"SF767 epithelioid cells人腦瘤細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:腦瘤;女性 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞株(系)的使用,為醫(yī)學(xué)研究和測試工作帶來了極大的方便。但細(xì)胞的傳代是有限制的,長期連續(xù)傳代的細(xì)胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細(xì)胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉(zhuǎn)化,因而細(xì)胞失去原有的遺傳特性,有時還會由于細(xì)胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實(shí)際工作中常需凍存一定數(shù)量的細(xì)胞,以備替換使用。細(xì)胞冷凍與復(fù)蘇是細(xì)胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。目前,細(xì)胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護(hù)劑的緩慢冷凍法凍存細(xì)胞。細(xì)胞在不加任何保護(hù)劑的情況下直接冷凍,細(xì)胞內(nèi)外的水分會很快形成冰晶,從而引起一系列不良反應(yīng)。如細(xì)胞脫水使局部電解質(zhì)濃度增高,pH值改變,部分蛋白質(zhì)由于上述原因而變性,引起細(xì)胞內(nèi)部空間結(jié)構(gòu)紊亂,溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶,使細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)成分造成破壞,線粒體腫脹,功能丟失,并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復(fù)合體也易破壞引起細(xì)胞膜通透性的改變,使細(xì)胞內(nèi)容物丟失。如果細(xì)胞內(nèi)冰晶形成較多,隨冷凍溫度的降低,冰晶體積膨脹造成細(xì)胞核DNA空間構(gòu)型發(fā)生不可逆的損傷,而致細(xì)胞死亡。因此,細(xì)胞冷凍技術(shù)的關(guān)鍵是盡可能地減少細(xì)胞內(nèi)水分,減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑,這兩種物質(zhì)分子量小,溶解度大,易穿透細(xì)胞,可以使冰點(diǎn)下降,提高細(xì)胞膜對水的通透性,且對細(xì)胞無明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外,減少胞內(nèi)形成冰結(jié)晶的機(jī)會,從而減少冰晶對細(xì)胞的損傷。 MDCK supertube細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MF2059細(xì)胞、NCIH1693細(xì)胞、NBL-4細(xì)胞 SKCO1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3M-1E8細(xì)胞、NG108-15細(xì)胞、RBVEC細(xì)胞 GM-3573細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD18細(xì)胞、COLO-394細(xì)胞、CCRF-CEM C7細(xì)胞 細(xì)胞生長:貼壁 SF767 epithelioid cells人腦瘤細(xì)胞系 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗(yàn)分享:支原體是一類缺乏細(xì)胞壁的原核細(xì)胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細(xì)胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細(xì)胞培養(yǎng)中生長,營養(yǎng)要求比細(xì)菌高。細(xì)胞培養(yǎng)(特別是傳代細(xì)胞)被支原體污染是個世界性問題。在細(xì)胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達(dá)到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細(xì)胞的DNA,RNA及蛋白表達(dá),又不能通過可視法對其進(jìn)行檢測,而且它對細(xì)胞的生長率影響較小,不易引起注意。國內(nèi)外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細(xì)胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細(xì)胞的支原體種類是很多的,國外調(diào)查證明,大約有二十多種支原體能污染細(xì)胞,有的細(xì)胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細(xì)胞造成的交叉污染、實(shí)驗(yàn)器材帶來的污染和用來制備細(xì)胞的原始組織或器官的污染。組織細(xì)胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個方面來預(yù)防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴(yán)格實(shí)驗(yàn)操作;細(xì)胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細(xì)胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細(xì)胞后,特別是重要的細(xì)胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補(bǔ)體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細(xì)胞壁,一般來講,對作用于細(xì)胞壁生物合成的抗生素,如萬古霉素等完全不敏感;對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用,所以常不用來作為支原體感染的化學(xué)治療劑。 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 NCI-H2342細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:174xCEM.T2細(xì)胞、NCIH889細(xì)胞、hEEC細(xì)胞 FL-83B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW954細(xì)胞、Hi-5細(xì)胞、MDA175細(xì)胞 SKCO 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE32細(xì)胞、JJN3細(xì)胞、MDA-MB 231細(xì)胞 Madison 109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-BL2141細(xì)胞、SK RC 52細(xì)胞、H510細(xì)胞 IM 9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3 J2細(xì)胞、16HBEo-細(xì)胞、PANC 203細(xì)胞 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 SF767 epithelioid cells人腦瘤細(xì)胞系 細(xì)胞生長特性:貼壁 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書 購買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,原因比較復(fù)雜,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳;血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳;解凍過程錯誤;冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心;懸渾細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞;培養(yǎng)溫度使用錯誤;細(xì)胞置于-80℃太久等。