"SK-RC-52 epithelioid cells人腎癌細胞系 細胞背景資料:腎癌;縱隔膜轉移 細胞形態(tài):上皮細胞樣 正確的細胞復蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復蘇。那么,細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調(diào)整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當從液氮罐內(nèi)取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。 RKN細胞系相關產(chǎn)品:Tu177細胞、OE33細胞、ECV304細胞 Becker細胞系相關產(chǎn)品:WI38細胞、L cell line細胞、PCI:SG231細胞 SK-MEL24細胞系相關產(chǎn)品:IGROV 1細胞、EFM192B細胞、COLO-1細胞 細胞生長:貼壁 SK-RC-52 epithelioid cells人腎癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞學在生命科學科中起著至關重要的作用,近年來細胞學蓬勃發(fā)展,并取得了重大的進展,細胞實驗室的構建也是各個院校生物學科必備的實驗室。細胞實驗謹慎復雜,需要的實驗設備種類繁多,下面就一些動物細胞實驗室必備儀器進行簡單介紹:CO2培養(yǎng)箱是細胞培養(yǎng)的必備儀器,它為細胞提供了一個體外培養(yǎng)的舒適環(huán)境,如適宜的溫度、濕度、酸堿度、O2濃度等。細胞在體外培養(yǎng)時很容易受到各種細菌、微生物的感染,因此,CO2培養(yǎng)箱的滅菌和抑菌能力就顯得尤為重要。純水系統(tǒng):細胞培養(yǎng)用水一般要求雙蒸水,實際上普通蒸餾水經(jīng)玻璃器皿中按標準方法蒸餾二次得到的雙蒸水是不能滿足要求的,而且水中的內(nèi)毒素直接參與細胞凋亡,血清中內(nèi)毒素含量越低,對細胞毒性越小,越利于細胞的生長和傳代;內(nèi)毒素含量過高,會直接導致細胞提前老化。因此建議配置正式的水純化系統(tǒng)。超凈工作臺/生物安全柜:細胞培養(yǎng)對無菌環(huán)境要求很高,在細胞操作時,一般需要在100級空氣質(zhì)量條件下進行,因此超凈工作臺或生物安全柜就必須配備。液氮罐:為了保存細胞,特別是不易獲得的突變型細胞或細胞株,要將細胞凍存。凍存的溫度一般為液氮溫度-196℃,因此,需要液氮罐。在此環(huán)境中,一般細胞可以保存十年具有活性。超低溫冰箱:細胞的凍存過程需要一系列程序降溫,一般4℃下存放30min,轉放-20℃ 1 hour,再轉入-70至-80℃過夜,之后才可以轉移到液氮內(nèi)(-196℃),這時就必須配備一臺-86℃超低溫冰箱。一般超低溫冰箱保存細胞可達數(shù)月,對于不需要長期凍存的細胞,可暫時放于超低溫冰箱保存。恒溫水?。簭囊旱虺蜏乇渲腥〕黾毎麅龃婀苄枰⒓捶庞冢常贰嫠≈锌焖購吞K之后才傳代培養(yǎng),因此,恒溫水浴也是細胞實驗室必備儀器。離心機:細胞培養(yǎng)需要離心收集傳代細胞,所以需要配置低速的常溫離心機,對于后期細胞內(nèi)容物的分離則需要高速冷凍離心機。移液器和細胞培養(yǎng)的大量耗材:細胞實驗中有大量頻繁的移液操作,因此各種微量移液器、瓶口分配器、移液管控制器是必不可少的。各類細胞培養(yǎng)板、細胞培養(yǎng)瓶、移液管等耗材更是不可或缺的,而且一次性,用量極大。除上述儀器外,高壓滅菌鍋、倒置顯微鏡也是細胞培養(yǎng)的必備儀器,發(fā)酵罐、轉瓶機等也常常見于細胞培養(yǎng)實驗室。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 CNE-1細胞系相關產(chǎn)品:HPBALL細胞、SUSM1細胞、IA-LM細胞 Vero-76細胞系相關產(chǎn)品:Jurkat Clone E6-1細胞、KMS26細胞、NCIH1694細胞 CD18/HPAF細胞系相關產(chǎn)品:NB-9細胞、RL95-2細胞、Chinese Hamster Lung細胞 HEMCSS細胞系相關產(chǎn)品:STTG1細胞、SKCO 1細胞、RL95細胞 LADMAC細胞系相關產(chǎn)品:TO175T細胞、MRC 5細胞、FHCRC subclone 11細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 SK-RC-52 epithelioid cells人腎癌細胞系 細胞生長特性:貼壁 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結:1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應立刻將冷凍管再一次扭緊。 