"ST2 epithelioid cells小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞系

細(xì)胞背景資料：基質(zhì)；BALB/c

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項(xiàng)：１.取細(xì)胞的過(guò)程中注意帶好防凍手套，護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要，細(xì)胞凍存管可能漏入液氮，解凍時(shí)凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問(wèn)題：凍存液的配置已是常識(shí)，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對(duì)細(xì)胞不是完全無(wú)毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對(duì)細(xì)胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會(huì)造成細(xì)胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對(duì)細(xì)胞的損傷。４.離心問(wèn)題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個(gè)，去除DMSO，去除死細(xì)胞，這個(gè)是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對(duì)一般人來(lái)說(shuō)，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時(shí)間，轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少，細(xì)胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過(guò)了活細(xì)胞會(huì)受壓過(guò)大，死亡。此外在操作過(guò)程中容易污染，所以不推薦。另一種說(shuō)法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對(duì)細(xì)胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇，結(jié)果無(wú)異常。５.細(xì)胞貼壁少的問(wèn)題：教科書中說(shuō)明凍存細(xì)胞解凍時(shí)１ml細(xì)胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問(wèn)題：試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇１管細(xì)胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過(guò)多，細(xì)胞濃度過(guò)低，不利于細(xì)胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問(wèn)題：這個(gè)量的多少的把握主要涉及到的問(wèn)題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會(huì)比較大，就會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng)，從以前的資料來(lái)看，DMSO的濃度在小于０.５%的時(shí)候?qū)σ话慵?xì)胞沒有什么影響，還有一個(gè)說(shuō)法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無(wú)害濃度。

TM4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UC-3細(xì)胞、CWR22R-V1細(xì)胞、TE-11細(xì)胞

HS-294-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSAEC1-KT細(xì)胞、TC-1[JHU-1]細(xì)胞、TALL1細(xì)胞

M4e細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GBCSD細(xì)胞、JeKo 1細(xì)胞、H676B細(xì)胞

細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁

ST2 epithelioid cells小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞系

細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源

細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)

血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請(qǐng)勿超過(guò)一個(gè)月。如果一次無(wú)法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無(wú)菌５０ml離心管中，由于血清結(jié)凍時(shí)體積會(huì)增加約１０%，必須預(yù)留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無(wú)菌，不需再無(wú)菌過(guò)濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過(guò)濾，勿直接過(guò)濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無(wú)菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過(guò)程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會(huì)變得混濁，同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會(huì)因此受到破壞，而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會(huì)影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過(guò)濾。不建議用過(guò)濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因?yàn)闀?huì)阻塞過(guò)濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點(diǎn)”：通常經(jīng)過(guò)熱處理之血清，沈淀物的形成會(huì)顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點(diǎn)”，常會(huì)誤認(rèn)為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會(huì)使此沈淀物增多，更會(huì)誤認(rèn)為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細(xì)菌之培養(yǎng)基檢測(cè)，又沒有污染。一般而言，此小黑點(diǎn)應(yīng)不會(huì)影響細(xì)胞之生長(zhǎng)，但若懷疑此血清之品質(zhì)，應(yīng)立即停用，更換另一批號(hào)的血清。

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

TE671/RD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WB-F344細(xì)胞、NCIH345細(xì)胞、SNU739細(xì)胞

SNU-119細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL7702細(xì)胞、IBRS2細(xì)胞、PaCa2細(xì)胞

Hs-578-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2196細(xì)胞、OKa-C-1細(xì)胞、H-2228細(xì)胞

OVHM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV-522細(xì)胞、NCIH1963細(xì)胞、H9c2(2-1)細(xì)胞

PC12(高分化)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Oregon J-111細(xì)胞、HO-1-N-1細(xì)胞、PC3細(xì)胞

