"J774 epithelioid cells小鼠巨噬細胞系 細胞背景資料:巨噬細胞;BALB/c 細胞形態(tài):上皮細胞樣 貼壁細胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據細胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細胞。這種方法作用溫和,對細胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細胞與間質,對細胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應調節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經常覺得對細胞的損傷比較大,但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。5、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是:對細胞損傷小,不需要中止或洗細胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導致大量細胞死亡操作的間充質干細胞、DC細胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。 MA 104細胞系相關產品:IHHA-1細胞、NCIH1876細胞、NCI-H1568細胞 SHI1細胞系相關產品:RAG細胞、U266 Bl細胞、LIM1215細胞 KE 37細胞系相關產品:SU-DHL-4細胞、NCI-H747細胞、KP-N-RT細胞 細胞生長:貼壁 J774 epithelioid cells小鼠巨噬細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞學在生命科學科中起著至關重要的作用,近年來細胞學蓬勃發(fā)展,并取得了重大的進展,細胞實驗室的構建也是各個院校生物學科必備的實驗室。細胞實驗謹慎復雜,需要的實驗設備種類繁多,下面就一些動物細胞實驗室必備儀器進行簡單介紹:CO2培養(yǎng)箱是細胞培養(yǎng)的必備儀器,它為細胞提供了一個體外培養(yǎng)的舒適環(huán)境,如適宜的溫度、濕度、酸堿度、O2濃度等。細胞在體外培養(yǎng)時很容易受到各種細菌、微生物的感染,因此,CO2培養(yǎng)箱的滅菌和抑菌能力就顯得尤為重要。純水系統(tǒng):細胞培養(yǎng)用水一般要求雙蒸水,實際上普通蒸餾水經玻璃器皿中按標準方法蒸餾二次得到的雙蒸水是不能滿足要求的,而且水中的內毒素直接參與細胞凋亡,血清中內毒素含量越低,對細胞毒性越小,越利于細胞的生長和傳代;內毒素含量過高,會直接導致細胞提前老化。因此建議配置正式的水純化系統(tǒng)。超凈工作臺/生物安全柜:細胞培養(yǎng)對無菌環(huán)境要求很高,在細胞操作時,一般需要在100級空氣質量條件下進行,因此超凈工作臺或生物安全柜就必須配備。液氮罐:為了保存細胞,特別是不易獲得的突變型細胞或細胞株,要將細胞凍存。凍存的溫度一般為液氮溫度-196℃,因此,需要液氮罐。在此環(huán)境中,一般細胞可以保存十年具有活性。超低溫冰箱:細胞的凍存過程需要一系列程序降溫,一般4℃下存放30min,轉放-20℃ 1 hour,再轉入-70至-80℃過夜,之后才可以轉移到液氮內(-196℃),這時就必須配備一臺-86℃超低溫冰箱。一般超低溫冰箱保存細胞可達數月,對于不需要長期凍存的細胞,可暫時放于超低溫冰箱保存。恒溫水?。簭囊旱虺蜏乇渲腥〕黾毎麅龃婀苄枰⒓捶庞冢常贰嫠≈锌焖購吞K之后才傳代培養(yǎng),因此,恒溫水浴也是細胞實驗室必備儀器。離心機:細胞培養(yǎng)需要離心收集傳代細胞,所以需要配置低速的常溫離心機,對于后期細胞內容物的分離則需要高速冷凍離心機。移液器和細胞培養(yǎng)的大量耗材:細胞實驗中有大量頻繁的移液操作,因此各種微量移液器、瓶口分配器、移液管控制器是必不可少的。各類細胞培養(yǎng)板、細胞培養(yǎng)瓶、移液管等耗材更是不可或缺的,而且一次性,用量極大。除上述儀器外,高壓滅菌鍋、倒置顯微鏡也是細胞培養(yǎng)的必備儀器,發(fā)酵罐、轉瓶機等也常常見于細胞培養(yǎng)實驗室。