"hEM15A epithelioid cells人永生化子宮內(nèi)膜異位癥患者在位內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞;永生化;女性 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞株(系)的使用,為醫(yī)學(xué)研究和測(cè)試工作帶來(lái)了極大的方便。但細(xì)胞的傳代是有限制的,長(zhǎng)期連續(xù)傳代的細(xì)胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細(xì)胞的生長(zhǎng)與形態(tài)等會(huì)有一定退變或轉(zhuǎn)化,因而細(xì)胞失去原有的遺傳特性,有時(shí)還會(huì)由于細(xì)胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實(shí)際工作中常需凍存一定數(shù)量的細(xì)胞,以備替換使用。細(xì)胞冷凍與復(fù)蘇是細(xì)胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。目前,細(xì)胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護(hù)劑的緩慢冷凍法凍存細(xì)胞。細(xì)胞在不加任何保護(hù)劑的情況下直接冷凍,細(xì)胞內(nèi)外的水分會(huì)很快形成冰晶,從而引起一系列不良反應(yīng)。如細(xì)胞脫水使局部電解質(zhì)濃度增高,pH值改變,部分蛋白質(zhì)由于上述原因而變性,引起細(xì)胞內(nèi)部空間結(jié)構(gòu)紊亂,溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶,使細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)成分造成破壞,線粒體腫脹,功能丟失,并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復(fù)合體也易破壞引起細(xì)胞膜通透性的改變,使細(xì)胞內(nèi)容物丟失。如果細(xì)胞內(nèi)冰晶形成較多,隨冷凍溫度的降低,冰晶體積膨脹造成細(xì)胞核DNA空間構(gòu)型發(fā)生不可逆的損傷,而致細(xì)胞死亡。因此,細(xì)胞冷凍技術(shù)的關(guān)鍵是盡可能地減少細(xì)胞內(nèi)水分,減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑,這兩種物質(zhì)分子量小,溶解度大,易穿透細(xì)胞,可以使冰點(diǎn)下降,提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性,且對(duì)細(xì)胞無(wú)明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外,減少胞內(nèi)形成冰結(jié)晶的機(jī)會(huì),從而減少冰晶對(duì)細(xì)胞的損傷。 Becker細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WI38細(xì)胞、L cell line細(xì)胞、PCI:SG231細(xì)胞 LC-2/ad細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-85 clone 5細(xì)胞、SDBMSC細(xì)胞、AG 9細(xì)胞 UM-UC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:16HBEo-細(xì)胞、A704細(xì)胞、AN3CA細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 hEM15A epithelioid cells人永生化子宮內(nèi)膜異位癥患者在位內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞系 細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 冷凍細(xì)胞解凍程序:依據(jù)細(xì)胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例,制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細(xì)胞均無(wú)法立即適應(yīng)不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類,若因?qū)嶒?yàn)需要,必須有所不同時(shí),務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細(xì)胞適應(yīng)后,方進(jìn)行所需之實(shí)驗(yàn)。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清),對(duì)細(xì)胞而言差異極大,請(qǐng)務(wù)必依據(jù)細(xì)胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于37°C水槽中回溫,回溫后噴以70%酒精并擦拭之,移入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)。取出冷凍管,立即放入37°C水槽中快速解凍,水面高度不可接近或高過(guò)冷凍管之蓋沿,否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化后,以70%ethanol擦拭冷凍管外部,移入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)。依據(jù)細(xì)胞種類和濃度,于無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)?。保癿l培養(yǎng)基加至T25或T75flask中。取出已解凍之細(xì)胞懸浮液,緩緩加入T25或T75flask內(nèi)之培養(yǎng)基,混合均勻,放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對(duì)絕大多數(shù)細(xì)胞而言,1%以下之冷凍保護(hù)劑DMSO,不會(huì)對(duì)細(xì)胞之貼附或活化有不良影響,不需立刻由解凍細(xì)胞中去除,待第二天確定細(xì)胞生長(zhǎng)或貼附良好后再去除即可。惟對(duì)極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會(huì)造成細(xì)胞分化之細(xì)胞,需立即去除DMSO者,則可將解凍后之細(xì)胞懸浮液放入5-10ml培養(yǎng)基中,離心300xg(約1000rpm),5分鐘,小心移去上清液,加入適量新鮮培養(yǎng)基,將細(xì)胞均勻混合后,轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中,再放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 NB.4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHL 124細(xì)胞、OV-90細(xì)胞、FDCP1細(xì)胞 CAL-33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 678細(xì)胞、WM451細(xì)胞、hTERT-HPNE細(xì)胞 LAD-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293FT細(xì)胞、PLC-PRF-5細(xì)胞、TB1 Lu細(xì)胞 U87-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1385細(xì)胞、C3H10T1-2細(xì)胞、C33-A細(xì)胞 EOC 20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE(1)n細(xì)胞、HRMC細(xì)胞、CORL23細(xì)胞 細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 hEM15A epithelioid cells人永生化子宮內(nèi)膜異位癥患者在位內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞系 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說(shuō)明書 購(gòu)買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳,原因比較復(fù)雜,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳;血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳;解凍過(guò)程錯(cuò)誤;冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心;懸渾細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞;培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤;細(xì)胞置于-80℃太久等。