"BALB/3T3 clone A31 fibroblast cells小鼠胚胎成纖維細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：胚胎；成纖維；自發(fā)永生；雄性；BALB/c
細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣
正確的細(xì)胞復(fù)蘇需知事項(xiàng)：細(xì)胞凍存好了，接下來要注意什么問題呢？沒錯(cuò)，就是記得到時(shí)間了，拿出來復(fù)蘇。那么，細(xì)胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項(xiàng)呢？細(xì)胞活力和形態(tài)檢查的作用何在？活力檢查——千萬不要使用不健康的細(xì)胞，可能有污染(真菌、支原體等)，如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細(xì)胞的固有形態(tài)和生長(zhǎng)行為。凍存細(xì)胞：補(bǔ)充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細(xì)胞的前一天補(bǔ)充新的培養(yǎng)液。在細(xì)胞長(zhǎng)至７０%單層時(shí)收獲細(xì)胞，計(jì)數(shù)活細(xì)胞數(shù)，用凍存液調(diào)整細(xì)胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根據(jù)不同的細(xì)胞類型調(diào)整)；凍存液——用凍存液洗細(xì)胞并用凍存液重懸細(xì)胞，有不同類型的凍存液，根據(jù)細(xì)胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有)：５-１０% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì)；５-１５%甘油；如果細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長(zhǎng)，應(yīng)在５０%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長(zhǎng)２４小時(shí))內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細(xì)胞類型，日期，凍存人等信息，并保證每?jī)龃婀懿怀^１.５ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi)，因此，此步驟使用干冰，或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意，在凍存管上沒有足夠的空間記錄細(xì)胞的詳細(xì)信息，做好記錄是非常非常重要的！還有一個(gè)最重要的，一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細(xì)胞，以免其中的一個(gè)液氮罐出現(xiàn)問題！細(xì)胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要，熟記以下要點(diǎn)：當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細(xì)胞時(shí)，有可能會(huì)出現(xiàn)凍存管破裂的情況，使用保護(hù)面罩和防護(hù)服十分必要；其實(shí)，細(xì)胞復(fù)蘇只是一個(gè)簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn)，不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細(xì)節(jié)，不然，也不一定會(huì)盡如人意。例如說，人身健康方面：一定要記得做好防凍工作，戴上護(hù)目鏡；盡量降低DMSO對(duì)細(xì)胞的損傷等等。
H1581細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-6細(xì)胞、L 132細(xì)胞、SPDC-CCL141細(xì)胞
NCI-SNU-C2A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU 86.86細(xì)胞、TE4細(xì)胞、TE4細(xì)胞
ACC-M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF10-A細(xì)胞、NFS60細(xì)胞、HN13細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
BALB/3T3 clone A31 fibroblast cells小鼠胚胎成纖維細(xì)胞系
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞復(fù)蘇基本方法：１．從液氮罐中取出安剖；有時(shí)因安剖未封嚴(yán)，浸入了液氮，取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸，因此應(yīng)帶有防護(hù)眼睛和手套。２．迅速放入盛有３６℃～３７℃水的搪瓷罐中，扣上蓋并不時(shí)搖動(dòng)，盡快解凍。３．剪開紗布口袋，取出安剖，用７０％酒精擦拭消毒后，凈化臺(tái)上打開蓋，用吸管吸出細(xì)胞懸液，裝入離心管中，再補(bǔ)加１０ml培養(yǎng)液，吹打使細(xì)胞懸浮。４．低速離心（５００～１０００轉(zhuǎn)/分）５分鐘，取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。５．加入培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后，再移裝入培養(yǎng)瓶中，置溫箱培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T２５ flask細(xì)胞時(shí)，處理方式為：在寄送過程中，為避免起泡造成細(xì)胞脫落死亡，T２５ flask均加滿培養(yǎng)基。請(qǐng)檢查flask外觀，并于顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀況和有無污染現(xiàn)象，若有任何問題，不要打開蓋子，請(qǐng)立即通知細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室。將原封之T２５ flask靜置于３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱中，使細(xì)胞回溫至３７°C，并讓運(yùn)送過程中少數(shù)脫落的細(xì)胞可再附著生長(zhǎng)。隔天后，于無菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用)，僅留約５-１０ml培養(yǎng)基于flask內(nèi)，依一般培養(yǎng)方式再將細(xì)胞置入培養(yǎng)箱中，或細(xì)胞已長(zhǎng)滿盤，則將細(xì)胞做傳代培養(yǎng)。
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
JG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC9細(xì)胞、High5細(xì)胞、MFE-296細(xì)胞
HDQP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tissue Culture-1細(xì)胞、HuP-T4細(xì)胞、Ect1/E6E7細(xì)胞
AMC-HN8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs746T細(xì)胞、LTEP-a-2細(xì)胞、PC3M細(xì)胞
HPDE6c7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16F1細(xì)胞、BCPAP細(xì)胞、RCC 786-O細(xì)胞
52PE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc04.03細(xì)胞、BT-20細(xì)胞、Instituto Biologico-Rim Suino-2細(xì)胞
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
BALB/3T3 clone A31 fibroblast cells小鼠胚胎成纖維細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
