"U-138MG epithelioid cells人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞系 細胞背景資料:星形細胞瘤;男性 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟:常用的細胞冷凍貯存器為液氮貯存器,規(guī)格有35L和50L兩種。使用時要注意以下幾點:(1)一般兩周需充液氮一次,至少一個月充氮一次。液氮溫度達-196℃,使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上,以免引起凍傷。(2)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu),中間為真空層,瓶口有雙層焊接處,應(yīng)防止焊接部裂開。(3)在裝入液氮時,要注意緩慢小心,并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo),使液氮直達瓶底,如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用,加液氮時更要緩慢,以免溫度驟降而使容器損壞。細胞凍存時常備的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培養(yǎng)液,DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(121°C蒸氣高壓消毒),2mL安瓿(或?qū)S眉毎麅龃婀?、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為:(1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng) 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為3×106~1×107/mL之間。(3)將上述細胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤?,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時,再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時,再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時,最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。 MIO-M1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL12細胞、OCI/AML2細胞、ZR7530細胞 Hs 940.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CoC1細胞、TE10細胞、MEF (CF-1)細胞 MDA435細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NUGC-3細胞、MFE280細胞、JEG3細胞 細胞生長:貼壁 U-138MG epithelioid cells人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞的凍存:為避免污染造成的損失,最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉(zhuǎn)化,需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前,細胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培養(yǎng)基;包含10%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基;50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%甘油的新鮮培養(yǎng)基或50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基,一些普通的培養(yǎng)基成分可能是:50%細胞條件無血清培養(yǎng)基和50%包含有7.5%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有7.5%二甲基亞砜和10%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存:計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應(yīng)該處于對數(shù)生長期。以大約200~400g離心5分鐘沉淀細胞,使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以1×10(7)到5×10(7)細胞/ml密度,在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在無血清培養(yǎng)基中,再次懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存:使用分離試劑從基層分離細胞,分離時盡可能溫和,使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中,再次懸浮分離細胞,確定有活力細胞數(shù)。以大約200g離心5分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以5×10(6)到1×10(6)細胞/ml密度,在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕的冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 ssMCF7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mc Coy細胞、NCI-H2106細胞、BEL/FU細胞 Cloudman S91 melanoma細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 206細胞、CAL39細胞、NCI-522細胞 RPMI-6666細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKG3A細胞、MC-116細胞、Madin-Darby Bovine Kidney細胞 MNNG-HOS (Cl#5)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P31-FUJ細胞、HCGC細胞、Hi-5細胞 Epstein-Barr-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHG44細胞、Roswell Park Memorial Institute 2650細胞、NEC-8細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 U-138MG epithelioid cells人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞系 細胞生長特性:貼壁 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 為什么培養(yǎng)的細胞要及時傳代?體外培養(yǎng)的細胞大多具有生長接觸抑制的特性,也就是說當(dāng)一個細胞被其他細胞包圍的時候,它就會停止生長,及時傳代后,細胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些?可能的原因有:更換了不同的培養(yǎng)液或血清;培養(yǎng)液中一些細胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞;培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染;試劑保存不當(dāng);比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清等,找出其它可能的原因。解決辦法:增加起始培養(yǎng)細胞濃度;讓細胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液;換入新鮮配制培養(yǎng)液;補加谷酷肢或生長因子等;用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,去棄培養(yǎng)物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃; 培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,并在2周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物,檢測支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1-2分鐘內(nèi)大部分融化,特別注意,需殘留一小塊冰塊,就可拿到超凈工作臺操作細胞,用75%酒精消毒凍存管,用新鮮培養(yǎng)基將細胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時,必須注意安全,預(yù)防冷凍管爆裂。 GM00637H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A101D細胞、SUDHL16細胞、IM-95細胞 RK13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCLP1細胞、AMJ2C8細胞、H-2444細胞 Epithelioma Papulosum Cyprini細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EOMA細胞、McCoy B細胞、MES-SA Dx5細胞 MCF-12F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-741細胞、FHL 124細胞、GRSL細胞 HEK293T/17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNSH細胞、University of Arizona Cell Culture-893細胞、SUM149PT細胞 Hs888Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 829細胞、Y79細胞、SUM52PE細胞 Oka-C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-719細胞、NCI-H322細胞、HHFK細胞 NG-108-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TC-1 [Mouse lung]細胞、CL11細胞、BNL CL.2細胞 NCI-H660細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL5細胞、GM03573細胞、LS 1034細胞 U-251細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 