"MPC-5 epithelioid cells小鼠腎足細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:腎足細(xì)胞;SV40轉(zhuǎn)化 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞傳代培養(yǎng)實(shí)驗(yàn):體外培養(yǎng)的原代細(xì)胞或細(xì)胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細(xì)胞株或得到大量的同種細(xì)胞,并維持細(xì)胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細(xì)胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細(xì)胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進(jìn)行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細(xì)胞“一代”指從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細(xì)胞世代或倍增不同。在一代中,細(xì)胞培增3~6次。細(xì)胞傳代后,一般經(jīng)過三個(gè)階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細(xì)胞分裂指數(shù)表示細(xì)胞增殖的旺盛程度,即細(xì)胞群的分裂相數(shù)/100個(gè)細(xì)胞。一般細(xì)胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細(xì)胞可達(dá)3~5%;細(xì)胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時(shí)期,稱指數(shù)增生期(對(duì)數(shù)生長期),適宜進(jìn)行各種試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)步驟:1.將長成的培養(yǎng)細(xì)胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺(tái)中倒掉瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細(xì)胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細(xì)胞,如果細(xì)胞變圓,相互之間不再連接成片,這時(shí)應(yīng)立即在超凈臺(tái)中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細(xì)胞懸液。3.將細(xì)胞懸液吸出2ml左右,加到另一個(gè)培養(yǎng)瓶中并向每個(gè)瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細(xì)胞在2小時(shí)左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶?jī)?nèi)形成單層,需要再次進(jìn)行傳代。 SACCLM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK 293細(xì)胞、HCT/Taxo1細(xì)胞、Det. 562細(xì)胞 JROECL 19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BI-Mel細(xì)胞、KRC Y細(xì)胞、HBSMC細(xì)胞 Pt K1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ly18細(xì)胞、PZ-HPV-7細(xì)胞、H2452細(xì)胞 細(xì)胞生長:貼壁 MPC-5 epithelioid cells小鼠腎足細(xì)胞系 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞傳代的一般方法:開始細(xì)胞傳代前,仔細(xì)檢查細(xì)胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細(xì)胞(單層細(xì)胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細(xì)胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細(xì)胞吹打管(20ml)(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)、C02 孵箱、超凈臺(tái)、倒置顯微鏡、4℃、-20℃冰箱;操作步驟:鏡檢細(xì)胞,挑選生長狀態(tài)良好,細(xì)胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細(xì)胞。配制細(xì)胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內(nèi),加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細(xì)胞;先用PBS洗液沖洗細(xì)胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細(xì)胞瓶?jī)?nèi)加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細(xì)胞瓶平放,使消化液完全覆蓋細(xì)胞表面。至細(xì)胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液吹打分散細(xì)胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝,然后補(bǔ)加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。(由細(xì)胞接種濃度決定);填寫傳代記錄。 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 BNL.1ME A.7R.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H740細(xì)胞、NCI-SNU-C1細(xì)胞、3T3-Swiss albino細(xì)胞 NHRF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-341 Med細(xì)胞、MB 157細(xì)胞、IOSE 29細(xì)胞 X63-Ag8-653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CemT4細(xì)胞、C-4-I細(xì)胞、NCIH1155細(xì)胞 RASMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly8細(xì)胞、TPC-1細(xì)胞、WSU-DLCL-2細(xì)胞 HDF-a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-330細(xì)胞、HCC-38細(xì)胞、MILE SVEN 1細(xì)胞 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 MPC-5 epithelioid cells小鼠腎足細(xì)胞系 細(xì)胞生長特性:貼壁 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書 細(xì)胞凍存的步驟:1)選擇處于對(duì)數(shù)生長期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細(xì)胞類型來選擇;3)將分裝上述細(xì)胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細(xì)胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。 