以不倒，直接加血清終止，如果消化液中加入了edta的話，就要將消化液倒干凈，如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話，一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強，用０.５%胰酶(含０.１%EDTA)一般要消化１２~１５min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基，加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢)，隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗，則不能棄去胰酶)，加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代，否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片)；消化過度：馬上用培養(yǎng)基中和，用吸管吹打細胞，收集全部的細胞到以無菌的離心管中８００RPM ３分鐘。棄上清，用全培重懸，換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)，狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落，在換液的時候可以清除掉！
CESS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM-19細胞、B16 melanoma細胞、CaSki細胞
HuT-102細胞系相關(guān)產(chǎn)品：102PT細胞、SK-UT-1細胞、P3-X63Ag8細胞
VSC4.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCH-1細胞、KE-37細胞、118 MG細胞
細胞生長：懸浮
NFS-60 Lymphoblastoid cellsG-CSF依賴性小鼠白血病細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細胞時，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細胞和你一樣，消化下來也是一團的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細胞生長挺快，那么細胞的增殖能力應(yīng)該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能：一、細胞消化后吹打不均勻，造成細胞成團生長：二、細胞細化太過，細胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細胞聚團生長。解決辦法：根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化，將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴重的時候甚至?xí)斐杉毎劳?。我談?wù)剛€人經(jīng)驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細胞處理時間可適當(dāng)放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細胞傳代方法：１：３傳代
DoTc2-4510細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MS-751細胞、RPMI no. 8226細胞、SG231細胞
HONE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T2 (174 x CEM.T2)細胞、TR-146細胞、Rin-M-5F細胞
OCI/AML-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EC-GI-10細胞、253J-Bladder-V細胞、MHCC97-H細胞
Tu 177細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KP-4細胞、NCI-SNU-1細胞、H-82細胞
SACCLM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293細胞、HCT/Taxo1細胞、Det. 562細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
NFS-60 Lymphoblastoid cellsG-CSF依賴性小鼠白血病細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣
細胞接收后的操作流程與注意事項：１)如果細胞為貼壁細胞，而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài)，請將懸浮的細胞即時離心，加１５%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)３天；同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為１５%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)３天。３天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡，請及時聯(lián)系實驗室技術(shù)人員會跟進解決；２)貼壁細胞生長緩慢；適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過２０%)，或可根據(jù)該細胞生長密度，考慮胰酶消化后，轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)；３)生長不均：貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均，成島狀生長，可將細胞進行消化，重懸打散細胞，加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。
RIN Cl-5F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNB19細胞、HCC9204細胞、GM15452細胞
EC-GI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV-3細胞、PK13細胞、293-GP細胞
CEM C7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPC-TW 039細胞、A2008細胞、BeWo細胞
NSC-34細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMK細胞、FRhK-4細胞、SKRC 39細胞
A498細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-196細胞、C2-C12細胞、OSC19細胞
NIH:OVCAR4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ly8細胞、CHL-1細胞、DK-MG細胞
SK-N-SH細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細胞、DMS-79細胞、STC-1細胞
HIBEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-BL1339細胞、DOK細胞、NG-108-15細胞
F442A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TO 175.T細胞、H23細胞、SN12-PM6細胞
MC-CAR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NSH細胞、SKLU1細胞、BE2M17細胞
NFS-60 Lymphoblastoid cellsG-CSF依賴性小鼠白血病細胞系
NCI-H2172細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pt K1細胞、NPC-TW 039細胞、Detroit 562細胞
HeLa S-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa 229細胞、RFL 6細胞、Factor Dependent Cell-Paterson 1細胞
SNU-423細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNE-2細胞、SRA01/04 (HLE)細胞、CTLA4 Ig-24細胞
COLO-680N細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293FT細胞、KP 4細胞、HGSMC細胞
MiaPaCa-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TW-039細胞、FET細胞、Potorous tridactylus Kidney 1細胞
CaES-17細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA453細胞、MNNGHOS細胞、H211細胞
CaES-17細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA453細胞、MNNGHOS細胞、H211細胞
CCD19Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kasumi-1細胞、McA-RH7777細胞、Kit-225細胞
