"CA46 Lymphoblastoid cells人burkitt淋巴瘤細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:該細(xì)胞源自Burkitt's淋巴瘤患者的B淋巴細(xì)胞,EBNA、Fc陰性。 細(xì)胞形態(tài):淋巴母細(xì)胞樣 細(xì)胞傳代培養(yǎng)實驗:體外培養(yǎng)的原代細(xì)胞或細(xì)胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細(xì)胞株或得到大量的同種細(xì)胞,并維持細(xì)胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細(xì)胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細(xì)胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進(jìn)行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細(xì)胞“一代”指從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細(xì)胞世代或倍增不同。在一代中,細(xì)胞培增3~6次。細(xì)胞傳代后,一般經(jīng)過三個階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細(xì)胞分裂指數(shù)表示細(xì)胞增殖的旺盛程度,即細(xì)胞群的分裂相數(shù)/100個細(xì)胞。一般細(xì)胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細(xì)胞可達(dá)3~5%;細(xì)胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時期,稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期),適宜進(jìn)行各種試驗。實驗步驟:1.將長成的培養(yǎng)細(xì)胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細(xì)胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細(xì)胞,如果細(xì)胞變圓,相互之間不再連接成片,這時應(yīng)立即在超凈臺中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細(xì)胞懸液。3.將細(xì)胞懸液吸出2ml左右,加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細(xì)胞在2小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶內(nèi)形成單層,需要再次進(jìn)行傳代。 IMR-32細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BpRcl細(xì)胞、SKNF1細(xì)胞、Hs729T細(xì)胞 U-226AR1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1417細(xì)胞、U-937細(xì)胞、WML2細(xì)胞 H-378細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW839細(xì)胞、NCI-H87細(xì)胞、Alpha Mouse Liver 12細(xì)胞 細(xì)胞生長:懸浮 CA46 Lymphoblastoid cells人burkitt淋巴瘤細(xì)胞系 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞學(xué)在生命科學(xué)科中起著至關(guān)重要的作用,近年來細(xì)胞學(xué)蓬勃發(fā)展,并取得了重大的進(jìn)展,細(xì)胞實驗室的構(gòu)建也是各個院校生物學(xué)科必備的實驗室。細(xì)胞實驗謹(jǐn)慎復(fù)雜,需要的實驗設(shè)備種類繁多,下面就一些動物細(xì)胞實驗室必備儀器進(jìn)行簡單介紹:CO2培養(yǎng)箱是細(xì)胞培養(yǎng)的必備儀器,它為細(xì)胞提供了一個體外培養(yǎng)的舒適環(huán)境,如適宜的溫度、濕度、酸堿度、O2濃度等。細(xì)胞在體外培養(yǎng)時很容易受到各種細(xì)菌、微生物的感染,因此,CO2培養(yǎng)箱的滅菌和抑菌能力就顯得尤為重要。純水系統(tǒng):細(xì)胞培養(yǎng)用水一般要求雙蒸水,實際上普通蒸餾水經(jīng)玻璃器皿中按標(biāo)準(zhǔn)方法蒸餾二次得到的雙蒸水是不能滿足要求的,而且水中的內(nèi)毒素直接參與細(xì)胞凋亡,血清中內(nèi)毒素含量越低,對細(xì)胞毒性越小,越利于細(xì)胞的生長和傳代;內(nèi)毒素含量過高,會直接導(dǎo)致細(xì)胞提前老化。因此建議配置正式的水純化系統(tǒng)。超凈工作臺/生物安全柜:細(xì)胞培養(yǎng)對無菌環(huán)境要求很高,在細(xì)胞操作時,一般需要在100級空氣質(zhì)量條件下進(jìn)行,因此超凈工作臺或生物安全柜就必須配備。液氮罐:為了保存細(xì)胞,特別是不易獲得的突變型細(xì)胞或細(xì)胞株,要將細(xì)胞凍存。凍存的溫度一般為液氮溫度-196℃,因此,需要液氮罐。在此環(huán)境中,一般細(xì)胞可以保存十年具有活性。超低溫冰箱:細(xì)胞的凍存過程需要一系列程序降溫,一般4℃下存放30min,轉(zhuǎn)放-20℃ 1 hour,再轉(zhuǎn)入-70至-80℃過夜,之后才可以轉(zhuǎn)移到液氮內(nèi)(-196℃),這時就必須配備一臺-86℃超低溫冰箱。一般超低溫冰箱保存細(xì)胞可達(dá)數(shù)月,對于不需要長期凍存的細(xì)胞,可暫時放于超低溫冰箱保存。恒溫水?。簭囊旱虺蜏乇渲腥〕黾?xì)胞凍存管需要立即放于37℃水浴中快速復(fù)蘇之后才傳代培養(yǎng),因此,恒溫水浴也是細(xì)胞實驗室必備儀器。離心機(jī):細(xì)胞培養(yǎng)需要離心收集傳代細(xì)胞,所以需要配置低速的常溫離心機(jī),對于后期細(xì)胞內(nèi)容物的分離則需要高速冷凍離心機(jī)。移液器和細(xì)胞培養(yǎng)的大量耗材:細(xì)胞實驗中有大量頻繁的移液操作,因此各種微量移液器、瓶口分配器、移液管控制器是必不可少的。各類細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、移液管等耗材更是不可或缺的,而且一次性,用量極大。除上述儀器外,高壓滅菌鍋、倒置顯微鏡也是細(xì)胞培養(yǎng)的必備儀器,發(fā)酵罐、轉(zhuǎn)瓶機(jī)等也常常見于細(xì)胞培養(yǎng)實驗室。 細(xì)胞傳代方法:1:2傳代 TGBC11TKB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2085細(xì)胞、NCTC-3960細(xì)胞、OVCAR-433細(xì)胞 343MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fox/NY細(xì)胞、ECC-12細(xì)胞、BCP-1細(xì)胞 SK-N-BE(2)-C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS (TE85)細(xì)胞、HCC 2185細(xì)胞、PL9細(xì)胞 H-1650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPLB-SF 21細(xì)胞、DAKIKI Clone 1細(xì)胞、U 266細(xì)胞 HCV29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GS9L細(xì)胞、HCC-1171細(xì)胞、WEHI 164細(xì)胞 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 CA46 Lymphoblastoid cells人burkitt淋巴瘤細(xì)胞系 細(xì)胞生長特性:懸浮生長 細(xì)胞形態(tài)特性:淋巴母細(xì)胞樣 細(xì)胞凍存的步驟:1)選擇處于對數(shù)生長期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細(xì)胞類型來選擇;3)將分裝上述細(xì)胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細(xì)胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。 