Eca109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H283細(xì)胞、B104 [Rat neuroblastoma]細(xì)胞、H1341細(xì)胞 LS-123細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 739.T細(xì)胞、HEK293-F細(xì)胞、H2330細(xì)胞 VAESBJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ELD-1細(xì)胞、NCI-H322T細(xì)胞、MyLa2059細(xì)胞 SK-MES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:624-mel細(xì)胞、BBE細(xì)胞、MPP 89細(xì)胞 OVTOKO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RL-65細(xì)胞、Tn 5B1-4細(xì)胞、ketr 3細(xì)胞 KCL-22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Central Adrenergic TH-expressing a細(xì)胞、MKN28細(xì)胞、SaOS細(xì)胞 NTera 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:N1E115細(xì)胞、NK62a細(xì)胞、NCI-H295細(xì)胞 RA-FLSs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0044細(xì)胞、ZR75-30細(xì)胞、L6細(xì)胞 HANK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAF-II/CD18細(xì)胞、Hs274T細(xì)胞、NCI-H1618細(xì)胞 LTEP-sm細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H146細(xì)胞、293/EBNA細(xì)胞、HFL-I細(xì)胞 MPC-5 epithelioid cells小鼠腎足細(xì)胞系 MOLT16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J774A1細(xì)胞、NCIH292細(xì)胞、NeHepLxHT細(xì)胞 MFM223細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TMD8細(xì)胞、Hepatoma 22細(xì)胞、P3J-HR-1細(xì)胞 ZR75-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSB-1細(xì)胞、SF126細(xì)胞、Large Cell Lung Cancer-103H細(xì)胞 JeKo 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAF-2細(xì)胞、TE-8細(xì)胞、hOMF細(xì)胞 OKT 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-638細(xì)胞、ROS17/2.8細(xì)胞、SK-N-BE(2)-M17細(xì)胞 NCI-H1944細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL2H3細(xì)胞、RA細(xì)胞、NCI-H596細(xì)胞 NCI-H1944細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL2H3細(xì)胞、RA細(xì)胞、NCI-H596細(xì)胞 NCI-H719細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ca 9-22細(xì)胞、HLEC細(xì)胞、JG細(xì)胞 Line 207細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1806細(xì)胞、BC-022細(xì)胞、U251-MG細(xì)胞 HOS (TE85, Clone F5)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JurkatE6-1細(xì)胞、HGE細(xì)胞、OCI-Ly03細(xì)胞 NCIH889細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS180細(xì)胞、SK-HEP-1細(xì)胞、FHL 124細(xì)胞 CHAGOK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caov-3細(xì)胞、NCIH1417細(xì)胞、H322T細(xì)胞 YAC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NUGC-2細(xì)胞、SUDHL5細(xì)胞、MCA-205細(xì)胞 RPE-hTERT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:alpha TC1.6細(xì)胞、NTERA2細(xì)胞、D-283MED細(xì)胞 J-774A.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM-CCRF細(xì)胞、OCI-Ly 19細(xì)胞、PC12(高分化)細(xì)胞 HCE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC-1-A細(xì)胞、SMA560細(xì)胞、LUDLU-1細(xì)胞 AMO-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Th17細(xì)胞、SSP-25細(xì)胞、VP303細(xì)胞 ECC-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LICR-LON-HN6-R細(xì)胞、Z138細(xì)胞、MDA-MB436細(xì)胞 COV-362細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BAEC細(xì)胞、MKN45細(xì)胞、PLB 985細(xì)胞 Dunn LM8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:343MG細(xì)胞、Fortner's melanotic melanoma #3細(xì)胞、BMSCs(mBMSCs)細(xì)胞 ATN1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOR 10細(xì)胞、GM-215細(xì)胞、H-727細(xì)胞 H-838細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCLP-1細(xì)胞、ACC3細(xì)胞、IMR 