建議嚴(yán)格參照ATCC的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行細(xì)胞復(fù)蘇、凍存等工作。欲將一般動(dòng)物細(xì)胞離心下來(lái),其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動(dòng)物細(xì)胞,其離心速率一般為300×g(約1O(jiān)OOrpm),5-10分鐘,轉(zhuǎn)速過(guò)高或離心時(shí)間過(guò)長(zhǎng)都將造成細(xì)胞死亡。合適的離心轉(zhuǎn)速是根據(jù)相對(duì)離心力決定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2,其中r為離心機(jī)轉(zhuǎn)軸中心與離心套管底部?jī)?nèi)壁的距離;rpm為離心機(jī)每分鐘的轉(zhuǎn)數(shù);RCF(relative centrifugal force)為相對(duì)離心力,以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍數(shù)來(lái)表示單位。 H-82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH295R細(xì)胞、HEL 299細(xì)胞、PG-BE1細(xì)胞 L132細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 579細(xì)胞、UCLA SO M14細(xì)胞、SK-LMS-1細(xì)胞 Jurkat-E6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Baby Hamster Kidney-21細(xì)胞、WM-451Lu細(xì)胞、NIH 3T6細(xì)胞 HEK 293A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ESC-410細(xì)胞、LC-1/sq細(xì)胞、RGC5細(xì)胞 Lieming Xu-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC細(xì)胞、H810細(xì)胞、U251n細(xì)胞 COLO-357細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU449細(xì)胞、S91細(xì)胞、MM1.S細(xì)胞 CMT-93細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bac1 2F5細(xì)胞、D341MD細(xì)胞、H1105細(xì)胞 MRC9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLEB-3細(xì)胞、NCI-H226細(xì)胞、NCIH510細(xì)胞 HFB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU484細(xì)胞、SUSM-1細(xì)胞、BA/F3細(xì)胞 WSU-DLCL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RL-95-2細(xì)胞、MIO-M1細(xì)胞、CEM/C1細(xì)胞 hEM15A epithelioid cells人永生化子宮內(nèi)膜異位癥患者在位內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞系 SNU354細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI522細(xì)胞、PK (15)細(xì)胞、BN-CL2細(xì)胞 CL1-0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-231細(xì)胞、NCIADR.RES細(xì)胞、PK(15)細(xì)胞 ARH-77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RFL-6細(xì)胞、NCI-N87細(xì)胞、HEK/EBNA細(xì)胞 Hs 636.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFO-27細(xì)胞、HCC1428細(xì)胞、PAa細(xì)胞 P 3 HR 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-31細(xì)胞、Monomac-1細(xì)胞、NCI-HUT-460細(xì)胞 CEM clone 7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NKM-1細(xì)胞、BTI-TN5B1-4細(xì)胞、SW-620細(xì)胞 C-8161細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLB-985細(xì)胞、BS-C-1細(xì)胞、SNU-423細(xì)胞 3T3J2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMRC2細(xì)胞、CAL-39細(xì)胞、HEK-293-FT細(xì)胞 Hs-746T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOZAWA細(xì)胞、CCRF/CEM-C7細(xì)胞、EAhy926細(xì)胞 U-138 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH196細(xì)胞、A549/DDP細(xì)胞、VMRCRCZ細(xì)胞 WM266-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MeT 5A細(xì)胞、OUMS23細(xì)胞、SGC7901細(xì)胞 Panc 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PA317細(xì)胞、TE5細(xì)胞、OCI-Ly01細(xì)胞 A1847細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H345細(xì)胞、NCI-H647細(xì)胞、P-2003細(xì)胞 SU86.86細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NT2D1細(xì)胞、BIC細(xì)胞、H-1435細(xì)胞 Huh7.5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs819.T細(xì)胞、L-WRN細(xì)胞、Mono Mac6細(xì)胞 B-CPAP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MuM-2C細(xì)胞、SW 527細(xì)胞、KYSE 30細(xì)胞 Homo sapiens No. 578, breast cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TMK-1細(xì)胞、Ramos.2G6.4C10細(xì)胞、COLO 206F細(xì)胞 GM3190細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS4-11細(xì)胞、C17.2細(xì)胞、Hep 3B2.1-7細(xì)胞 Hs 739.