細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系

ST2 epithelioid cells小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞系

細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說(shuō)明書

培養(yǎng)細(xì)胞真的不難，最關(guān)鍵幾點(diǎn)：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的，真的很難相信你會(huì)把細(xì)胞養(yǎng)壞；２)動(dòng)作要快，胰酶消化，換液什么，細(xì)胞暴露在空氣中的時(shí)間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時(shí)間，所謂的細(xì)胞狀態(tài)差，很多時(shí)候是傳代的原因；３)有時(shí)間的話，需要細(xì)胞計(jì)數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線，不會(huì)臨時(shí)要處理，手足無(wú)措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時(shí)間，傳代細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)穿插進(jìn)行，可以節(jié)省很多時(shí)間，也不會(huì)耽誤別人的實(shí)驗(yàn)；５)個(gè)人的實(shí)驗(yàn)器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人，避免相互干擾。每天對(duì)待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)有哪些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無(wú)菌操作，多噴噴酒精，要是對(duì)滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時(shí)候做好支原體衣原體檢測(cè)；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動(dòng)加濕的話盤里的水也會(huì)很臟，勤換(滅菌水加進(jìn)去)；５)晚上離開的時(shí)候給傳代細(xì)胞照紫外，超凈臺(tái)是用完就開；６)是同一時(shí)間就你一個(gè)人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。

BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UO-31細(xì)胞、MC-38細(xì)胞、NIH:OVCAR-8細(xì)胞

S3 HeLa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB 231細(xì)胞、MPVECs細(xì)胞、Melan-a細(xì)胞

WM 239-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCP1細(xì)胞、H-2106細(xì)胞、TE353.SK細(xì)胞

P3-X63Ag8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC 2185細(xì)胞、Reuber H35細(xì)胞、H460細(xì)胞

SK_HEP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WIL2 S細(xì)胞、Panc 03.27細(xì)胞、Hk-2細(xì)胞

UM2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pt K1 (NBL-3)細(xì)胞、MDA-MB-435S細(xì)胞、Molm 14細(xì)胞

NCI H226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Microvascular Endothelial Cell line-1細(xì)胞、HCC78細(xì)胞、BAR-T細(xì)胞

GM05887細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBL.2H3細(xì)胞、H-209細(xì)胞、ZR75_1細(xì)胞

R-1059-D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DanG細(xì)胞、C41細(xì)胞、RBL-1細(xì)胞

MFE 296細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK UT 1細(xì)胞、RPMI-7666細(xì)胞、NCI-SNU-1040細(xì)胞

ST2 epithelioid cells小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞系

SUPT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIN14B細(xì)胞、Hs852T細(xì)胞、Cates 1B細(xì)胞

H-1688細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA330細(xì)胞、LLC-PK-1細(xì)胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細(xì)胞

Hs940T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A549/ATCC細(xì)胞、OCI AML5細(xì)胞、SGC-996細(xì)胞

CCRF-CEM/S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc05.04細(xì)胞、PANC0403細(xì)胞、MLOY4細(xì)胞

CHO K1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 78細(xì)胞、NCIH1623細(xì)胞、NCI-H82細(xì)胞

GLAG-66細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Molm 13細(xì)胞、RPMI7666細(xì)胞、SV-HUC-1細(xì)胞

GLAG-66細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Molm 13細(xì)胞、RPMI7666細(xì)胞、SV-HUC-1細(xì)胞

SBC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC4006細(xì)胞、NCIH716細(xì)胞、RM-1細(xì)胞

MD Anderson-Metastatic Breast-468細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：YH-13細(xì)胞、SLK細(xì)胞、NCIH1869細(xì)胞

MOPC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-294細(xì)胞、GM3570細(xì)胞、C57 Mouse Tumor 64細(xì)胞

SKNFI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細(xì)胞、NCI-H1155細(xì)胞、WBF344細(xì)胞

CHP100細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR-5細(xì)胞、NCI-1155細(xì)胞、PLB985細(xì)胞

A-673細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2085細(xì)胞、Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細(xì)胞、KG-1a細(xì)胞

Hs 746.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK_N_BE2C細(xì)胞、U87 MG細(xì)胞、Pt K2 (NBL-5)細(xì)胞

RAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC2279細(xì)胞、NCIH2122細(xì)胞、HM06.A1細(xì)胞

HCC-2108細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Embryonic Skin細(xì)胞、N-9細(xì)胞、KYSE-520細(xì)胞

X63Ag8-653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCMEC(BL12-H)細(xì)胞、HCCLM3細(xì)胞、GNM細(xì)胞

HMC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ML-2細(xì)胞、NCI-H711細(xì)胞、H35 Reuber細(xì)胞

OVCAR8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC4細(xì)胞、SKRC-39細(xì)胞、Panc4.03細(xì)胞

