"BEP2D epithelioid cells人永生化支氣管上皮細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：支氣管；上皮細(xì)胞；HPV１８轉(zhuǎn)化
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項(xiàng)：１.取細(xì)胞的過程中注意帶好防凍手套，護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要，細(xì)胞凍存管可能漏入液氮，解凍時(shí)凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識(shí)，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對(duì)細(xì)胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對(duì)細(xì)胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會(huì)造成細(xì)胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對(duì)細(xì)胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個(gè)，去除DMSO，去除死細(xì)胞，這個(gè)是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對(duì)一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時(shí)間，轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少，細(xì)胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細(xì)胞會(huì)受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對(duì)細(xì)胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細(xì)胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細(xì)胞解凍時(shí)１ml細(xì)胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問題：試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇１管細(xì)胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細(xì)胞濃度過低，不利于細(xì)胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個(gè)量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會(huì)比較大，就會(huì)影響細(xì)胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時(shí)候?qū)σ话慵?xì)胞沒有什么影響，還有一個(gè)說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
UM-UC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：16HBEo-細(xì)胞、A704細(xì)胞、AN3CA細(xì)胞
J-774細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IMR 90細(xì)胞、A9細(xì)胞、Rat-1細(xì)胞
MDA-MB-231-GFP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EJ細(xì)胞、LuCL4細(xì)胞、BTI-Tn-5B1-4細(xì)胞
細(xì)胞生長：貼壁
BEP2D epithelioid cells人永生化支氣管上皮細(xì)胞系
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請勿超過一個(gè)月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結(jié)凍時(shí)體積會(huì)增加約１０%，必須預(yù)留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會(huì)變得混濁，同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會(huì)因此受到破壞，而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會(huì)影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因?yàn)闀?huì)阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點(diǎn)”：通常經(jīng)過熱處理之血清，沈淀物的形成會(huì)顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點(diǎn)”，常會(huì)誤認(rèn)為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會(huì)使此沈淀物增多，更會(huì)誤認(rèn)為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細(xì)菌之培養(yǎng)基檢測，又沒有污染。一般而言，此小黑點(diǎn)應(yīng)不會(huì)影響細(xì)胞之生長，但若懷疑此血清之品質(zhì)，應(yīng)立即停用，更換另一批號(hào)的血清。
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
SW1990細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU1040細(xì)胞、CACO2細(xì)胞、C-4I細(xì)胞
H-1155細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：143BTK-細(xì)胞、LN 229細(xì)胞、hADSCs細(xì)胞
CRFK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCC-PAN2細(xì)胞、JVM3細(xì)胞、NCI.H522細(xì)胞
SNU-484細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T.T細(xì)胞、KTC-1細(xì)胞、EBNA293細(xì)胞
NE-4C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK-136細(xì)胞、rRMECs細(xì)胞、NuTu-19細(xì)胞
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