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U138-MG細(xì)胞、HUVSMC細(xì)胞、OVCA 432細(xì)胞 Murine Thymic Epithelial Cell line 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-84細(xì)胞、Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細(xì)胞、PA I細(xì)胞 P3-NS1/1Ag 4.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SIRC細(xì)胞、VERO C 1008細(xì)胞、H-2122細(xì)胞 HEC-1-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WSU-DLCL2細(xì)胞、U-87 MG細(xì)胞、Ramos.2G6.4C10細(xì)胞 OVCAR4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL45細(xì)胞、Duke University 145細(xì)胞、H-2195細(xì)胞 NT-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CATH.a細(xì)胞、CT 26細(xì)胞、3T3-L1細(xì)胞 Det 562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Loucy細(xì)胞、G402細(xì)胞、NCI-H1882細(xì)胞 P-3J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE14細(xì)胞、NCI-H1944細(xì)胞、VMCUB-1細(xì)胞 THPI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE(2C)細(xì)胞、NBL-12細(xì)胞、HS940細(xì)胞 RKOE6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 190PT細(xì)胞、BCECs細(xì)胞、BC-3-H-I細(xì)胞 THP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBVP細(xì)胞、WM115-mel細(xì)胞、MUTZ3細(xì)胞 Onda 11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE(2)C細(xì)胞、GM02219D細(xì)胞、COLO206細(xì)胞 SKCO 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE32細(xì)胞、JJN3細(xì)胞、MDA-MB 231細(xì)胞 H548細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat, Clone E6-1細(xì)胞、CCD18Co細(xì)胞、TSCCa細(xì)胞 HEC-1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Oka-C1細(xì)胞、SK Col 1細(xì)胞、OEC33細(xì)胞 J45.01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-87細(xì)胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細(xì)胞、KYSE0030細(xì)胞 Murine Lung Epithelial-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-LY-10細(xì)胞、JEG3細(xì)胞、HBVP細(xì)胞 Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FU-97細(xì)胞、OCM-1細(xì)胞、WM-451Lu細(xì)胞 A2780 CP70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Cor L88細(xì)胞、B958細(xì)胞、HELA-GFP細(xì)胞 624細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCMEC細(xì)胞、D10.G4.1細(xì)胞、CMT 64細(xì)胞 SNU-423細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CNE-2細(xì)胞、SRA01/04 (HLE)細(xì)胞、CTLA4 Ig-24細(xì)胞 786-O細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P-19細(xì)胞、Y3M細(xì)胞、KU812-F細(xì)胞 Reuber-H-35 hepatoma細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1588細(xì)胞、MPC5細(xì)胞、SW-527細(xì)胞 NCI-H1703細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC1sq細(xì)胞、NH-6細(xì)胞、OVCAR3細(xì)胞 Be-Wo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-022細(xì)胞、SIRC細(xì)胞、3T3(A31)細(xì)胞 TN5B14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV4;11細(xì)胞、SKES-1細(xì)胞、F56 [Human neoplasm]細(xì)胞 RH30SJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:End1/E6E7細(xì)胞、TCC-SUP細(xì)胞、HT22細(xì)胞 GTL 16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FO [Mouse myeloma]細(xì)胞、UPCISCC154細(xì)胞、MDAMB436細(xì)胞 NCM460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Metastatic Variant 522細(xì)胞、Panc-02細(xì)胞、NCI-H774細(xì)胞 L-5178-Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Clone 929細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330細(xì)胞、GM03569D細(xì)胞 Jiyoye (P-2003)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1299細(xì)胞、COS1細(xì)胞、HMCB細(xì)胞 Clone 166細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-33Co細(xì)胞、COLO 320F細(xì)胞、SV40 MES 13細(xì)胞 MNNG/HOS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2195細(xì)胞、Hs-852-T細(xì)胞、OCI-LY-3細(xì)胞 hEM15A epithelioid cells人永生化子宮內(nèi)膜異位癥患者在位內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞系 CHO cell clone K1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-95細(xì)胞、SKNSH細(xì)胞、HCC9724細(xì)胞 L2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D562細(xì)胞、SK BR 03細(xì)胞、RS1細(xì)胞 BGC823細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM12SM細(xì)胞、Hs 934.T細(xì)胞、HuT 78細(xì)胞 JurkatE6-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker-256-TC細(xì)胞、FU-MMT-1細(xì)胞、H1876細(xì)胞 "
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