"Hca-F epithelioid cells小鼠肝癌細胞系
細胞背景資料：肝癌
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結１：復蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題?？偨Y２：首先應該懷疑凍存，實際上復蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當會事。
JHH2細胞系相關產(chǎn)品：DMS 153細胞、KCL22細胞、675T細胞
NCI-SNU-5細胞系相關產(chǎn)品：HRMC細胞、RIN-14B細胞、THC-8307細胞
MA-104細胞系相關產(chǎn)品：Rin-M-5F細胞、RT4-D6P2T細胞、UMR106細胞
細胞生長：貼壁
Hca-F epithelioid cells小鼠肝癌細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
冷凍細胞解凍程序：依據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例，制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細胞均無法立即適應不同之基礎培養(yǎng)基或不同之血清種類，若因實驗需要，必須有所不同時，務必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成，確定細胞適應后，方進行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清)，對細胞而言差異極大，請務必依據(jù)細胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于３７°C水槽中回溫，回溫后噴以７０%酒精并擦拭之，移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管，立即放入３７°C水槽中快速解凍，水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿，否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在１分鐘內(nèi)全部融化后，以７０%ethanol擦拭冷凍管外部，移入無菌操作臺內(nèi)。依據(jù)細胞種類和濃度，于無菌操作臺內(nèi)?。保癿l培養(yǎng)基加至T２５或T７５flask中。取出已解凍之細胞懸浮液，緩緩加入T２５或T７５flask內(nèi)之培養(yǎng)基，混合均勻，放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細胞而言，１%以下之冷凍保護劑DMSO，不會對細胞之貼附或活化有不良影響，不需立刻由解凍細胞中去除，待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因對DMSO敏感或會造成細胞分化之細胞，需立即去除DMSO者，則可將解凍后之細胞懸浮液放入５-１０ml培養(yǎng)基中，離心３００xg(約１０００rpm)，５分鐘，小心移去上清液，加入適量新鮮培養(yǎng)基，將細胞均勻混合后，轉移至培養(yǎng)瓶中，再放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
UPCI:SCC90細胞系相關產(chǎn)品：Jurkat (clone E6-1)細胞、NCIH1155細胞、GM00637B細胞
HuT-78細胞系相關產(chǎn)品：LLC-PK1細胞、University of Arizona Cell Culture-812細胞、LS-513細胞
OVCAR 433細胞系相關產(chǎn)品：COLO394細胞、SMMC7721細胞、RPMI 8226細胞
Co-115細胞系相關產(chǎn)品：RIN Cl-5F細胞、HCT-FET細胞、MDAMB415細胞
COLO-684細胞系相關產(chǎn)品：DMS 273細胞、NCI-SNU-668細胞、Hs852細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
Hca-F epithelioid cells小鼠肝癌細胞系
細胞生長特性：貼壁
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結：１)一般客戶拿到細胞后，應該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當?shù)販囟龋绻麣鉁氐陀冢炊鹊?，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
H69/P細胞系相關產(chǎn)品：Mo 59J細胞、SNU-1040細胞、HFT-8810細胞
OV-2008細胞系相關產(chǎn)品：IPAM-WT細胞、MHCCLM3細胞、R1610細胞
PANC 1005細胞系相關產(chǎn)品：BEP2D細胞、Psi-2-DAP細胞、JVM-3細胞
hEM15A細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2591細胞、U-251_MG細胞、M-14細胞
SCC-25細胞系相關產(chǎn)品：ZR75-1細胞、HUT 28細胞、RPMI #1846細胞
786O細胞系相關產(chǎn)品：OCI-Ly 1細胞、NCI/ADR-RES細胞、NCI-H441-4細胞
RPMI no. 8226細胞系相關產(chǎn)品：BHT-101細胞、G292細胞、Rat Basophilic Leukemia-1細胞
SKMEL-24細胞系相關產(chǎn)品：MDA-134細胞、AE 1201細胞、MV4II細胞
Medical Research Council cell strain-5細胞系相關產(chǎn)品：SupT1細胞、G 292 Clone A 141B1細胞、IR983F細胞
NIH-3T3細胞系相關產(chǎn)品：TM-4細胞、CAL-85-1細胞、HA1800細胞
Hca-F epithelioid cells小鼠肝癌細胞系
HRA-19細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H441細胞、aTC1-6細胞、HL 60細胞
U118-MG細胞系相關產(chǎn)品：SV-HUC細胞、brain-derived Endothelial cells.3細胞、GH 3細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-436細胞系相關產(chǎn)品：GLRK 13細胞、EJ1細胞、HTR-8/SVneo細胞