MPC11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GalK 1細(xì)胞、H1238細(xì)胞、CF-PAC1細(xì)胞

HLF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-T6細(xì)胞、NCI-H774細(xì)胞、SW-1222細(xì)胞

K7M2 wt細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caov-4細(xì)胞、J-774A.1細(xì)胞、Jeko1細(xì)胞

COLO-205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1105細(xì)胞、COV 434細(xì)胞、NMCG-1細(xì)胞

NHA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPP-89細(xì)胞、CNE細(xì)胞、NIE 115細(xì)胞

KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150

細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1299細(xì)胞、SUP-B15細(xì)胞、C6細(xì)胞

Hs 888.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SPDC-CCL141細(xì)胞、LC-MS細(xì)胞、TCC-PAN2細(xì)胞

Laboratory of Allergic Diseases 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL-1細(xì)胞、Hep 3B2_1-7細(xì)胞、GM-215細(xì)胞

GalK 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Homo sapiens No. 578, breast cells細(xì)胞、HEB細(xì)胞、WiDr細(xì)胞

SNU1040細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：16HBE14o-細(xì)胞、PLA-801D細(xì)胞、RSC 96細(xì)胞

H22-H8D8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHL1細(xì)胞、NCI-H69C細(xì)胞、HS-294-T細(xì)胞

HFB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU484細(xì)胞、SUSM-1細(xì)胞、BA/F3細(xì)胞

NCIH1693細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C4-2 B細(xì)胞、Metastatic Variant-522細(xì)胞、COLO-320DM細(xì)胞

LP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE520細(xì)胞、Colon26細(xì)胞、HIBEC細(xì)胞

NCI H23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-747細(xì)胞、C4-2B細(xì)胞、SCCVII細(xì)胞

CD18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LUDLU 1細(xì)胞、MARC-145細(xì)胞、HCC0827細(xì)胞

SK-N-MC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-02細(xì)胞、TE354T細(xì)胞、MDA-MB231細(xì)胞

16HBEo-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH3255細(xì)胞、MH7A細(xì)胞、aNK細(xì)胞

T2(174 x CEM.T2)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC.1細(xì)胞、H295R細(xì)胞、CNE2Z細(xì)胞

HS-683細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTori3細(xì)胞、OK-WT細(xì)胞、HCC 38細(xì)胞

SW-982細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LADMAC細(xì)胞、C4I細(xì)胞、YD-38細(xì)胞

Karpas 299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNE-1細(xì)胞、AML-12細(xì)胞、RINm5F細(xì)胞

NCI-H727細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-ALL 1細(xì)胞、NCI-H1993細(xì)胞、KG-1細(xì)胞

C8166-CD4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KRCY細(xì)胞、CAL 27細(xì)胞、SMMC 7721細(xì)胞

U138MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT3細(xì)胞、Y3.AG.1.2.3細(xì)胞、MSTO-211 H細(xì)胞

P388.D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKHEP1細(xì)胞、BT 549細(xì)胞、U-87MG ATCC細(xì)胞

LTEP-sm 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mono-Mac-6細(xì)胞、UPCI-SCC-090細(xì)胞、SNU-475細(xì)胞

NFS-60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-600-T細(xì)胞、MeSoTheliOma-211H細(xì)胞、293 H細(xì)胞

SKNAS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNK-6細(xì)胞、Super Tube細(xì)胞、NIH:OVCAR4細(xì)胞

Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：18G3.cl 1細(xì)胞、NCIH226細(xì)胞、Pa16C細(xì)胞

HLF-a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TW01細(xì)胞、MDAMB330細(xì)胞、COLO.205細(xì)胞

RC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HR-1細(xì)胞、HPDE細(xì)胞、OKT3細(xì)胞

ST2 epithelioid cells小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞系

HT29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 962細(xì)胞、OVCA-432細(xì)胞、HCT_116細(xì)胞

SUD-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHOK1細(xì)胞、P3-x63-Ag8 653細(xì)胞、Experimental Mammary Tumour-6細(xì)胞

786-O RCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SMA 560細(xì)胞、OVCAR-10細(xì)胞、ONS76細(xì)胞

WM 239-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCP1細(xì)胞、Strain L-929細(xì)胞、OV-1063細(xì)胞

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