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 Kit 225-K6細胞系相關產品:3T3-F442A細胞、PIEC細胞、SK-MEL-3細胞 hTERT-HPNE細胞系相關產品:OVCAR-8/ADR細胞、LUDLU1細胞、Lewis lung carcinoma細胞 HEK/EBNA細胞系相關產品:K 562細胞、HT3細胞、NCI-H1693細胞 C4-2B細胞系相關產品:H-II-E-C3細胞、FRO81-2細胞、LCD細胞 H2.35細胞系相關產品:LNT-229細胞、CCD1112Sk細胞、Karpas 299細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系 J774 epithelioid cells小鼠巨噬細胞系 細胞生長特性:貼壁 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 造成實驗室細胞污染常見情況總結:細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染,大多數較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢?我們根據常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術器械、離心機、冰箱等專用儀器設備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞!一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里,細胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔毎硕嗫陔s,難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當風衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢! SK-RC-20細胞系相關產品:CT 26細胞、L 1210細胞、TE 32.T細胞 SW-620細胞系相關產品:COR-L51細胞、CHO/dhFr-細胞、SW1088細胞 P3-NS1/1-Ag4-1細胞系相關產品:NHLF細胞、NCI-H524細胞、Caco 2細胞 HHFK細胞系相關產品:HEMCSS細胞、MDA-MB-134細胞、Michigan Cancer Foundation-10A細胞 L-540細胞系相關產品:FRO 81-2細胞、NCI-H2405細胞、RL-95-2細胞 GL-261細胞系相關產品:Hs-746T細胞、NCI-H1623細胞、CCLP-1細胞 H-157細胞系相關產品:U266 B1細胞、NCI-H1876細胞、Panc10.05細胞 KMS18細胞系相關產品:NS20-Y細胞、UCLA NPA-87-1細胞、JHH-7細胞 CEMx721.174.T2細胞系相關產品:Tn5B1-4細胞、TE-13細胞、2BS細胞 FLC-7細胞系相關產品:B16 F10細胞、B95-8細胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細胞 J774 epithelioid cells小鼠巨噬細胞系 SK-ES1細胞系相關產品:HS-5細胞、PSN1細胞、PFSK1細胞 BNL.CL2細胞系相關產品:TFK-1細胞、MA-104細胞、NCIH244細胞 H-1869細胞系相關產品:Tb 1-Lu細胞、ES2細胞、EoL-1細胞 RF/6A細胞系相關產品:HT-29/CX-1細胞、RGM1細胞、LU65細胞 RL細胞系相關產品:SCC90細胞、NCIH596細胞、C22細胞 GM04154細胞系相關產品:NE-1細胞、PC9細胞、CEL細胞 GM04154細胞系相關產品:NE-1細胞、PC9細胞、CEL細胞 NF639細胞系相關產品:MKN74細胞、MDAPCa-2b細胞、SJRH 30細胞 Adeno 293細胞系相關產品:COLO-824細胞、Hep-G2/C3A細胞、HCAEC細胞 MNNG/HOS Clone F-5細胞系相關產品:SJSA1細胞、DHL-16細胞、GM02131A細胞 SNU878細胞系相關產品:L cell細胞、CMECs細胞、A-875細胞 Rat Chondrosarcoma Swarm細胞系相關產品:HL1細胞、HEK-293A細胞、MES 23.5細胞 U031細胞系相關產品:HEL299細胞、NCIH1385細胞、CCF-STTG1細胞 H1963細胞系相關產品:SK Col 1細胞、GA-10 clone 4細胞、MCF-7/ADR細胞 VP303細胞系相關產品:Huh-7細胞、COLO 205細胞、MOLP-8細胞 