"RA-FLSs fibroblast cells類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎成纖維樣滑膜細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：關(guān)節(jié)；成纖維細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣
貼壁細(xì)胞消化傳代時通常采用兩種方法：一、加入胰酶等細(xì)胞脫落后，再加培養(yǎng)基中止胰酶作用，離心傳代；二、加入胰酶后，鏡下觀察待細(xì)胞始脫落時，棄胰酶，加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩，而后者有可能對細(xì)胞施加胰酶選擇，因為總是貼壁不牢的細(xì)胞先脫落，對腫瘤細(xì)胞來說，這部分細(xì)胞有可能是惡性程度較高的細(xì)胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，棄之，再加入適量胰酶作用１０s-４０s(根據(jù)細(xì)胞消化的難易程度)，棄之，這樣依賴殘余的胰酶就可將細(xì)胞消化單細(xì)胞。對于較難消化的細(xì)胞，可以用２%利多卡因消化５-８分鐘，然后再棄去，加培養(yǎng)基吹打也可以，對細(xì)胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點，直接加酶消化應(yīng)該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后，用０.０４%的EDTA沖洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室溫孵育５min，棄取大部分EDTA，加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積１/１０v。消化到有細(xì)胞脫落。不過有人說EDTA對細(xì)胞不好，有證據(jù)嗎？培養(yǎng)的BASMC：倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶約６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和，并分瓶這種方法簡單、省事；效果很好并且不損失細(xì)胞！
OVCA-432細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRC-5細(xì)胞、NCI-H209細(xì)胞、SCC90細(xì)胞
MDA-MB468細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA MB 453細(xì)胞、A375S2細(xì)胞、U-343MG細(xì)胞
ME1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE9細(xì)胞、Tb 1 Lu (NBL-12)細(xì)胞、NCI-H2228細(xì)胞
細(xì)胞生長：貼壁
RA-FLSs fibroblast cells類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎成纖維樣滑膜細(xì)胞系
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
為了防止因污染或技術(shù)原因使長期培養(yǎng)功虧一簣，考慮到培養(yǎng)細(xì)胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異，有時因寄贈、交換和購買，培養(yǎng)細(xì)胞從一個實驗室轉(zhuǎn)運(yùn)到另一個實驗室，的策略是進(jìn)行低溫保存。這對于維持一些特殊細(xì)胞株的遺傳特性極為重要?，F(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-７０℃~-１９６℃)的特點。細(xì)胞深低溫保存的基本原理是：在-７０℃以下時，細(xì)胞內(nèi)的酶活性均己停止，即代謝處于完全停止?fàn)顟B(tài)，故可以長期保存。細(xì)胞低溫保存的關(guān)鍵，在于通過０~２０℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi)，水晶呈針狀，極易招致細(xì)胞的嚴(yán)重?fù)p傷。凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：凍存細(xì)胞較脆弱，要輕柔操作。凍存細(xì)胞要快速融化，并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細(xì)胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感，離心去除凍存培養(yǎng)基，然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法：取出貯存細(xì)胞，３７℃水浴中快速融化；直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細(xì)胞。１ml凍存細(xì)胞使用１０~２０ml完全生長培養(yǎng)基。進(jìn)行活細(xì)胞計數(shù)，細(xì)胞接種應(yīng)該至少在３×１０(５)活細(xì)胞/ml；培養(yǎng)細(xì)胞１２到２４小時，更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基，去除凍存劑。離心方法：取出貯存細(xì)胞，３７℃水浴中快速融化；把１到２ml凍存細(xì)胞加入到大約２５ml完全生長培養(yǎng)基，輕輕混勻；以大約８０x離心２到３分鐘；棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細(xì)胞，并且進(jìn)行活細(xì)胞計數(shù)。細(xì)胞鋪板，細(xì)胞接種應(yīng)該至少為３×１０(５)活細(xì)胞/ml。細(xì)胞的分化：一個成年人全身細(xì)胞總數(shù)約１０１２個，可以區(qū)分為２００多種不同類型的細(xì)胞：形態(tài)結(jié)構(gòu)，代謝，行為，功能等各不相同。追根溯源，這么多種細(xì)胞均來自一個受精卵細(xì)胞。所以，通常把發(fā)育過程中，細(xì)胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過程稱為細(xì)胞分化。細(xì)胞分化發(fā)生在胚胎階段，也發(fā)生在胎兒出生以后，乃至成人階段。例如，人體血細(xì)胞的產(chǎn)生和分化，這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細(xì)胞，轉(zhuǎn)入分化，通常從細(xì)胞周期中G１期開始時一個確定的點G０點“逃逸”出細(xì)胞周期。旺盛生長分裂的細(xì)胞和各種分化了的細(xì)胞，它們的基因表達(dá)和代謝活動各不相同。
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
OC316細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO320HSR細(xì)胞、WEHI-279細(xì)胞、Human Embryo Kidney-2細(xì)胞
C-4-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Capan2細(xì)胞、beta-TC6細(xì)胞、Jijoye細(xì)胞
BNL-CL.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NW-MEL-38細(xì)胞、HSF細(xì)胞、P31-FUJ細(xì)胞
HR-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293F細(xì)胞、Walker-256-TC細(xì)胞、SNU638細(xì)胞
MDA-435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GA-10 (Clone 4)細(xì)胞、SK-RC-20細(xì)胞、F-36P細(xì)胞
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