B16 melanoma細胞系相關產(chǎn)品:As-PC1細胞、End1/E6E7細胞、H889細胞 3T3L1細胞系相關產(chǎn)品:CATHa細胞、RKOAS451細胞、HCC-2185細胞 IM-95細胞系相關產(chǎn)品:A-204細胞、AMJ2-C8細胞、JB6 Cl 30-7b細胞 CL 1-5細胞系相關產(chǎn)品:PANC-1細胞、H-1563細胞、IBMF-7細胞 HPAF-I細胞系相關產(chǎn)品:KM.12細胞、HC11 Mammary Epithelium細胞、Hs 832(C).T細胞 LoVo細胞系相關產(chǎn)品:KYSE 270細胞、SNU878細胞、NCI-H1105細胞 CP70細胞系相關產(chǎn)品:HUTU80細胞、HEL-92-1-7細胞、NCI-N87細胞 THP-1(ATCC)細胞系相關產(chǎn)品:J.E6-1細胞、BLO-11細胞、Vero 76細胞 NCIH196細胞系相關產(chǎn)品:YES 2細胞、AZ521細胞、ZR75-1細胞 NCIH1623細胞系相關產(chǎn)品:MRC5細胞、PLA801-95D細胞、HRA19細胞 SK-RC-52 epithelioid cells人腎癌細胞系 7860細胞系相關產(chǎn)品:HPAF II細胞、IMR90細胞、RS411細胞 Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細胞系相關產(chǎn)品:18G3.cl 1細胞、NCIH226細胞、Pa16C細胞 M109細胞系相關產(chǎn)品:JAR細胞、RGC5細胞、Hs895.T細胞 HS0578T細胞系相關產(chǎn)品:L cells (TK-)細胞、TK 10細胞、MGc80-3細胞 3T3-Swiss細胞系相關產(chǎn)品:SK Mel 24細胞、LIPF155C細胞、DMS-79細胞 SK-MEL-1細胞系相關產(chǎn)品:BV173細胞、ACC-M細胞、MDA-436細胞 SK-MEL-1細胞系相關產(chǎn)品:BV173細胞、ACC-M細胞、MDA-436細胞 ZR7530細胞系相關產(chǎn)品:Caco2-BBE細胞、293-F細胞、H-1092細胞 Panc813細胞系相關產(chǎn)品:Vero-E6細胞、HPB-ALL細胞、SuDHL 2細胞 Panc 08.13細胞系相關產(chǎn)品:AZ 521細胞、HKF細胞、HSAS1細胞 Hep 3B2.1-7細胞系相關產(chǎn)品:MDAMB134細胞、LAPC4細胞、BT-325細胞 Hs840_T細胞系相關產(chǎn)品:LIXC002細胞、578T細胞、EoL-1 cell細胞 CWR-22rv1細胞系相關產(chǎn)品:H-929細胞、Hs 606細胞、DF-1細胞 CAMA1細胞系相關產(chǎn)品:HL-7702細胞、MX-1細胞、2V6.11細胞 H-82細胞系相關產(chǎn)品:NCIH295R細胞、HEL 299細胞、PG-BE1細胞 NBL-3細胞系相關產(chǎn)品:RL952細胞、H-2085細胞、WSUDLCL2細胞 Mhh-Call 2細胞系相關產(chǎn)品:GP2-293細胞、RBVEC細胞、J 774A.1細胞 PT-K75細胞系相關產(chǎn)品:KBM5細胞、NCIH548細胞、HMVEC細胞 ACC3細胞系相關產(chǎn)品:SU.86細胞、Detroit562細胞、OC-316細胞 Strain L-929細胞系相關產(chǎn)品:LED-WiDr細胞、H1915細胞、MT-4細胞 MO59J細胞系相關產(chǎn)品:PIG3細胞、LICR-LON-HN6細胞、TE7細胞 