TE353.SK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calu-3細胞、P3/NSI/1-AG4-1細胞、BC-021細胞
CWR22R細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EAhy926細胞、A72細胞、SK_N_BE2C細胞
HFL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3細胞、COLO-684細胞、SKO-007細胞
H-774細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00637細胞、SKNBE細胞、GB-1細胞
NCIH2107細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H295R細胞、CD-18細胞、Hs 822.T細胞
HUASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HC11細胞、SKLU01細胞、hTERT-HME1細胞
hFOB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H.Ep. No. 2細胞、NCI-446細胞、COV 504細胞
EJ-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Functional Liver Cell-7細胞、FHCRC subclone 11細胞、Cor L88細胞
Pt K1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ly18細胞、PZ-HPV-7細胞、H2452細胞
RPMI8226/S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFL-1細胞、SMA-560細胞、BEL7404細胞
WM451Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS 1.Tes細胞、U-138 MG細胞、NK10a細胞
P30-OHKUBO細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BALB/3T3 (clone A31)細胞、SW13細胞、Renal Carcinoma細胞
HT(H9)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat E6-1細胞、PLA-801C細胞、CG-4細胞
NCIH2126細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM05862細胞、H1954細胞、HS-766T細胞
H-522細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293-F細胞、HTR8/SVneo細胞、H-1703細胞
GDM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat-FHCRC細胞、WPMY-1細胞、MKN-1細胞
TO175T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT167細胞、U-343 MG細胞、LM TK negative細胞
A549/ATCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DU-4475細胞、ReNcell CX細胞、CCD-841CoTr細胞
EFM-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMES細胞、RD-ES細胞、HT-115細胞
Swiss 3T6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM02219D細胞、C3H/10T1/2-clone8細胞、KM-12細胞
BetaTC6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH-OVCAR-3細胞、Hs895.T細胞、A-172細胞
PANC-10-05細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-878細胞、TGBC11TKB細胞、B16 BL6細胞
RPMI7951細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE(2)-C細胞、HT144細胞、TGW-nu細胞
MAntle cell VERona-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CORL88細胞、PASMCS細胞、Tu686細胞
Hs739T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly 7細胞、B-cell with DC Morphology細胞、H-2171細胞
SK-N-BE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ROS 17/2.8細胞、CCD841CoN細胞、KYSE-410細胞
Hs940-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2228細胞、SNU-886細胞、DMS 79細胞
Calf Pulmonary Artery Endothelial細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GTL16細胞、T47-D細胞、MDA-468細胞
TE8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RASMC細胞、NKM-1細胞、PLA-801D細胞
NCI-H358細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI Ly3細胞、3T3F442A細胞、WPMY1細胞
BeWo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL-5細胞、TE-3A細胞、UM-UC-3細胞
ME16C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H250細胞、Hs-611-T細胞、3T3J2細胞
NCI-HUT-125細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos.2G6.4C10細胞、Jurkat E6細胞、C33細胞
BE(2)-M17細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-774細胞、A2780細胞、beta-TC6細胞
LA 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T/G HA-VSMC細胞、Fao細胞、BC3H-1細胞
OCI-AML5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JURKAT E-6.1細胞、HCe-8693細胞、GM07404A細胞
LTEP a2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63 AG 8.653細胞、870細胞、Malme-3 M細胞
LNCaP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y79細胞、CCK81細胞、PE/CA-PJ34細胞
COLO-741細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAF2細胞、Swiss/3T3細胞、MDA-435細胞
NCI-Hut 125細胞系相關(guān)產(chǎn)品：R1800[RA]細胞、NMCG-1細胞、Strain V細胞
rRTEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H596細胞、NCI-H1105細胞、MCF7ADR細胞
HDQ-P1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT.116細胞、A-673細胞、HIEC細胞
MDA-MB-468-RED細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM346細胞、Medical Research Council cell strain-5細胞、Me Wo細胞
NFS-60 Lymphoblastoid cellsG-CSF依賴性小鼠白血病細胞系
HEK 293 c18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBEpiC細胞、OVCAR 420細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細胞
HS-294細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KPL-4細胞、NCI-H2009細胞、Porcine Kidney-15細胞
BL1339細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L363細胞、PATU-S細胞、UM-RC-2細胞
CEM C7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPC-TW 039細胞、MDCKII-WT細胞、COLO-679細胞
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