RA-FLSs fibroblast cells類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎成纖維樣滑膜細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴(yán)格遵照無菌操作)：１)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細(xì)胞兩次，加２-３ml ０.２５%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時間，通?？刂圃冢?２min)；２)鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散；３)取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；４)注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液(每周２-３次)，待細(xì)胞密度達(dá)到８０%以后重復(fù)１項操作或者凍存；特別注意：(如使用公共實驗室或者初次接觸細(xì)胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng))１)收到細(xì)胞后請盡快更換為含１５%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加１０%的血清，(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過７２小時)；２)貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化，請將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請優(yōu)先選擇直徑６cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行傳代培養(yǎng)；３)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
L-6TG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P-2003細(xì)胞、A875細(xì)胞、GS-9L細(xì)胞
T1-73細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PM6細(xì)胞、C12細(xì)胞、CL MC/9細(xì)胞
PNEC30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ly7細(xì)胞、FHC細(xì)胞、BCPAP細(xì)胞
LS411細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2195細(xì)胞、NCI-H1668細(xì)胞、HCC1954細(xì)胞
NCI-H1688細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT3細(xì)胞、P 3 HR 1細(xì)胞、CCD 1112SK細(xì)胞
NCI-H1869細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS-1034細(xì)胞、ssMCF7細(xì)胞、TGHAVSMC細(xì)胞
Hce8693細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCI-SCC-154細(xì)胞、ME-1 [Human leukemia]細(xì)胞、CMT-167細(xì)胞
SW-948細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1573細(xì)胞、CL-34細(xì)胞、SKG-3a細(xì)胞
HEC-1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Oka-C1細(xì)胞、SK Col 1細(xì)胞、OEC33細(xì)胞
JB6 [Mouse]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRK49F細(xì)胞、CL1-5細(xì)胞、ST-2細(xì)胞
RA-FLSs fibroblast cells類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎成纖維樣滑膜細(xì)胞系
SU-86-86細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCA 7細(xì)胞、NCIH820細(xì)胞、OVCA8細(xì)胞
T 98 G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHs74Int細(xì)胞、MLA144細(xì)胞、MPC-83細(xì)胞
MRC-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Huh7.5細(xì)胞、SW 780細(xì)胞、ST2細(xì)胞
Mouse INsulinoma 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U251MG細(xì)胞、H1436細(xì)胞、WI38細(xì)胞
ketr 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTSMC細(xì)胞、Granta-519細(xì)胞、OVCAR 4細(xì)胞
HEL-92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 737.T細(xì)胞、NCIH1184細(xì)胞、PT-K75細(xì)胞
HEL-92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 737.T細(xì)胞、NCIH1184細(xì)胞、PT-K75細(xì)胞
MyLa 2059細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16 melanoma細(xì)胞、KYSE 520細(xì)胞、mRTEC細(xì)胞
COLO-320DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H510A細(xì)胞、L-cell細(xì)胞、PK-15細(xì)胞
NCIH510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：N-9細(xì)胞、HCT GEO細(xì)胞、SNU-886細(xì)胞
TOV112D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN7細(xì)胞、EB1細(xì)胞、HIC細(xì)胞
MDA175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL28細(xì)胞、HN6細(xì)胞、MDA-MB-435細(xì)胞
HTori 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3.653細(xì)胞、MEC1細(xì)胞、PGLH7細(xì)胞
HCC0038細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-373MG細(xì)胞、Hs688(A)T細(xì)胞、J-774細(xì)胞
MES-23.5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3J.HR1K細(xì)胞、TMD-8細(xì)胞、RT4細(xì)胞
H-1395細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A549-Taxol細(xì)胞、NCI-322細(xì)胞、UO-31細(xì)胞
Anip[973]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16BL6細(xì)胞、WTRL1細(xì)胞、293-EBNA細(xì)胞
H-740細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UACC 812細(xì)胞、H-1436細(xì)胞、HNE-2細(xì)胞
SV40 MES 13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DITNC1細(xì)胞、OCI-Ly 10細(xì)胞、HCC-95細(xì)胞
