"SVG p12 epithelioid cells人星形膠質(zhì)細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：星形膠質(zhì)細(xì)胞；SV４０轉(zhuǎn)化；男性
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項：１.取細(xì)胞的過程中注意帶好防凍手套，護(hù)目鏡。此項尤為重要，細(xì)胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細(xì)胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細(xì)胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細(xì)胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細(xì)胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細(xì)胞，這個是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少，細(xì)胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細(xì)胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細(xì)胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細(xì)胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細(xì)胞解凍時１ml細(xì)胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇１管細(xì)胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細(xì)胞濃度過低，不利于細(xì)胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細(xì)胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵?xì)胞沒有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
BC3 H1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-27細(xì)胞、Los Angeles Prostate Cancer-4細(xì)胞、LAC細(xì)胞
RBSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNCaP-C4-2細(xì)胞、MDA MB231細(xì)胞、HFT 8810細(xì)胞
MeT-5A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-549細(xì)胞、SK-ES1細(xì)胞、PANC 327細(xì)胞
細(xì)胞生長：貼壁
SVG p12 epithelioid cells人星形膠質(zhì)細(xì)胞系
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
冷凍細(xì)胞解凍程序：依據(jù)細(xì)胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例，制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細(xì)胞均無法立即適應(yīng)不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類，若因?qū)嶒炐枰?，必須有所不同時，務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成，確定細(xì)胞適應(yīng)后，方進(jìn)行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清)，對細(xì)胞而言差異極大，請務(wù)必依據(jù)細(xì)胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于３７°C水槽中回溫，回溫后噴以７０%酒精并擦拭之，移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管，立即放入３７°C水槽中快速解凍，水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿，否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在１分鐘內(nèi)全部融化后，以７０%ethanol擦拭冷凍管外部，移入無菌操作臺內(nèi)。依據(jù)細(xì)胞種類和濃度，于無菌操作臺內(nèi)?。保癿l培養(yǎng)基加至T２５或T７５flask中。取出已解凍之細(xì)胞懸浮液，緩緩加入T２５或T７５flask內(nèi)之培養(yǎng)基，混合均勻，放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細(xì)胞而言，１%以下之冷凍保護(hù)劑DMSO，不會對細(xì)胞之貼附或活化有不良影響，不需立刻由解凍細(xì)胞中去除，待第二天確定細(xì)胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會造成細(xì)胞分化之細(xì)胞，需立即去除DMSO者，則可將解凍后之細(xì)胞懸浮液放入５-１０ml培養(yǎng)基中，離心３００xg(約１０００rpm)，５分鐘，小心移去上清液，加入適量新鮮培養(yǎng)基，將細(xì)胞均勻混合后，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中，再放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
FTC-133細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-C1細(xì)胞、SNU-251細(xì)胞、NSC34細(xì)胞
DKMG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NR8383.1細(xì)胞、ECC 12細(xì)胞、Hs821T細(xì)胞
D324 Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFL細(xì)胞、FHCRC-11細(xì)胞、PANC0504細(xì)胞
A549/DDP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2029細(xì)胞、SW 948細(xì)胞、COLO320 DM細(xì)胞
KYSE-150細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BJA-B細(xì)胞、74Int細(xì)胞、Ly1細(xì)胞
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
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細(xì)胞生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的，真的很難相信你會把細(xì)胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細(xì)胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細(xì)胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細(xì)胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細(xì)胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細(xì)胞的實驗穿插進(jìn)行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人，避免相互干擾。每天對待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細(xì)胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進(jìn)去)；５)晚上離開的時候給傳代細(xì)胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
Functional Liver Cell-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OK-WT細(xì)胞、BC-3H-1細(xì)胞、CAMA1細(xì)胞
SGC 7901細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-2932細(xì)胞、UK Pan-1細(xì)胞、P30/0HK細(xì)胞
LK 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MZ-CRC-1細(xì)胞、LADMAC細(xì)胞、J774 A1細(xì)胞
ROS17/28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Immortalized Human Hepatocytes細(xì)胞、MC57G細(xì)胞、IGROV-1細(xì)胞
H4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M1細(xì)胞、RPMI-2650細(xì)胞、SNU761細(xì)胞
2BS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：alphaTC1 Clone 6細(xì)胞、NCI-H2030細(xì)胞、H69細(xì)胞
Walker-Ca.256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tu 177細(xì)胞、WSU-DLCL(2)細(xì)胞、KNS42細(xì)胞
Walker-256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AR4-IP細(xì)胞、HCC0366細(xì)胞、HEL-92_1_7細(xì)胞
H-446細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U251-MG細(xì)胞、Hs 888.T細(xì)胞、A9(Hamprecht)細(xì)胞
MNNG-HOS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-LY-3細(xì)胞、GB1細(xì)胞、TMD-8細(xì)胞
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SMA-560細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-361細(xì)胞、801-D細(xì)胞、Tu-686細(xì)胞
B16/F1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H345細(xì)胞、HEK293E細(xì)胞、NCIH1648細(xì)胞
