"3D4/21 epithelioid cells豬肺泡巨噬細胞系
細胞背景資料：肺泡巨噬細胞；SV４０轉(zhuǎn)化；Landrace
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟：常用的細胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時要注意以下幾點：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個月充氮一次。液氮溫度達-１９６℃，使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu)，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應(yīng)防止焊接部裂開。(３)在裝入液氮時，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo)，使液氮直達瓶底，如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用，加液氮時更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細胞凍存時常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(１２１°C蒸氣高壓消毒)，２mL安瓿(或?qū)Ｓ眉毎麅龃婀?、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤?，安瓿裝１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時，最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
NCI-SNU-398細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC-9細胞、MDA 231-LM2-4175細胞、SNU423細胞
PaTu 8988 S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 02細胞、PLC細胞、NCTC clone 929細胞
HCC366細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-363細胞、KYSE70細胞、GM00637H細胞
細胞生長：貼壁
3D4/21 epithelioid cells豬肺泡巨噬細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞復(fù)蘇基本方法：１．從液氮罐中取出安剖；有時因安剖未封嚴(yán)，浸入了液氮，取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸，因此應(yīng)帶有防護眼睛和手套。２．迅速放入盛有３６℃～３７℃水的搪瓷罐中，扣上蓋并不時搖動，盡快解凍。３．剪開紗布口袋，取出安剖，用７０％酒精擦拭消毒后，凈化臺上打開蓋，用吸管吸出細胞懸液，裝入離心管中，再補加１０ml培養(yǎng)液，吹打使細胞懸浮。４．低速離心（５００～１０００轉(zhuǎn)/分）５分鐘，取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。５．加入培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后，再移裝入培養(yǎng)瓶中，置溫箱培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T２５ flask細胞時，處理方式為：在寄送過程中，為避免起泡造成細胞脫落死亡，T２５ flask均加滿培養(yǎng)基。請檢查flask外觀，并于顯微鏡下觀察細胞生長狀況和有無污染現(xiàn)象，若有任何問題，不要打開蓋子，請立即通知細胞實驗室。將原封之T２５ flask靜置于３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱中，使細胞回溫至３７°C，并讓運送過程中少數(shù)脫落的細胞可再附著生長。隔天后，于無菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用)，僅留約５-１０ml培養(yǎng)基于flask內(nèi)，依一般培養(yǎng)方式再將細胞置入培養(yǎng)箱中，或細胞已長滿盤，則將細胞做傳代培養(yǎng)。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
MDCKII-WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MMAc-SF細胞、HRGEC細胞、JVM2細胞
SK-Hep1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hepatoma 22細胞、YH細胞、Mink Lung細胞
Vero 76 clone E-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK HEP 01細胞、JEKO細胞、SKNSH細胞
NCIH508細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UACC893細胞、SUM-52PE細胞、Evsa T細胞
HUVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QG-56細胞、HCC0078細胞、CL1-5細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
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細胞生長特性：貼壁
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
為什么培養(yǎng)的細胞要及時傳代？體外培養(yǎng)的細胞大多具有生長接觸抑制的特性，也就是說當(dāng)一個細胞被其他細胞包圍的時候，它就會停止生長，及時傳代后，細胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些？可能的原因有：更換了不同的培養(yǎng)液或血清；培養(yǎng)液中一些細胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞；培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染；試劑保存不當(dāng)；比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清等，找出其它可能的原因。解決辦法：增加起始培養(yǎng)細胞濃度；讓細胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液；換入新鮮配制培養(yǎng)液；補加谷酷肢或生長因子等；用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，去棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培養(yǎng)液需在２-８℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在２-８℃保存，并在２周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物，檢測支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍？取出冷凍管后，須立即放入３７℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在１-２分鐘內(nèi)大部分融化，特別注意，需殘留一小塊冰塊，就可拿到超凈工作臺操作細胞，用７５%酒精消毒凍存管，用新鮮培養(yǎng)基將細胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全，預(yù)防冷凍管爆裂。
COLO320DM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GC-1spg細胞、HFF細胞、HEL 92.1.7細胞
SN4741細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tb1.Lu細胞、Tn-5細胞、Fetal Human Lens-124細胞
ZR75_1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AML193細胞、CCC-ESF-1細胞、RPMI 2650細胞
H1781細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MAC1細胞、mREC細胞、HEC151細胞
DK-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-12T細胞、NRCC細胞、OCI-LY-18細胞
751細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-NEP-1細胞、H-1792細胞、RIN-14B細胞
NTERA2-D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGBC11TKB細胞、H378細胞、BT-549細胞
Psi2-DAP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ca759細胞、UACC812細胞、TC-1[JHU-1]細胞
J82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y1細胞、SW-480細胞、CAKI 1細胞
FHL124細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GCT0404細胞、MADISON LUNG TA-109細胞、HeLa-229細胞
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OCI-AML3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0078細胞、UPCI:SCC90細胞、P3X63Ag8.653細胞
TCC-PAN2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Suzhou Human Glioma-44細胞、LMH細胞、IOSE-Van細胞
NCI-H2073細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Gerner 7666細胞、HS-68細胞、B35細胞