常見細(xì)胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié)：１)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適？血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來源，所以血清的含量多少會(huì)對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為５%-１５%，不要低于５%或高過２０%，因?yàn)楹窟^低會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)不足，過高則會(huì)破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為１０%，可以適量加減；２)何時(shí)須更換培養(yǎng)基？視細(xì)胞生長(zhǎng)密度而定，或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時(shí)間，按時(shí)更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進(jìn)行更換；３)購買的復(fù)蘇細(xì)胞，為何會(huì)有脫落？因?yàn)檫\(yùn)輸?shù)倪^程中不可避免的會(huì)有震蕩，收到后可以離心收集；４)購買的細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會(huì)發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少，大都是因?yàn)殡x心過程操作上的失誤，造成細(xì)胞的物理性損傷，以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心，應(yīng)待細(xì)胞生長(zhǎng)隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；５)購買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因？研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后，加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于–８０°C太久；６)收到的冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng)，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動(dòng)或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí)，均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
Colon26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ABE­8.1/2細(xì)胞、TE 85.T細(xì)胞、BCECs細(xì)胞
NK-92 transfected with MFG-hIL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293GP細(xì)胞、KY70細(xì)胞、CHO-ori細(xì)胞
8505C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BGC823細(xì)胞、NCI-H1930細(xì)胞、Danio rerio Gill細(xì)胞
H283細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U266 Bl細(xì)胞、beta TC6細(xì)胞、Gerner 7666細(xì)胞
COV-362細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BAEC細(xì)胞、MKN45細(xì)胞、PLB 985細(xì)胞
H1944細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Giant Cell Tumor細(xì)胞、HFF1細(xì)胞、8505C細(xì)胞
A1847細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H345細(xì)胞、NCI-H647細(xì)胞、P-2003細(xì)胞
H2009細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF7細(xì)胞、OC-316細(xì)胞、HEK293-H細(xì)胞
Colo699細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2330細(xì)胞、H-661細(xì)胞、HCT116/L細(xì)胞
COV362細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL-1細(xì)胞、L5178YR細(xì)胞、P30 OHK細(xì)胞
BALB/3T3 clone A31 fibroblast cells小鼠胚胎成纖維細(xì)胞系
BLO-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3-Swiss細(xì)胞、MCF 7B細(xì)胞、16HBE細(xì)胞
HEK-293 c18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：brain-derived Endothelial cells.3細(xì)胞、Caki2細(xì)胞、GES-1細(xì)胞
BBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kupffer細(xì)胞、Y1細(xì)胞、HuCCT-1細(xì)胞
H345細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPC-TW039細(xì)胞、UMR106細(xì)胞、P3-X63-Ag8細(xì)胞
UCLA RO-81A-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細(xì)胞、Hep3B細(xì)胞、M14-MEL細(xì)胞
MOLT-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞、HT 144細(xì)胞、NCIH1437細(xì)胞
MOLT-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞、HT 144細(xì)胞、NCIH1437細(xì)胞
CEM-C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Reuber H35細(xì)胞、AG06814-J細(xì)胞、Hs 729細(xì)胞
PC-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-HUT-69細(xì)胞、NCIH2591細(xì)胞、P3X63NS1細(xì)胞
BGC-823細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pa17C細(xì)胞、7404細(xì)胞、H-2106細(xì)胞
BCECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC403細(xì)胞、MCF-7/ADR-RES細(xì)胞、MDA-MB 468細(xì)胞
P3 NS1 Ag4/1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OLN93細(xì)胞、Panc 2.03細(xì)胞、H-740細(xì)胞
CATHa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMB17細(xì)胞、GM 637細(xì)胞、GM 637細(xì)胞
8226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT-15細(xì)胞、H-1930細(xì)胞、NCI H295R細(xì)胞
RH8994細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVGp12細(xì)胞、Opossum Kidney細(xì)胞、NCI-H3255細(xì)胞
RPMI 8226/S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AC16 [Human hybrid]細(xì)胞、NCIH1650細(xì)胞、PANC-1細(xì)胞
