"FHC epithelioid cells人正常結直腸粘膜細胞系 細胞背景資料:胎兒;結腸;自發(fā)永生;男性 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞傳代培養(yǎng)實驗:體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞,并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉移到另外的容器中進行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細胞世代或倍增不同。在一代中,細胞培增3~6次。細胞傳代后,一般經(jīng)過三個階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度,即細胞群的分裂相數(shù)/100個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細胞可達3~5%;細胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時期,稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期),適宜進行各種試驗。實驗步驟:1.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細胞,如果細胞變圓,相互之間不再連接成片,這時應立即在超凈臺中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細胞懸液。3.將細胞懸液吸出2ml左右,加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細胞在2小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶內(nèi)形成單層,需要再次進行傳代。 CEM/C1細胞系相關產(chǎn)品:H-2106細胞、DH-82細胞、NK-92.05細胞 H64細胞系相關產(chǎn)品:EC109細胞、NCI H82細胞、PLC PRF 5細胞 NCI-H64細胞系相關產(chǎn)品:HepaRG細胞、D-324 Med細胞、McA-RH7777細胞 細胞生長:貼壁 FHC epithelioid cells人正常結直腸粘膜細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 為了防止因污染或技術原因使長期培養(yǎng)功虧一簣,考慮到培養(yǎng)細胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異,有時因寄贈、交換和購買,培養(yǎng)細胞從一個實驗室轉運到另一個實驗室,的策略是進行低溫保存。這對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要。現(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-70℃~-196℃)的特點。細胞深低溫保存的基本原理是:在-70℃以下時,細胞內(nèi)的酶活性均己停止,即代謝處于完全停止狀態(tài),故可以長期保存。細胞低溫保存的關鍵,在于通過0~20℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi),水晶呈針狀,極易招致細胞的嚴重損傷。凍存細胞的復蘇:凍存細胞較脆弱,要輕柔操作。凍存細胞要快速融化,并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感,離心去除凍存培養(yǎng)基,然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細胞。1ml凍存細胞使用10~20ml完全生長培養(yǎng)基。進行活細胞計數(shù),細胞接種應該至少在3×10(5)活細胞/ml;培養(yǎng)細胞12到24小時,更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基,去除凍存劑。離心方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml凍存細胞加入到大約25ml完全生長培養(yǎng)基,輕輕混勻;以大約80x離心2到3分鐘;棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細胞,并且進行活細胞計數(shù)。細胞鋪板,細胞接種應該至少為3×10(5)活細胞/ml。細胞的分化:一個成年人全身細胞總數(shù)約1012個,可以區(qū)分為200多種不同類型的細胞:形態(tài)結構,代謝,行為,功能等各不相同。追根溯源,這么多種細胞均來自一個受精卵細胞。所以,通常把發(fā)育過程中,細胞后代在形態(tài)、結構和功能上發(fā)生差異的過程稱為細胞分化。細胞分化發(fā)生在胚胎階段,也發(fā)生在胎兒出生以后,乃至成人階段。例如,人體血細胞的產(chǎn)生和分化,這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細胞,轉入分化,通常從細胞周期中G1期開始時一個確定的點G0點“逃逸”出細胞周期。旺盛生長分裂的細胞和各種分化了的細胞,它們的基因表達和代謝活動各不相同。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 T98細胞系相關產(chǎn)品:SUPB-15細胞、CF PAC-1細胞、MV-4-11細胞 Hopkins-92細胞系相關產(chǎn)品:SKBr3細胞、H1650細胞、Panc 4.03細胞 HS-766-T細胞系相關產(chǎn)品:HuCCT-1細胞、COLO 394細胞、ONS-76細胞 KM933細胞系相關產(chǎn)品:Psi-2 DAP細胞、SK-Mel1細胞、BT549細胞 P3/X63/Ag8細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H1666細胞、HFSF細胞、CAL-62細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 FHC epithelioid cells人正常結直腸粘膜細胞系 細胞生長特性:貼壁 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 細胞凍存的步驟:1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇;3)將分裝上述細胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細胞復蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。 