WM2664細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-172 MG細(xì)胞、P3J HR1-K細(xì)胞、KYSE 50細(xì)胞 SCL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNCL-2細(xì)胞、LNCaP subline C4-2細(xì)胞、PIG3細(xì)胞 P-388細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ACC-3細(xì)胞、SKNBE2細(xì)胞、HLF細(xì)胞 TE 354.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NFHIOSE-80細(xì)胞、EB-1細(xì)胞、RPMI 7951細(xì)胞 KCL22S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細(xì)胞、SHG-44細(xì)胞、SK UT 1細(xì)胞 H2330細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MeT-5A細(xì)胞、OEC19細(xì)胞、hTERTHME1細(xì)胞 NBL-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI no. 8226細(xì)胞、PL-12細(xì)胞、32D clone 3細(xì)胞 NCI-SNU-475細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC-02-03細(xì)胞、Madison細(xì)胞、BHP-10細(xì)胞 RPMI8402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-33 A細(xì)胞、MDCC MSB1細(xì)胞、Rat 1細(xì)胞 HGE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs343T細(xì)胞、ECGI10細(xì)胞、A-2058細(xì)胞 CA46 Lymphoblastoid cells人burkitt淋巴瘤細(xì)胞系 Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep-3B細(xì)胞、KM12 SM細(xì)胞、HEK293E細(xì)胞 C3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TCC-SUP細(xì)胞、GAK細(xì)胞、CII細(xì)胞 MOLP-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H157細(xì)胞、H-510A細(xì)胞、HCC-2935細(xì)胞 P3/X63/Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-5細(xì)胞、CTLL2細(xì)胞、CD18/HPAF細(xì)胞 BT 20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-HUT-460細(xì)胞、NE-4C細(xì)胞、NCI-H2122細(xì)胞 FRO81-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIN-m細(xì)胞、SW1088細(xì)胞、NCI-H196細(xì)胞 FRO81-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIN-m細(xì)胞、SW1088細(xì)胞、NCI-H196細(xì)胞 M-NFS-60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ACC-2細(xì)胞、EOL1細(xì)胞、Caco-2 BBe細(xì)胞 Th17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MIN-6細(xì)胞、SHIN3細(xì)胞、Eph4 1424細(xì)胞 DLD 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-3細(xì)胞、MCF-12A細(xì)胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2細(xì)胞 293 Ad5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MO59J細(xì)胞、639V細(xì)胞、NCIADR.RES細(xì)胞 TFK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PNT1A細(xì)胞、MES-SA-Dx5細(xì)胞、MDA PCa 2b細(xì)胞 293E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:INS-1E細(xì)胞、LS 174 T細(xì)胞、SHP77細(xì)胞 Hs940-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2228細(xì)胞、SNU-886細(xì)胞、DMS 79細(xì)胞 CPAE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OSRC2細(xì)胞、LS411細(xì)胞、SW48細(xì)胞 NT2D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GAK細(xì)胞、NL20SV細(xì)胞、D10細(xì)胞 OLN93細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Medical Research Council cell strain-5細(xì)胞、Panc 02.03細(xì)胞、SCC 15細(xì)胞 MPC-83細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL9細(xì)胞、MC 116細(xì)胞、H1355細(xì)胞 Panc 02.03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HES [Human embryonic skin fibroblast]細(xì)胞、VK2/E6E7細(xì)胞、CCD-841CoN細(xì)胞 DHL8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat Chondrosarcoma Swarm細(xì)胞、Hu-P-T4細(xì)胞、SBC5細(xì)胞 Jiyoye (P-2003)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1299細(xì)胞、COS1細(xì)胞、HMCB細(xì)胞 Reuber-H-35 hepatoma細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1588細(xì)胞、MPC5細(xì)胞、SW-527細(xì)胞 WEHI3B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OS-732細(xì)胞、HepG2/C3A細(xì)胞、Madison細(xì)胞 NCI-SNU-407細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAMA1細(xì)胞、UC-3細(xì)胞、H-2009細(xì)胞 MAVER細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuH 6細(xì)胞、FL-83B細(xì)胞、P3.NS-1/1.Ag4.1細(xì)胞 HuT-78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLC-PK1細(xì)胞、University of Arizona Cell Culture-812細(xì)胞、LS-513細(xì)胞 CAL 78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-387細(xì)胞、U138-MG細(xì)胞、MB49細(xì)胞 H-1838細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SVG p12細(xì)胞、H1734細(xì)胞、WM-239A細(xì)胞 SF-539 BT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL1細(xì)胞、Liver-02細(xì)胞、RMC細(xì)胞 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