NCIH1650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUTZ1細(xì)胞、Anip973細(xì)胞、32Dc3細(xì)胞
ARO-81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CT-26細(xì)胞、RCC4細(xì)胞、SK-N-BE(1)細(xì)胞
L-M[TK-]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRTL 5細(xì)胞、H2286細(xì)胞、C57 Mouse Tumor 93細(xì)胞
IMR90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Natural Killer-92細(xì)胞、Line 522細(xì)胞、COLO684細(xì)胞
Hi-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1438細(xì)胞、SNU-C2A細(xì)胞、As-PC1細(xì)胞
AU 565細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Det 562細(xì)胞、OCM1細(xì)胞、WC00097細(xì)胞
SU-DHL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs695細(xì)胞、HEC1B細(xì)胞、Mono-Mac-6細(xì)胞
Roswell Park Memorial Institute 6666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-019細(xì)胞、UM2細(xì)胞、LU-65M細(xì)胞
HEC-1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Oka-C1細(xì)胞、SK Col 1細(xì)胞、OEC33細(xì)胞
U-87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC-WRC 256細(xì)胞、TE-12細(xì)胞、McArdle RH-7777細(xì)胞
BJ1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-330細(xì)胞、T241細(xì)胞、NCI-H510A細(xì)胞
PFSK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DC 2.4細(xì)胞、Hs-274-T細(xì)胞、TK 10細(xì)胞
SUM 52PE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OKa-C-1細(xì)胞、HT 1376細(xì)胞、NCI-H2198細(xì)胞
H1395細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIO-M1細(xì)胞、Hs840_T細(xì)胞、Caco2BBe細(xì)胞
PLA801-95D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJSA細(xì)胞、Panc05.04細(xì)胞、MPC 11細(xì)胞
SUPM2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM05887A細(xì)胞、JAR細(xì)胞、Tu177細(xì)胞
TE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2228細(xì)胞、COLO-320HSR細(xì)胞、Med 341細(xì)胞
SGC-7901細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH596細(xì)胞、NK-92細(xì)胞、V-79-4細(xì)胞
P3 88 D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UM-UC-14細(xì)胞、SF-539 BT細(xì)胞、MES13細(xì)胞
COLO-824細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Med 341細(xì)胞、Rat Skin 1細(xì)胞、M1細(xì)胞
OC-316細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ZR75_1細(xì)胞、HT-115細(xì)胞、alpha-TC1.6細(xì)胞
LNCaP clone FGC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-51細(xì)胞、H2330細(xì)胞、JKT-1細(xì)胞
LNCaP clone FGC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-51細(xì)胞、H2330細(xì)胞、JKT-1細(xì)胞
X63細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPASMC細(xì)胞、C8-D1A細(xì)胞、SU4細(xì)胞
SKM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：QBC-939細(xì)胞、KBM-5細(xì)胞、NCIH647細(xì)胞
T-HSC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-119細(xì)胞、Leghorn Male Hepatoma cell line細(xì)胞、ROS17/2.8細(xì)胞
Anip 973細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OE21細(xì)胞、CCD-966SK細(xì)胞、Co 115細(xì)胞
NCI-H1770細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKGIIIA細(xì)胞、HuH28細(xì)胞、TK.10細(xì)胞
GM03190A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-253細(xì)胞、Fu97細(xì)胞、TEC細(xì)胞
MHCC97L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MESSADX5細(xì)胞、COLO 741細(xì)胞、CEM-C7細(xì)胞
H-747細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPC-Y5細(xì)胞、H727細(xì)胞、VMRC-LCD細(xì)胞
HIEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 600.T細(xì)胞、DoHH-2細(xì)胞、CCRF.CEM細(xì)胞
HCE-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-8_13細(xì)胞、CBRH-7919細(xì)胞、HTh-74細(xì)胞
MASMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-468-RED細(xì)胞、K562/ADR細(xì)胞、RPMI8226細(xì)胞
TCam-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMES-1細(xì)胞、NB-9細(xì)胞、HFF細(xì)胞
BALB/3T3 clone A31 fibroblast cells小鼠胚胎成纖維細(xì)胞系
NBL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-1 sq細(xì)胞、Highly Aggressively Proliferating Immortalized細(xì)胞、KU19-19細(xì)胞
L-929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SN12PM6細(xì)胞、SCC-25細(xì)胞、SuperTube細(xì)胞
H4-IIE-C3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 27細(xì)胞、H-2009細(xì)胞、TALL1細(xì)胞
8505C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BGC823細(xì)胞、T/G HA-VSMC細(xì)胞、Capan 1細(xì)胞
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