COLO 741細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H820細(xì)胞、hs 68細(xì)胞、LA-795細(xì)胞
L cell細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C38細(xì)胞、CHO-K1細(xì)胞、Hep-G2細(xì)胞
LCD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-520細(xì)胞、ISHI細(xì)胞、GM12878細(xì)胞
YES-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H889細(xì)胞、OCI-LY-18細(xì)胞、BNL 1MEA.7R.1細(xì)胞
YES-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H889細(xì)胞、OCI-LY-18細(xì)胞、BNL 1MEA.7R.1細(xì)胞
EFM-192B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH548細(xì)胞、CEK細(xì)胞、Hs 578T細(xì)胞
Hs 888.Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT細(xì)胞、PL12細(xì)胞、P3J細(xì)胞
HuT 78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS 174T細(xì)胞、SKMEL3細(xì)胞、ST細(xì)胞
ZR-75-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-522細(xì)胞、G-Olig2細(xì)胞、DMS-114細(xì)胞
H650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：K1細(xì)胞、SK HEP 01細(xì)胞、RLE-6TN細(xì)胞
LTEPa2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-484細(xì)胞、PTK-1細(xì)胞、MADB106細(xì)胞
SNT-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero E-6細(xì)胞、HPAEC細(xì)胞、HET-1A細(xì)胞
Madin-Darby Bovine Kidney細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H/10T1/2細(xì)胞、WM 239-A細(xì)胞、U-266 AR1細(xì)胞
OCILY10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLF-a細(xì)胞、RSMC細(xì)胞、C3H10T1/2 clone8細(xì)胞
MC 3T3-E1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUNE1細(xì)胞、WBF344細(xì)胞、OE19細(xì)胞
B16 BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KOSC2細(xì)胞、HeLa/S3細(xì)胞、Jurkat-77細(xì)胞
P30-OHK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA468細(xì)胞、KU812-F細(xì)胞、H441細(xì)胞
H23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EC-GI細(xì)胞、HUSMC細(xì)胞、2T細(xì)胞
OVCAR-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE10細(xì)胞、SW1417細(xì)胞、LN-382細(xì)胞
D-324 Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-182細(xì)胞、HCT-116細(xì)胞、H2066細(xì)胞
SJ-RH30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC-7細(xì)胞、ZR75-1細(xì)胞、HFB細(xì)胞
CHO Lec1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caco-2/BBe細(xì)胞、Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細(xì)胞、A375S2細(xì)胞
PLC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs739T細(xì)胞、RPMI-1788細(xì)胞、OVCA-432細(xì)胞
NIH:OVCAR4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ly8細(xì)胞、CHL-1細(xì)胞、DK-MG細(xì)胞
My-La 2059細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-266 AR1細(xì)胞、H345細(xì)胞、MIMVEC細(xì)胞
COLO320HSR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2110細(xì)胞、SuDHL 4細(xì)胞、H2073細(xì)胞
RCS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A375細(xì)胞、GM17219細(xì)胞、PANC3.27細(xì)胞
T24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KCL22S細(xì)胞、GA-10細(xì)胞、UCLA-RO 81細(xì)胞
SW 900細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H295R-S1細(xì)胞、H1563細(xì)胞、Tb1.Lu細(xì)胞
LA795細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero from pool #76細(xì)胞、HLF-a細(xì)胞、OVCAR-5細(xì)胞
TE-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Intestinal Epithelial Cell-6細(xì)胞、MGH-UI細(xì)胞、H2291細(xì)胞
L-WRN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-1細(xì)胞、NCIH1836細(xì)胞、CW-2細(xì)胞
LAN6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-8細(xì)胞、AD-293細(xì)胞、U373細(xì)胞
Hs-606-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKES1細(xì)胞、NCIH1838細(xì)胞、LP-1細(xì)胞
LIPF155C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS-114細(xì)胞、MonoMac6細(xì)胞、Mv 1 Lu (NBL-7)細(xì)胞
HIT T15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SuDHL 8細(xì)胞、DH82細(xì)胞、TCMK-1細(xì)胞
HIT T15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SuDHL 8細(xì)胞、DH82細(xì)胞、TCMK-1細(xì)胞
KYSE 180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2108細(xì)胞、OVCAR-8細(xì)胞、SBC-3細(xì)胞
CHO K1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 78細(xì)胞、NCIH1623細(xì)胞、NCI-H82細(xì)胞
KAT-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2030細(xì)胞、NCIH1993細(xì)胞、CMT93細(xì)胞
MN-60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Wien133細(xì)胞、H-838細(xì)胞、HCC1599細(xì)胞
T241細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JeKo 1細(xì)胞、VMCUB1細(xì)胞、MRC5細(xì)胞
OV3121細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCP-1細(xì)胞、NCI-BL1339細(xì)胞、Hs294細(xì)胞
CAL 51細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bac 1.2F5細(xì)胞、Hs27細(xì)胞、L540細(xì)胞
Y3-Ag1.2.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH1細(xì)胞、NBL-1細(xì)胞、ETCC007細(xì)胞
HS-294T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HF-91細(xì)胞、Hep 2細(xì)胞、LIXC002細(xì)胞
AZ 521細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A72細(xì)胞、H1651細(xì)胞、U-343-MG細(xì)胞
LS 123細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS1034細(xì)胞、GRSL細(xì)胞、YTMLC-90細(xì)胞
R1800[RA]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM-192A細(xì)胞、NCI H716細(xì)胞、NCI-SNU-398細(xì)胞
SVG p12 epithelioid cells人星形膠質(zhì)細(xì)胞系
ReNcell CX細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HM06.A1細(xì)胞、U251MG細(xì)胞、P3-x63-Ag8 653細(xì)胞
MLO-Y4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HELF細(xì)胞、HMEC細(xì)胞、SKNMC細(xì)胞
WB-F344細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H211細(xì)胞、CAL851細(xì)胞、COLO_320DM細(xì)胞
LK 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MZ-CRC-1細(xì)胞、639-V細(xì)胞、Capan2細(xì)胞
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