建議嚴(yán)格參照ATCC的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行細(xì)胞復(fù)蘇、凍存等工作。欲將一般動物細(xì)胞離心下來,其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動物細(xì)胞,其離心速率一般為300×g(約1O(jiān)OOrpm),5-10分鐘,轉(zhuǎn)速過高或離心時間過長都將造成細(xì)胞死亡。合適的離心轉(zhuǎn)速是根據(jù)相對離心力決定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2,其中r為離心機(jī)轉(zhuǎn)軸中心與離心套管底部內(nèi)壁的距離;rpm為離心機(jī)每分鐘的轉(zhuǎn)數(shù);RCF(relative centrifugal force)為相對離心力,以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍數(shù)來表示單位。 MDA-415細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUVEC細(xì)胞、Mouse INsulinoma 6細(xì)胞、C22 (Clara)細(xì)胞 SW-1417細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat FHCRC細(xì)胞、NCI-H889細(xì)胞、JURKAT E-6.1細(xì)胞 HL-60 Clone 15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HHUA細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 7666細(xì)胞、TE-6細(xì)胞 Caco-2/BBe細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TB-1 Lu細(xì)胞、NB4細(xì)胞、TE 671細(xì)胞 Mel-624細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCK81細(xì)胞、OCI-Ly8細(xì)胞、KYSE-30細(xì)胞 CCRF.CEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCIAML2細(xì)胞、SUDHL-16細(xì)胞、Hs 688(A).T細(xì)胞 MC-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OE-21細(xì)胞、SUDHL8細(xì)胞、HeLa S3細(xì)胞 CP70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUTU80細(xì)胞、HEL-92-1-7細(xì)胞、NCI-N87細(xì)胞 HFT 8810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-85-1細(xì)胞、MPC 11細(xì)胞、HEC-151細(xì)胞 SKNBE(1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WERI-Rb 1細(xì)胞、HCC-1588細(xì)胞、NBL_S細(xì)胞 SF767 epithelioid cells人腦瘤細(xì)胞系 P19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE140細(xì)胞、LN-18細(xì)胞、L 363細(xì)胞 WM-239-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Daudi細(xì)胞、Jurkat (clone E6-1)細(xì)胞、MKN-28細(xì)胞 H-810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKRC-42細(xì)胞、COLO-320DM細(xì)胞、H 9細(xì)胞 SKRC 39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JM1細(xì)胞、HOCF細(xì)胞、NCI H69細(xì)胞 Vero細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H3255細(xì)胞、A-375SM細(xì)胞、32D.3細(xì)胞 HS-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293-F細(xì)胞、HEK293細(xì)胞、TN5B14細(xì)胞 HS-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293-F細(xì)胞、HEK293細(xì)胞、TN5B14細(xì)胞 32Dcl3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH3T3細(xì)胞、A 2780 CP細(xì)胞、WPMY-1細(xì)胞 B16 melanoma細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:As-PC1細(xì)胞、End1/E6E7細(xì)胞、H889細(xì)胞 C-33-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PVEC細(xì)胞、293c18細(xì)胞、NCI-H2107細(xì)胞 CV-1.K細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVMANA細(xì)胞、Ku812F細(xì)胞、RH8994細(xì)胞 COR-L26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EJ 138細(xì)胞、Psi2 DAP細(xì)胞、JB-6細(xì)胞 NCI H295R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1092細(xì)胞、RERFLCMS細(xì)胞、SUIT2細(xì)胞 HPB-ALL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Eca 109細(xì)胞、H3396細(xì)胞、PCI-4.2細(xì)胞 EB3 [Human Burkitt lymphoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Okayama University Medical School-27細(xì)胞、H929細(xì)胞、SW480E細(xì)胞 RIN-m5F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIN87細(xì)胞、CCC-HHM-2細(xì)胞、639V細(xì)胞 U-2OS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT 112細(xì)胞、OLN93細(xì)胞、NS653細(xì)胞 P3X63 AG 8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C33細(xì)胞、P-2003細(xì)胞、PANC-10-05細(xì)胞 OCI AML4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF細(xì)胞、H-1770細(xì)胞、T-HEECs細(xì)胞 COLO320HSR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2110細(xì)胞、SuDHL 4細(xì)胞、H2073細(xì)胞 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