MBdSMC細胞系相關產(chǎn)品:NCIH810細胞、MC3T3-E細胞、HCT.116細胞 Tsup-1細胞系相關產(chǎn)品:CCFSTTG1細胞、58F細胞、HCC-1954BL細胞 Tn5B1-4細胞系相關產(chǎn)品:PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細胞、B16/F10細胞、RCC10RGB細胞 MDAPCa-2b細胞系相關產(chǎn)品:TOV-112D細胞、U-373MG細胞、HS-683細胞 DI-TNC1細胞系相關產(chǎn)品:SN12CPM6細胞、Baby Hamster Kidney from litter No. 21細胞、hEM15A細胞 P388.D1細胞系相關產(chǎn)品:SKHEP1細胞、BT 549細胞、U-87MG ATCC細胞 Ra #1細胞系相關產(chǎn)品:PC-10細胞、MDAMB157細胞、H-1781細胞 Tu 212細胞系相關產(chǎn)品:H-187細胞、769P細胞、ssMCF7細胞 NCI-H1963細胞系相關產(chǎn)品:IMR-90細胞、MSB1細胞、OsA-CL細胞 HEK293FT細胞系相關產(chǎn)品:U-87-MG細胞、251MG細胞、B16F10細胞 HT144-mel細胞系相關產(chǎn)品:MDA MB 436細胞、C6細胞、IHH細胞 BSC-1細胞系相關產(chǎn)品:COV 504細胞、Tn5B1-4細胞、RBMVEC細胞 ECC-10細胞系相關產(chǎn)品:LICR-LON-HN6-R細胞、Z138細胞、MDA-MB436細胞 HBVSMC細胞系相關產(chǎn)品:CAL-27細胞、Kelly細胞、OCI AML4細胞 SCC154細胞系相關產(chǎn)品:Plaepi 34細胞、VM-CUB1細胞、BHT101細胞 OVCAR-8/ADR細胞系相關產(chǎn)品:Psi2 DAP細胞、MDAMB134VI細胞、X63-Ag8-653細胞 ZYM-SVEC01細胞系相關產(chǎn)品:EB-1細胞、HOS-143B細胞、KTCTL-140細胞 ZYM-SVEC01細胞系相關產(chǎn)品:EB-1細胞、HOS-143B細胞、KTCTL-140細胞 BaF3細胞系相關產(chǎn)品:ECV304細胞、NCIH526細胞、H-1437細胞 NCI-SNU-878細胞系相關產(chǎn)品:VERO C 1008細胞、CCRF-CEM C7細胞、COR L279細胞 L-6TG細胞系相關產(chǎn)品:P-2003細胞、A875細胞、GS-9L細胞 NCI-H2052細胞系相關產(chǎn)品:KYSE 180細胞、H22細胞、16HBE140細胞 R.K.13細胞系相關產(chǎn)品:MDA-MB-134-VI細胞、Microbiological Associates-104細胞、OCI AML5細胞 Hi5細胞系相關產(chǎn)品:JC細胞、SKCO1細胞、CEMx721.174.T2細胞 NCI-SNU-520細胞系相關產(chǎn)品:SUM-159細胞、H-2029細胞、NCIH1770細胞 MA-782細胞系相關產(chǎn)品:NKT細胞、AR41P細胞、UCLA SO M14細胞 Calu-3細胞系相關產(chǎn)品:H-378細胞、OP-9細胞、Hs 611.T細胞 HCC1008細胞系相關產(chǎn)品:HCC1588細胞、REC細胞、SNU-16細胞 293 H細胞系相關產(chǎn)品:RGC5細胞、NCI-H2291細胞、H-125細胞 SU86.86細胞系相關產(chǎn)品:NT2D1細胞、BIC細胞、H-1435細胞 SK-RC-52 epithelioid cells人腎癌細胞系 A549/DDP細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H2029細胞、SW 948細胞、COLO320 DM細胞 SNK1細胞系相關產(chǎn)品:H1882細胞、BJA-B細胞、BT 20細胞 MOLT-3細胞系相關產(chǎn)品:HKBML細胞、NBL-5細胞、BTI-Tn-5B1-4細胞 IM 9細胞系相關產(chǎn)品:3T3 J2細胞、J774細胞、H-4細胞 "
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