BEP2D epithelioid cells人永生化支氣管上皮細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難，最關(guān)鍵幾點(diǎn)：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的，真的很難相信你會(huì)把細(xì)胞養(yǎng)壞；２)動(dòng)作要快，胰酶消化，換液什么，細(xì)胞暴露在空氣中的時(shí)間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時(shí)間，所謂的細(xì)胞狀態(tài)差，很多時(shí)候是傳代的原因；３)有時(shí)間的話，需要細(xì)胞計(jì)數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細(xì)胞的生長曲線，不會(huì)臨時(shí)要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時(shí)間，傳代細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)穿插進(jìn)行，可以節(jié)省很多時(shí)間，也不會(huì)耽誤別人的實(shí)驗(yàn)；５)個(gè)人的實(shí)驗(yàn)器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人，避免相互干擾。每天對(duì)待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)有哪些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無菌操作，多噴噴酒精，要是對(duì)滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時(shí)候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動(dòng)加濕的話盤里的水也會(huì)很臟，勤換(滅菌水加進(jìn)去)；５)晚上離開的時(shí)候給傳代細(xì)胞照紫外，超凈臺(tái)是用完就開；６)是同一時(shí)間就你一個(gè)人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
NCI-H2009細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP 212細(xì)胞、LS 174T細(xì)胞、WEHI3細(xì)胞
D562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIA-PaCa-2細(xì)胞、HFT8810細(xì)胞、SHSY5Y細(xì)胞
SupB15W細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU387細(xì)胞、EOMA細(xì)胞、COLO-16細(xì)胞
Pa18C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-766T細(xì)胞、BSC40細(xì)胞、NCI-441細(xì)胞
NCM460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Metastatic Variant 522細(xì)胞、Panc-02細(xì)胞、NCI-H774細(xì)胞
J82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y1細(xì)胞、SW-480細(xì)胞、CAKI 1細(xì)胞
33604細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMS-18細(xì)胞、H-711細(xì)胞、U118細(xì)胞
H647ell細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SMMC-7721細(xì)胞、C3H10T1/2細(xì)胞、OCIAML4細(xì)胞
MHCC97-H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Homo sapiens No. 578, tumor cells細(xì)胞、RIN m5F細(xì)胞、MC3T3-E1(C4)細(xì)胞
LAN-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH460細(xì)胞、KMM1細(xì)胞、BTI-Tn5B14細(xì)胞
BEP2D epithelioid cells人永生化支氣管上皮細(xì)胞系
TK 10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC-116細(xì)胞、AG06814-N細(xì)胞、CAL851細(xì)胞
FL 62891細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL60細(xì)胞、NCI-SNU-216細(xì)胞、KPL-1細(xì)胞
SUNE 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Buffalo Rat Liver-3A細(xì)胞、SUDHL6細(xì)胞、GLAG-66細(xì)胞
H2009細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF7細(xì)胞、OC-316細(xì)胞、HEK293-H細(xì)胞
H146細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC 3960細(xì)胞、CWR22-Rv1細(xì)胞、HFLS-OA細(xì)胞
C33-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly03細(xì)胞、A-498細(xì)胞、NGP細(xì)胞
C33-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly03細(xì)胞、A-498細(xì)胞、NGP細(xì)胞
OV433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMO6細(xì)胞、SH-SY5Y細(xì)胞、RSC96細(xì)胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 294T細(xì)胞、U-118MG細(xì)胞、HNE-1細(xì)胞
WM 451-Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC2185細(xì)胞、H-716細(xì)胞、MKN 45細(xì)胞
H-196細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC941122細(xì)胞、NCIH510細(xì)胞、X63Ag8-653細(xì)胞
SUM102PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-920細(xì)胞、TE 354.T細(xì)胞、Chang liver細(xì)胞
DoTc2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 688(A).T細(xì)胞、FU-OV-1細(xì)胞、MV4:11細(xì)胞
HFT-8810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1155細(xì)胞、TJ905細(xì)胞、Capan2細(xì)胞
HCO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU368細(xì)胞、Wien 133細(xì)胞、SJSA-1細(xì)胞
MonoMac1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-3細(xì)胞、95C細(xì)胞、C38細(xì)胞
HCS2/8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUSM-1細(xì)胞、CHP126細(xì)胞、H-2227細(xì)胞
A 2780 CP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-620細(xì)胞、SKNBE-1細(xì)胞、NCI-H1838細(xì)胞
MPP 89細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KY180細(xì)胞、Sp 2/0-Ag 14細(xì)胞、INS1細(xì)胞
MPP 89細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KY180細(xì)胞、Sp 2/0-Ag 14細(xì)胞、INS1細(xì)胞
