"CPAE epithelioid cells牛肺血管內(nèi)皮細胞系
細胞背景資料:肺血管;內(nèi)皮細胞
細胞形態(tài):上皮細胞樣
貼壁消化難題:1,先用PBS 把細胞洗兩遍,使瓶內(nèi)沒有血清了,減少對胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細胞有些消化下來時,拿著瓶口,運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體,這樣細胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團、絮狀:消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話,一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗,則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細胞,收集全部的細胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落,在換液的時候可以清除掉!
NCI-H748細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARH 77細胞、Embryonic Bovine Tracheal cells細胞、COR-L26細胞
PC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCK-2細胞、NCI-H1770細胞、NUGC3細胞
NCIH1651細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KG-1細胞、HuT 78細胞、NCIH1792細胞
細胞生長:貼壁
CPAE epithelioid cells牛肺血管內(nèi)皮細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–20~-70℃,若存放于4℃,請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶,可將40~45ml分裝于無菌50ml離心管中,由于血清結(jié)凍時體積會增加約10%,必須預(yù)留此膨脹體積之空間,否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌,不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾,勿直接過濾血清。瓶裝(500ml)血清解凍步驟(逐步解凍法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室溫下全溶后再分裝,一般以50ml無菌離心管可分裝40~45ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞,而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物:發(fā)生之原因有許多種,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成,這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物,可用離心3000rpm,5min去除,或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物,因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”:通常經(jīng)過熱處理之血清,沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”,常會誤認為血清遭受污染,而將血清放在37℃中欲培養(yǎng)此“微生物”,但在37℃環(huán)境下,又會使此沈淀物增多,更會誤認為微生物之增殖,但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測,又沒有污染。一般而言,此小黑點應(yīng)不會影響細胞之生長,但若懷疑此血清之品質(zhì),應(yīng)立即停用,更換另一批號的血清。
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
N87細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HDSMC細胞、Th17細胞、L-M(TK-)細胞
MCA 38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MeSoTheliOma-211H細胞、NSI/1-Ag4-1細胞、GC-1spg細胞
Ly19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CRFK細胞、SuperTube細胞、NB9細胞
alphaTC1 Clone 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF.CEM細胞、HBE135-E6E7細胞、ZR-75-1細胞
H-1930細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PaCa2細胞、HS-294-T細胞、253J-BV細胞
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
CPAE epithelioid cells牛肺血管內(nèi)皮細胞系
細胞生長特性:貼壁
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
細胞接收后的操作流程與注意事項:1)如果細胞為貼壁細胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請及時聯(lián)系實驗室技術(shù)人員會跟進解決;2)貼壁細胞生長緩慢;適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長不均:貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。
32Dcl3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH3T3細胞、A 2780 CP細胞、WPMY-1細胞
SRA01/04細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-149PT細胞、MAEC細胞、Colo-201細胞
HUASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HC11細胞、SKLU01細胞、hTERT-HME1細胞
HPC-Y5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM02131A細胞、H1694細胞、IEC 6細胞
SUD4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HNTEC細胞、T HEECs細胞、Hs688(A)T細胞
293 F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Huh-7.5.1細胞、RS4-11細胞、U87細胞
MCF 7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293-GP細胞、MyLa2059細胞、NCI-H2444細胞
AU 565細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Det 562細胞、OCM1細胞、WC00097細胞
Helacyton gartleri細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCGC細胞、VP229細胞、RBL.2H3細胞
Kit 225細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCC-IT細胞、MC3T3-L1細胞、NFHIOSE-29細胞
CPAE epithelioid cells牛肺血管內(nèi)皮細胞系
TR 146細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1222細胞、SNB19細胞、KM H-2細胞
Calf Pulmonary Artery 47細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKRC-20細胞、MKN-74細胞、Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細胞
OVCAR-8/ADR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Psi2 DAP細胞、MDAMB134VI細胞、X63-Ag8-653細胞
RS4;11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150
細胞、Colo741細胞、D10G41細胞
CCD-19Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTh74細胞、Pt K1 (NBL-3)細胞、H358細胞
Jurkat細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pt-K1細胞、ACC2細胞、mRMEC細胞
Jurkat細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pt-K1細胞、ACC2細胞、mRMEC細胞