PC2細胞系相關產品:Nb2細胞、HOP92細胞、HLEB3細胞 H-2196細胞系相關產品:HTori 3細胞、PANC3.27細胞、C1R細胞 NCI.H23細胞系相關產品:KYSE450細胞、751細胞、AG06814-J細胞 Ball 1細胞系相關產品:KM-H2細胞、HMEC1細胞、GM03569B細胞 SCC 9細胞系相關產品:MLE-12細胞、SK-MEL-24細胞、GM03671C細胞 COV362細胞系相關產品:SKMEL-1細胞、L5178YR細胞、P30 OHK細胞 NCIH1048細胞系相關產品:SW-1573細胞、OCIAML5細胞、MDCC-MSB1細胞 Hs695T細胞系相關產品:Rat Basophilic Leukemia-1細胞、COLO320/DM細胞、SUPM2細胞 Medical Research Council cell strain-9細胞系相關產品:NCIH441細胞、T24(ECV304)細胞、H4-II-E-C3細胞 RS 4;11細胞系相關產品:MPC5細胞、H-1404細胞、D-341 Med細胞 M-NFS-60細胞系相關產品:ACC-2細胞、EOL1細胞、Caco-2 BBe細胞 HuCC-T1細胞系相關產品:HOP 62細胞、P3HR1-BL細胞、H-209細胞 SACC83細胞系相關產品:BMSCs(mBMSCs)細胞、MLMA細胞、SF17細胞 BALB 3T3 clone A31細胞系相關產品:MG-63細胞、PL45細胞、TM-3細胞 TE-15細胞系相關產品:MV4:11細胞、CHOS細胞、NCI-H820細胞 HEK293-A細胞系相關產品:UPCI:SCC154細胞、H-2170細胞、C-4-I細胞 Panc 02.03細胞系相關產品:HES [Human embryonic skin fibroblast]細胞、VK2/E6E7細胞、CCD-841CoN細胞 Hs 852.T細胞系相關產品:IR 983F細胞、HS852.T細胞、NTC-200細胞 NCIH1573細胞系相關產品:CT26細胞、KYSE50細胞、MOVAS細胞 NCI-H810細胞系相關產品:ACHN細胞、JB6 Cl 30-7b細胞、H2228細胞 H-187細胞系相關產品:Hs27F細胞、MDA-MB468細胞、JTC-39細胞 HOS (TE85, Clone F5)細胞系相關產品:JurkatE6-1細胞、HGE細胞、OCI-Ly03細胞 NU-GC-3細胞系相關產品:MGC803細胞、ACCM細胞、MC 116細胞 3T3-Swiss細胞系相關產品:SK Mel 24細胞、LIPF155C細胞、DMS-79細胞 Emory University-2細胞系相關產品:ME 180細胞、MDA-MB-157細胞、HIT clone T15細胞 OSKM-1細胞系相關產品:CMEC/D3細胞、Hs 839.T細胞、CCD-841-CoTr細胞 MDA-MB 453細胞系相關產品:LoVo細胞、NCI-H727細胞、2780CP細胞 SK-MEL28細胞系相關產品:Hs 606.T細胞、Hs863T細胞、FRTL-5 Cl 2細胞 MX-1細胞系相關產品:HFE-145細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細胞、N-2a細胞 UM-UC3細胞系相關產品:HEC1A細胞、H1299細胞、HD-LM-2細胞 H1666_DA細胞系相關產品:RK13細胞、NCI-SNU-387細胞、ARO細胞 B16F0細胞系相關產品:HEK-293-FT細胞、NCI H2106細胞、MLA144細胞 HCV29細胞系相關產品:GS9L細胞、HCC-1171細胞、WEHI 164細胞 C-26細胞系相關產品:NCI-SNU-878細胞、NS-1-Ag4-1細胞、J-774A.1細胞 Neuro2a細胞系相關產品:DKMG細胞、IPAM-WT細胞、H-1651細胞 MOLP-2細胞系相關產品:NCI-H157細胞、H-510A細胞、HCC-2935細胞 J774 epithelioid cells小鼠巨噬細胞系 WM-115細胞系相關產品:NCIH1944細胞、MHHCALL2細胞、SK-BR-3細胞 NCIH1417細胞系相關產品:SUP-T1細胞、H-4細胞、Th17細胞 H-524細胞系相關產品:SRA01/04細胞、G361-mel細胞、OCI AML5細胞 P3-NS1/1-Ag4-1細胞系相關產品:NHLF細胞、KYSE-270細胞、FRhK-4細胞 "
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