OSKM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMEC/D3細(xì)胞、Hs 839.T細(xì)胞、CCD-841-CoTr細(xì)胞
HAC-84細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-3_27細(xì)胞、KNS62細(xì)胞、Hs-729-T細(xì)胞
143BTK-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H9細(xì)胞、NCIH1770細(xì)胞、HCEC細(xì)胞
OCILY19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hFOB 1.19細(xì)胞、NCIH2029細(xì)胞、Walker-256細(xì)胞
MX-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFE-145細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細(xì)胞、N-2a細(xì)胞
102PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMH2細(xì)胞、COLO 16細(xì)胞、C2C12細(xì)胞
OVHM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV-522細(xì)胞、NCIH1963細(xì)胞、H9c2(2-1)細(xì)胞
HBL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U2-OS細(xì)胞、VSMC細(xì)胞、D324細(xì)胞
KYSE-70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK/293細(xì)胞、NCI-H82細(xì)胞、Nthy-ori 3.1細(xì)胞
OKAC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3JHR1細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細(xì)胞、MC57細(xì)胞
mRTEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLM-14細(xì)胞、MES13細(xì)胞、LL2細(xì)胞
BC-024細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGH-UI細(xì)胞、SUM 159細(xì)胞、MV-1-Lu細(xì)胞
OCI-AML3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0078細(xì)胞、UPCI:SCC90細(xì)胞、P3X63Ag8.653細(xì)胞
HSCT6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LSECs細(xì)胞、BI-Mel細(xì)胞、SVGp12細(xì)胞
BCPAP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCCIT細(xì)胞、X63-AG 8.653細(xì)胞、COLO-357細(xì)胞
Madin Darby Bovine Kidney細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LU65細(xì)胞、JB6 [Mouse]細(xì)胞、H1623細(xì)胞
MCM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P-36細(xì)胞、C3H 10T1/2細(xì)胞、MFE280細(xì)胞
NCI-H510A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：G-292 clone A141B1細(xì)胞、H209細(xì)胞、CL1.0細(xì)胞
NCI-H510A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：G-292 clone A141B1細(xì)胞、H209細(xì)胞、CL1.0細(xì)胞
U-343MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-601細(xì)胞、SW480E細(xì)胞、DB細(xì)胞
CMT 93細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FaDu細(xì)胞、Hs445細(xì)胞、P3/NS-1細(xì)胞
NIE 115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16-F10-BL6細(xì)胞、Bac1 2F5細(xì)胞、NCIH1395細(xì)胞
Hs-606-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKES1細(xì)胞、NCIH1838細(xì)胞、LP-1細(xì)胞
C57 Mouse Tumor 64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BALB/3T3細(xì)胞、MDAPCa2b細(xì)胞、RT-4細(xì)胞
DMS79細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBL-1細(xì)胞、SK MES 1細(xì)胞、BGC-823細(xì)胞
M-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEEpiC細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-415細(xì)胞、RPMI7951細(xì)胞
NCTC clone 1469細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 729T細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-27細(xì)胞、WM 239細(xì)胞
SUM-52細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AG 9細(xì)胞、B16/F0細(xì)胞、HCC 2185細(xì)胞
Blotchy fibroblast-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mevo細(xì)胞、OCI-AML-3細(xì)胞、UMC11細(xì)胞
Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS940細(xì)胞、S.B.細(xì)胞、Ca761細(xì)胞
MLE 12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLA144細(xì)胞、MDA MB 453細(xì)胞、GM03569細(xì)胞
BEP2D epithelioid cells人永生化支氣管上皮細(xì)胞系
SK-MEL-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H28細(xì)胞、Mel624細(xì)胞、NCI-SNU-C1細(xì)胞
P3J.HR1K細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-510A細(xì)胞、AR42J細(xì)胞、MES-13細(xì)胞
LNCaP-ATCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLA 144細(xì)胞、UM-UC-14細(xì)胞、EBTr (NBL-4)細(xì)胞
SupB15W細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU387細(xì)胞、MOPC細(xì)胞、PG [Human lung carcinoma]細(xì)胞
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