606細胞、293E細胞、CT26-clone 25細胞 U-138MG epithelioid cells人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞系 SNU-601細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NT2/D1細胞、PANC-03-27細胞、DSL-6A-C1細胞 MCF10A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H647細胞、GP5d細胞、CV-1.K細胞 HCT GEO細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ISHI細胞、Rainbow Trout Embryo細胞、T_T_細胞 ATDC5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L23/P細胞、RGC-6細胞、Calf Pulmonary Artery 47細胞 MCF10A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H647細胞、GP5d細胞、CV-1.K細胞 H-1963細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CTX TNA2細胞、OCI-AML-4細胞、SK-MEL24細胞 H-1963細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CTX TNA2細胞、OCI-AML-4細胞、SK-MEL24細胞 HCC1954-BL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-A細胞、SK-MEL-3細胞、MyLa 2059細胞 LP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW480細胞、HCC 94細胞、AML12細胞 NCI-H865細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-6細胞、AZ-521細胞、SU-DHL-2細胞 Huh7.5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs819.T細胞、L-WRN細胞、Mono Mac6細胞 SK-Mel 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 683細胞、KYSE 140細胞、Murine Leydig Tumor Cell line-1細胞 NKT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MASMC細胞、Tca8113細胞、SKMEL5細胞 SHI1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAG細胞、U266 Bl細胞、LIM1215細胞 OKT 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-638細胞、ROS17/2.8細胞、SK-N-BE(2)-M17細胞 Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCLY8細胞、HCC-15細胞、HPAF細胞 MDCK2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-134細胞、Jurkat77細胞、SPC-A-1細胞 NCIH196細胞系相關(guān)產(chǎn)品:YES 2細胞、AZ521細胞、ZR75-1細胞 MC3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-NS1/1-Ag4-1細胞、Panc 02細胞、COLO 201細胞 D341 Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A172細胞、ZR-75-30細胞、Doubling time: ~50 hours (ATCC).細胞 H1048細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IGROV1細胞、HT55細胞、NL20細胞 EU-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FUOV1細胞、ZYM-DIEC02細胞、HEK-293F細胞 b.End3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Calu 6細胞、C1498細胞、8305-C細胞 T8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lu-65細胞、SK-SH-SY5Y細胞、RCC23細胞 RPMI7666細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFD-1細胞、EFM192C細胞、Panc_05_04細胞 FM-88細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM H-2細胞、MC26細胞、N1E115細胞 EU-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-11細胞、Roswell Park Memorial Institute 7951細胞、NCI-H1404細胞 XuanWei Lung Cancer-05細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM 2132細胞、MFE 280細胞、R D細胞 211H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Gejiu Lung Carcinoma-82細胞、TO175T細胞、HSC 3細胞 OS-RC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NUGC2細胞、SF-767細胞、3T6細胞 Tn-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC97H細胞、AG06814-M細胞、16-HBE細胞 2BS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:alphaTC1 Clone 6細胞、NCI-H2030細胞、H69細胞 H446細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUIT 2細胞、OV-CA 432細胞、SF 767細胞 KG-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SPC-A1細胞、Hs 895.T細胞、AMJ2-C8細胞 KYSE-150細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BJA-B細胞、74Int細胞、Ly1細胞 RPVSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-149細胞、NCI-H1651細胞、NCIH1975細胞 IM-95細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-204細胞、AMJ2-C8細胞、JB6 Cl 30-7b細胞 NCIH1734細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL-1細胞、NCI-H1395細胞、SW-403細胞 SW-900細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HD11細胞、Hs68細胞、AMO1細胞 MRAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP C4-2B細胞、LS-123細胞、RAMSCs細胞 H-676細胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63-Ag 8.6.5.3細胞、Hs742T細胞、H1238細胞 TF1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB1-RGB細胞、SHEP1細胞、BetaTC6細胞 GC-1spg細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK.MEL.2細胞、NCI-H1299細胞、YES 2細胞 HuH1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H747細胞、Wien133細胞、AKR細胞 SPDC-CCL141細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCC-HEH-2細胞、CHP-126細胞、LTEP a2細胞 KASUMI6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1435細胞、OCI/AML-3細胞、RMG1細胞 P-388D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV1063細胞、L-Wnt3A細胞、Neuro 2a細胞 16HBE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC38細胞、RASMC細胞、SNB.19細胞 MOLP-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 742.T細胞、HSC-4細胞、SNU475細胞 B16-F10--RED細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3(A31)細胞、RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細胞、HO-8910PM細胞 LA 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T/G HA-VSMC細胞、Fao細胞、BC3H-1細胞 U-138MG epithelioid cells人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞系 RC-4B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIN-14B細胞、MDA468細胞、MonoMac1細胞 MEL-526細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tj-905細胞、D283-MED細胞、Panc 03.27細胞 AN-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U373MG細胞、H-1395細胞、CCD-112CoN細胞 Epithelioma Papulosum Cyprini細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EOMA細胞、Caco-2/BBe 1細胞、AR41P細胞 "
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