NCI-HUT-292細胞系相關產(chǎn)品：NCIH2291細胞、H322T細胞、SUDHL4細胞
HCC-78細胞系相關產(chǎn)品：H358細胞、RPMC細胞、L-Wnt-3A細胞
Nthy ori 3.1細胞系相關產(chǎn)品：SKOV-3細胞、CAMA1細胞、RDES細胞
Nthy ori 3.1細胞系相關產(chǎn)品：SKOV-3細胞、CAMA1細胞、RDES細胞
CCD19-Lu細胞系相關產(chǎn)品：UCD-MLA-144細胞、NG 108-15細胞、AAV-293細胞
BIC1細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1048細胞、TR 146細胞、AHH-1細胞
NCI-H820細胞系相關產(chǎn)品：P31/FUJ細胞、Caco 2細胞、HHUA細胞
HCC 94細胞系相關產(chǎn)品：624mel細胞、SK-MEL 28細胞、hTERT RPE-1細胞
SNU-C1細胞系相關產(chǎn)品：NGP細胞、GLAG-66細胞、Ly7細胞
MOLT16細胞系相關產(chǎn)品：J774A1細胞、NCIH292細胞、NeHepLxHT細胞
NCIH510細胞系相關產(chǎn)品：N-9細胞、HCT GEO細胞、SNU-886細胞
BXPC3細胞系相關產(chǎn)品：ARPE-19細胞、Roswell Park Memorial Institute 6666細胞、H-7721細胞
LICR-HN6細胞系相關產(chǎn)品：NK10a細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-468細胞、T-ALL 1細胞
Tohoku Hospital Pediatrics-1細胞系相關產(chǎn)品：NCIH2107細胞、NCI-H1581細胞、NFS-60細胞
UPCI-SCC090細胞系相關產(chǎn)品：L M (TK-)細胞、Panc 1細胞、NCI.H460細胞
LS 174 T細胞系相關產(chǎn)品：WILL2細胞、HepG2-luc細胞、MPP89細胞
MDA-MB-157細胞系相關產(chǎn)品：A 172細胞、KGN細胞、LOUNH91細胞
TW-039細胞系相關產(chǎn)品：RT-4細胞、102PT細胞、GalK 1細胞
Centre Antoine Lacassagne-78細胞系相關產(chǎn)品：H-548細胞、LNT-229細胞、NTERA2-cloneD1細胞
Medical University of Graz-Chordoma 1細胞系相關產(chǎn)品：HEH2細胞、CA46細胞、B95-8細胞
A-204細胞系相關產(chǎn)品：COLO 205細胞、P31/FUJ細胞、NCI H345細胞
OVCAR-8/ADR細胞系相關產(chǎn)品：Psi2 DAP細胞、MDAMB134VI細胞、X63-Ag8-653細胞
P3HRI細胞系相關產(chǎn)品：SCL I細胞、CCF-STTG1細胞、MDST8細胞
PK (15)細胞系相關產(chǎn)品：GM07404D細胞、Hs-578T細胞、NCIH2286細胞
HEL-92_1_7細胞系相關產(chǎn)品：SKG-IIIa細胞、H4-IIE-C3細胞、NCI H226細胞
QG-56細胞系相關產(chǎn)品：SY5Y細胞、Tu-686細胞、SB細胞
BEL 7404細胞系相關產(chǎn)品：Colo205細胞、JiyoyeP-2003細胞、HIMEC細胞
H2591細胞系相關產(chǎn)品：Hep G2-Luc細胞、SKOV-3細胞、CEMC7細胞
NMCG-1細胞系相關產(chǎn)品：GM00215細胞、TE-32細胞、CAL 62細胞
CHO細胞系相關產(chǎn)品：MT-2細胞、EVSAT細胞、HECCL-1細胞
INS1細胞系相關產(chǎn)品：OVCAR-8細胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、MRCV細胞
MDA-MB415細胞系相關產(chǎn)品：VMCUB-1細胞、CAL 85-1細胞、Y-1細胞
LICCF細胞系相關產(chǎn)品：Emory University-3細胞、DB細胞、EJ1細胞
WEHI3B細胞系相關產(chǎn)品：OS-732細胞、HepG2/C3A細胞、Madison細胞
TE-85 clone 5細胞系相關產(chǎn)品：TE6細胞、MRC-5細胞、FT-293細胞
CV 1細胞系相關產(chǎn)品：hADSCs細胞、BALL-1細胞、Z310細胞
Ku812F細胞系相關產(chǎn)品：159PT細胞、GC-2細胞、CD-18細胞
EB-1細胞系相關產(chǎn)品：SUP-M2細胞、CTLA4 Ig-24細胞、SUD6細胞
P3-NS1/1-Ag4-1細胞系相關產(chǎn)品：NHLF細胞、NCI-H524細胞、Caco 2細胞
NCI-H2347細胞系相關產(chǎn)品：KATO III細胞、32D/cl3細胞、KAT-5細胞
SNU423細胞系相關產(chǎn)品：OCILY-10細胞、GOTO細胞、EFM192A細胞
HConEpic細胞系相關產(chǎn)品：Vero 76 clone E-6細胞、KP-N-RT細胞、NCIH929細胞
Panc-813細胞系相關產(chǎn)品：IA-LM細胞、PCI:SG-231細胞、OE-19細胞
OUMS-27細胞系相關產(chǎn)品：KYSE270細胞、H774細胞、B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞
HuT78細胞系相關產(chǎn)品：P3J HR1-K細胞、MHCC 97細胞、TALL-1 [Human adult T-ALL]細胞
MGH-U3 (RN)細胞系相關產(chǎn)品：P3X63Ag8細胞、MCF-10 Attached細胞、BV-173細胞
Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細胞系相關產(chǎn)品：H211細胞、CLL-CII細胞、bEnd.3[BEND3]細胞
OSRC2細胞系相關產(chǎn)品：GL261細胞、Hep 3B2.1-7細胞、CA-OV-3細胞
Hca-F epithelioid cells小鼠肝癌細胞系
H-727細胞系相關產(chǎn)品：293A細胞、U251細胞、PK-13細胞
KCL22細胞系相關產(chǎn)品：GC9811-P細胞、Mo7e細胞、NCI-H1105細胞
HPB/ALL細胞系相關產(chǎn)品：SP-2/0-AG14細胞、95D細胞、MDA-MB468細胞
PANC 1005細胞系相關產(chǎn)品：BEP2D細胞、TCCPAN2細胞、CCC-HEL-1細胞
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