RPMI 7951細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：X63.Ag8.653細(xì)胞、BEAS 2B細(xì)胞、SU-DHL-4細(xì)胞
BAR-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293F細(xì)胞、H22-H8D8細(xì)胞、CWR-22rv1細(xì)胞
HuH-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM-C7細(xì)胞、4-1st細(xì)胞、M-1 myeloid leukemia細(xì)胞
H341細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MTEC1細(xì)胞、Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細(xì)胞、MDAMB435細(xì)胞
LAD2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPEC-1細(xì)胞、RGB細(xì)胞、WERIRb1細(xì)胞
COLO 320 DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT 1197.T細(xì)胞、WPMY1細(xì)胞、SK-MEL-2-LUC細(xì)胞
HT 1376細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG-4(S+L-)細(xì)胞、Panc-327細(xì)胞、NCIH1993細(xì)胞
U266BL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HP615細(xì)胞、RMG1細(xì)胞、NOZ細(xì)胞
P3/NS1/1-Ag4-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EU-3細(xì)胞、GM 2132細(xì)胞、SHP-77細(xì)胞
UCLA NPA-87-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-16細(xì)胞、MHCC97-L細(xì)胞、HCC78細(xì)胞
IALM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS273細(xì)胞、COS7細(xì)胞、C28/I2細(xì)胞
CHP212細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CTV1細(xì)胞、T-98細(xì)胞、Farage Original Line細(xì)胞
NB-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LYR細(xì)胞、HEM細(xì)胞、HEK-AD 293細(xì)胞
293-EBNA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS-1-Ag4-1細(xì)胞、RAW264.7細(xì)胞、Blotchy fibroblast-11細(xì)胞
HOP 92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WiDr/S細(xì)胞、624mel細(xì)胞、DI-TNC1細(xì)胞
RD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA MB231細(xì)胞、Hs281T細(xì)胞、KYSE0410細(xì)胞
J45.01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-87細(xì)胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細(xì)胞、KYSE0030細(xì)胞
Hs 695T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3/NS1/1-Ag4-1細(xì)胞、L-6細(xì)胞、Hos TE-85細(xì)胞
H735細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 934.T細(xì)胞、IPLB-Sf21AE細(xì)胞、CAL 12細(xì)胞
NIH3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGH-U1細(xì)胞、266 Bl細(xì)胞、TE-4細(xì)胞
Centre Antoine Lacassagne-78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-548細(xì)胞、LNT-229細(xì)胞、NTERA2-cloneD1細(xì)胞
ROS-17/2.8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA2B細(xì)胞、COLO 824細(xì)胞、GM03570E細(xì)胞
H1092細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM134細(xì)胞、C166細(xì)胞、MCF/Adr細(xì)胞
OVCAR10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U 937細(xì)胞、LS-180細(xì)胞、SAOS 2細(xì)胞
CCD-33Co細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMC細(xì)胞、SKNEP-1細(xì)胞、SBC3細(xì)胞
MCF-7B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat E6.1細(xì)胞、TFK-1細(xì)胞、NCIH1703細(xì)胞
PLB-985細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H676細(xì)胞、CAL 12細(xì)胞、KMH2細(xì)胞
HONE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG-4 S+L-細(xì)胞、GM05372E細(xì)胞、H1522細(xì)胞
MDCK II細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SC1細(xì)胞、G-292細(xì)胞、130 T細(xì)胞
OCM1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：686LN-M4e細(xì)胞、C-Lu-65細(xì)胞、HUT 226細(xì)胞
WiDrTC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-251細(xì)胞、H-1954細(xì)胞、CHO-K1細(xì)胞
HuP-T4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAN-6細(xì)胞、OCI/AML-2細(xì)胞、EL4細(xì)胞
RA-FLSs fibroblast cells類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎成纖維樣滑膜細(xì)胞系
MIHA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCS-2/8細(xì)胞、NPC-039細(xì)胞、PaTu8988s細(xì)胞
CL40細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293H細(xì)胞、Y 1細(xì)胞、EU-3細(xì)胞
Rat 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMrSV5細(xì)胞、RCC-JF細(xì)胞、RCC23細(xì)胞
PNEC30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ly7細(xì)胞、KLN-205細(xì)胞、F9細(xì)胞
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