H-250細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H520細胞、Functional Liver Cell-7細胞、OUMS-27細胞
HEB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMS26細胞、H-847細胞、EB1細胞
Hs604T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TSCCa細胞、P3X63細胞、GA-10 clone 4細胞
LA795細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero from pool #76細胞、HLF-a細胞、OVCAR-5細胞
HEK 293-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs870T細胞、KYSE510細胞、PLA801-95C細胞
SK-NEP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL II細胞、Dunn LM8細胞、COLO-829細胞
8305C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN28細胞、NCI-H719細胞、SK-MEL2細胞
RIN-m 14B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1783細胞、SHG44細胞、SupB15W細胞
MPC-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-886細胞、NCIH1703細胞、MOLM-14細胞
HCC1833細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBL-100細胞、NGEC細胞、HUT-125細胞
Monomac-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2228細胞、Panc 10.05細胞、SUM190細胞
CCC-HIE-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293EBNA細胞、293 H細胞、Gejiu Lung Carcinoma-82細胞
NCI-H1770細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKGIIIA細胞、HuH28細胞、TK.10細胞
HPAF-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM.12細胞、HC11 Mammary Epithelium細胞、Hs 832(C).T細胞
Mel-MeWo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UK Pan-1細胞、K562細胞、P3HR1-BL細胞
MDCK.2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Michigan Cancer Foundation-10A細胞、Shadyside Hospital Pittsburgh-77細胞、Hep G2-Luc細胞
NCIH2286細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IHH-4細胞、Roswell Park Memorial Institute 8402細胞、HCT/Taxo1細胞
McARH7777細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIADR.RES細胞、MRCV細胞、MASMC細胞
IB-RS2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1417細胞、MKN-45細胞、OUMS-23細胞
KYSE 450細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Med 283細胞、WM239細胞、SNU354細胞
MDA PCa 2b細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO357細胞、NCI-H78細胞、HCT/FU細胞
Walker/LLC-WRC 256細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM05384細胞、Panc8.13細胞、HCT 8細胞
H2452細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BrCL12細胞、PTK2細胞、EB2細胞
TCam-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMES-1細胞、NB-9細胞、HFF細胞
CCD 1112SK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-432細胞、OV1-P細胞、H-1650細胞
CEM-CCRF (CAMR)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-358細胞、SKM-1細胞、Epstein-Barr-3細胞
HCa/16A3-F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHEP1細胞、CCK-81細胞、RA.1細胞
NFS-60細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-600-T細胞、MeSoTheliOma-211H細胞、293 H細胞
PTK-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC97L細胞、SUDHL-1細胞、Ramos (RA 1)細胞
KE37細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2107細胞、J111細胞、M14細胞
Hs 766.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH838細胞、HPMC細胞、HT 1376.T細胞
HS-940-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs940-T細胞、WILL-2細胞、HSF2細胞
FRO細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H441-4細胞、hUC-MSC細胞、H716細胞
QGY7703細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat77細胞、PK-15細胞、SuDHL 5細胞
HEK 293T/17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKML-28細胞、FHs 74 Int細胞、BHT-101細胞
Wistar Institute-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK(15)細胞、WM115細胞、PC 61-5-3細胞
SW-1783細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRhK4細胞、CHOK1細胞、U14細胞
C3H10T1/2 clone8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COS-1細胞、MCF10A細胞、NCIH322細胞
B-cell with DC Morphology細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL2細胞、Caco-2/ATCC細胞、CA46細胞
DMS-79細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U031細胞、AM38細胞、UMUC1細胞
H2405細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BALL-1細胞、C3H/10T1/2 CL8細胞、P3 NS1 Ag4細胞
L5178Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Transformed Human Liver Epithelial-3細胞、J774.A1細胞、PL-5細胞
COV 434細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK/EBNA細胞、SKNBE2C細胞、HT1197細胞
NCI-H2171細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AN3細胞、Walker/LLC-WRC 256細胞、RCK8細胞
CPAE epithelioid cells牛肺血管內(nèi)皮細胞系
HPAF II細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細胞、Caki-1細胞、NUGC2細胞
TMK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMEC細胞、SW-1271細胞、H-2141細胞
MADB 106細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT FET細胞、RCK-8細胞、A431細胞
HT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM35細胞、NCI-H460細胞、HEK293EBNA細胞
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