HSAEC1-KT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-403細胞、Duke University 4475細胞、H-1623細胞
Hs27F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LWnt3A細胞、IPLB-Sf21-AE細胞、HLEpiC細胞
SK-Col-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1838細胞、NIE-115細胞、TYK-nu細胞
SK-Col-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1838細胞、NIE-115細胞、TYK-nu細胞
PG-4(S+L-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：F36P細胞、NCI-H157細胞、VCaP細胞
T-HSC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-119細胞、Leghorn Male Hepatoma cell line細胞、ROS17/2.8細胞
TE 354.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NFHIOSE-80細胞、EB-1細胞、RPMI 7951細胞
JROECL 21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KATOIII細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-231細胞、MeT5A細胞
NCIH847細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUPM2細胞、Pa16C細胞、H23細胞
Pt K1 (NBL-3)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat 77細胞、Hs-281-T細胞、Huh-7.5.1細胞
Nb2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-4I細胞、C32-mel細胞、U-251MG細胞
NCIH810細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2126細胞、NFHIOSE-29細胞、LS513細胞
NCI-H920細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLEC-B3細胞、Gingival carcinoma Neck Metastasis細胞、CORL279細胞
HM06.A1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H847細胞、H2029細胞、Calf Pulmonary Artery Endothelial細胞
HuTu-80細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Alpha Mouse Liver 12細胞、3T3-L1 ad細胞、Vero from pool #76細胞
A 172細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A427細胞、BEAS2B細胞、Tissue Culture-1細胞
SKRC 39細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JM1細胞、HOCF細胞、NCI H69細胞
WEHI-3B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Okayama University Medical School-23細胞、H1385細胞、GA-10-Clone-4細胞
CAL 12T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS-TE85細胞、SW-1990細胞、MES-SA/Dx-5細胞
SV40-HCEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE-Mar細胞、Capan 2細胞、Nthy ori 3.1細胞
Roswell Park Memorial Institute 8402細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-39細胞、NCI-H378細胞、CAL-33細胞
RC-4B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIN-14B細胞、MDA468細胞、MonoMac1細胞
SuDHL 8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACC-M細胞、Duck embryo細胞、SK-MEL-28細胞
Hs 274細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CFPAC-1細胞、TK-10細胞、AML 12細胞
Hs742T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo741細胞、CEM-C7細胞、SUM190PT細胞
CCD-1112sk細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Renal Carcinoma細胞、Vertebral Cancer of the Prostate細胞、H727細胞
H6c7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y-1細胞、253JB-V細胞、LL/2細胞
hA549細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT16細胞、OVCA420細胞、Hs863T細胞
RPE1-hTERT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1993細胞、FRTL 5細胞、A2780S細胞
MNNG/HOS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2195細胞、Hs-852-T細胞、OCI-LY-3細胞
UMNSAH-DF 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EOL1細胞、SK.MEL.2細胞、H2052_MM細胞
PaTu 8988 S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 02細胞、PLC細胞、NCTC clone 929細胞
ARO細胞系相關(guān)產(chǎn)品：2PK3細胞、MOLM-14細胞、A375.S2細胞
B16/BL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ketr 3細胞、Huh-7.5細胞、RWPE2細胞
CCC-HEH-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-GT-4細胞、Tn5 B1-4細胞、MESSADX5細胞
HCC-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KLM1細胞、KE39細胞、SW-756細胞
Balb/c 3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACCM細胞、NRK細胞、TOV-21G細胞
HuO9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1990細胞、MDA-436細胞、BT.549細胞
J774 A.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-1040細胞、F-81細胞、MCA205細胞
VK2 (E6/E7)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-320細胞、GM0637細胞、CNE1-LUC細胞
H2023細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUPT-1細胞、Hmy.2 CIR細胞、H1651細胞
SKG-IIIa細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE80細胞、BC-019細胞、H-2196細胞
IR983F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK-92細胞、32D clone 3細胞、EL-4細胞
SKCO1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC3M-1E8細胞、NG108-15細胞、RBVEC細胞
MV-4:11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-159-PT細胞、FHs74 Int細胞、H-1755細胞
National Medical Center-Glioma 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBE 135-E6E7細胞、HSCT6細胞、KYSE 410細胞
H-69細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VK2 (E6/E7)細胞、E304細胞、NCI-H1048細胞
Hs940-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2228細胞、SNU-886細胞、DMS 79細胞
3D4/21 epithelioid cells豬肺泡巨噬細胞系
NCI-ADR-RES細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Wayne State University-Head and Neck 13細胞、RPMI1846細胞、WEHI164細胞
Vero細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H3255細胞、Colo205細胞、IAR-20細胞
0V-1063細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2780S細胞、FRTL 5細胞、Kelly細胞
ZR75_1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AML193細胞、MDA-MB-175-VII細胞、SNB.19細胞
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