90細(xì)胞 IPEC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3 (Jiyoye)細(xì)胞、CCRF/CEM/0細(xì)胞、SKNO1細(xì)胞 HS 683T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H522細(xì)胞、U266細(xì)胞、3T3-Swiss細(xì)胞 SF 763細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM2131細(xì)胞、RD細(xì)胞、HT-29細(xì)胞 SK-BR3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN-74細(xì)胞、DMS-114細(xì)胞、Tohoku Hospital Pediatrics-1細(xì)胞 C2C12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OC 316細(xì)胞、COLO-HSR細(xì)胞、RPE D407細(xì)胞 Centre Antoine Lacassagne-39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mv 1 Lu (NBL-7)細(xì)胞、High 5細(xì)胞、CD 18細(xì)胞 HT1197細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:190PT細(xì)胞、MKN1細(xì)胞、A-375細(xì)胞 EJ-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Functional Liver Cell-7細(xì)胞、FHCRC subclone 11細(xì)胞、Cor L88細(xì)胞 AMO-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Th17細(xì)胞、SSP-25細(xì)胞、VP303細(xì)胞 T173細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep-G2/C3A細(xì)胞、GOS3細(xì)胞、SUNE-1細(xì)胞 786-O細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P-19細(xì)胞、Y3M細(xì)胞、KU812-F細(xì)胞 SKml2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3/X63-Ag8細(xì)胞、C-32細(xì)胞、MOLM16細(xì)胞 BIC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BALB/c 3T3 clone A31細(xì)胞、SW-756細(xì)胞、ONS76細(xì)胞 LC1/Sq細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 822.T細(xì)胞、Be-Wo細(xì)胞、HCC-1806細(xì)胞 AKR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PA-TU S細(xì)胞、RS 4;11細(xì)胞、184A1細(xì)胞 CTSC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFF細(xì)胞、Nb2-11細(xì)胞、SU-DHL-5細(xì)胞 H-2141細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:67NR細(xì)胞、TK10細(xì)胞、bEND.3細(xì)胞 NCIH2342細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RTMC細(xì)胞、ssMCF-7細(xì)胞、CAL148細(xì)胞 Hep2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-660細(xì)胞、hFOB1.19細(xì)胞、LICR-LON-HN6-R細(xì)胞 Swiss 3T6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM02219D細(xì)胞、C3H/10T1/2-clone8細(xì)胞、KM-12細(xì)胞 EA hy 926細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM00637B細(xì)胞、SUDHL-6細(xì)胞、HS-68細(xì)胞 MOLT 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H676B細(xì)胞、NBLAN5T細(xì)胞、TMK-1細(xì)胞 MIHA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCS-2/8細(xì)胞、NPC-039細(xì)胞、PaTu8988s細(xì)胞 NCI-H2405細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-134VI細(xì)胞、OV3121細(xì)胞、MHHCALL2細(xì)胞 MDA-MB-435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H28細(xì)胞、3T3 L1細(xì)胞、HEK 293FT細(xì)胞 RPMI8226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TERT-RPE1細(xì)胞、PLA801-95C細(xì)胞、LIPF178C細(xì)胞 LIM-1215細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC0327細(xì)胞、CEMx721.174.T2細(xì)胞、GM00637F細(xì)胞 FF-WT-BJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hTERT-HPNE細(xì)胞、R 2 C細(xì)胞、H-4細(xì)胞 Human Kidney-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1975細(xì)胞、B16-F10細(xì)胞、H-1876細(xì)胞 MPC-5 epithelioid cells小鼠腎足細(xì)胞系 OVCA-433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS細(xì)胞、NCC-IT細(xì)胞、Bowes melanoma cells細(xì)胞 KE37細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2107細(xì)胞、Normal Rat Kidney-52E細(xì)胞、H1623細(xì)胞 HL60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MT-3 [Human leukocytes]細(xì)胞、SVOG細(xì)胞、GM05384細(xì)胞 VAESBJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ELD-1細(xì)胞、H-2108細(xì)胞、Malme-3 M細(xì)胞 "
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