RPMI 6666細胞系相關產(chǎn)品:TOV-112細胞、Fetal Human Colon細胞、NCI-H1437細胞 Laboratory of Allergic Diseases 2細胞系相關產(chǎn)品:SU-DHL-1細胞、Hep 3B2_1-7細胞、GM-215細胞 DI-TNC1細胞系相關產(chǎn)品:SN12CPM6細胞、Baby Hamster Kidney from litter No. 21細胞、hEM15A細胞 QGY-7701細胞系相關產(chǎn)品:CMT 93細胞、CAL 12T細胞、U20S細胞 LS-513細胞系相關產(chǎn)品:NCIH1792細胞、OCIAML4細胞、brain-derived Endothelial cells.3細胞 NCIADRRES細胞系相關產(chǎn)品:RWPE-1細胞、CEL細胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細胞 Hs 600.T細胞系相關產(chǎn)品:B 95.8細胞、SuDHL 1細胞、H1963細胞 LCLC103H細胞系相關產(chǎn)品:CHO-S細胞、OAC-P4C細胞、MDA-MB-134細胞 NCI-H522細胞系相關產(chǎn)品:SJCRH30細胞、RIN-m 14B細胞、H2170細胞 MD Anderson-Metastatic Breast-361細胞系相關產(chǎn)品:OCILY10細胞、RCC23細胞、CRFK細胞 FHC epithelioid cells人正常結直腸粘膜細胞系 4-1st細胞系相關產(chǎn)品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細胞、HL 60細胞、NCI H548細胞 H1781細胞系相關產(chǎn)品:MAC1細胞、mREC細胞、HEC151細胞 LSC-1細胞系相關產(chǎn)品:NCIH1703細胞、NIH 3T3細胞、CF-1 MEF細胞 EU-4細胞系相關產(chǎn)品:FUOV1細胞、ZYM-DIEC02細胞、HEK-293F細胞 T-ALL1細胞系相關產(chǎn)品:RS(4;11)細胞、HFE-145細胞、SKMel-5細胞 D341Med細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H2405細胞、U20S細胞、MDA-MB-157細胞 D341Med細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H2405細胞、U20S細胞、MDA-MB-157細胞 NCIH1793細胞系相關產(chǎn)品:D-324 Med細胞、GM04154B細胞、NCIH82細胞 HeLaS3細胞系相關產(chǎn)品:KP-N-RT-BM細胞、HCC0202細胞、AC29細胞 OKAC1細胞系相關產(chǎn)品:P3JHR1細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細胞、MC57細胞 H-2444細胞系相關產(chǎn)品:CAL85-1細胞、PA-1細胞、NCI-H1341細胞 COLO206F細胞系相關產(chǎn)品:TC7細胞、INS1細胞、MonoMac6細胞 BEAS2B細胞系相關產(chǎn)品:JOSK-M細胞、MCA 38細胞、WM-239-A細胞 MT-2細胞系相關產(chǎn)品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細胞、SKNO-1細胞、RPTEC TERT1細胞 UMR106細胞系相關產(chǎn)品:TGW-nu細胞、Panc203細胞、Mouse INsulinoma 6細胞 Panc327細胞系相關產(chǎn)品:KPL-1細胞、BEL-7402細胞、COLO-320HSR細胞 SLK細胞系相關產(chǎn)品:SUM-52-PE細胞、SK_N_BE2C細胞、CAMA細胞 H209細胞系相關產(chǎn)品:HN6細胞、SKHEP1細胞、SPCA1細胞 GNM細胞系相關產(chǎn)品:SW579細胞、Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞、SK.MEL.5細胞 HT 144細胞系相關產(chǎn)品:CNE1-LUC細胞、UMC-11細胞、PC-9細胞 IMR90細胞系相關產(chǎn)品:Natural Killer-92細胞、Line 522細胞、COLO684細胞 P3-X63-Ag8.653細胞系相關產(chǎn)品:IMR 32細胞、SMMC 7721細胞、HCC-15細胞 SNU-C2B細胞系相關產(chǎn)品:MDA-MB-435細胞、H-82細胞、HuLEC-5a細胞 HCC-1143細胞系相關產(chǎn)品:University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細胞、VMCUB-1細胞、M-07e細胞 Human Pancreatic Duct Epithelial細胞系相關產(chǎn)品:293H細胞、MDA415細胞、HPAC細胞 T47D細胞系相關產(chǎn)品:AR-42J細胞、Hs895T細胞、Hs888T細胞 A549細胞系相關產(chǎn)品:D-341Med細胞、38C13細胞、CATHa細胞 FL62891細胞系相關產(chǎn)品:PCI-SG231細胞、SNU-601細胞、SNU-668細胞 NCI-H1373細胞系相關產(chǎn)品:HLMVEC細胞、Colon 38細胞、RIN Cl-5F細胞 LU65細胞系相關產(chǎn)品:130 T細胞、H2405細胞、SW 1573細胞 Panc-3_27細胞系相關產(chǎn)品:WiDr細胞、SUIT 2細胞、PC3M-2B4細胞 130T細胞系相關產(chǎn)品:L 132細胞、HuPT4細胞、F81細胞 Panc 1細胞系相關產(chǎn)品:PA317細胞、TE5細胞、OCI-Ly01細胞 SW260細胞系相關產(chǎn)品:OVCAR-10細胞、PLMVEC細胞、PG-4(S+L-)細胞 KTA-7細胞系相關產(chǎn)品:Y3-Ag 1.2.3細胞、Colon-38細胞、HOS細胞 OCI/AML-3細胞系相關產(chǎn)品:MDST8細胞、293FT細胞、He La細胞 CaES-17細胞系相關產(chǎn)品:MDA453細胞、MNNGHOS細胞、H211細胞 HEK-293 c18細胞系相關產(chǎn)品:brain-derived Endothelial cells.3細胞、Caki2細胞、GES-1細胞 HEK-293 c18細胞系相關產(chǎn)品:brain-derived Endothelial cells.3細胞、Caki2細胞、GES-1細胞 FHL 124細胞系相關產(chǎn)品:38C13細胞、L-M[TK-]細胞、FRO 81-2細胞 ACCM細胞系相關產(chǎn)品:Rat Skin 1細胞、143B細胞、SW626細胞 MC 3T3-E1細胞系相關產(chǎn)品:SUNE1細胞、WBF344細胞、OE19細胞 P116細胞系相關產(chǎn)品:MH-22a細胞、DMS 114細胞、CHP 126細胞 IM 9細胞系相關產(chǎn)品:3T3 J2細胞、16HBEo-細胞、PANC 203細胞 RFL 6細胞系相關產(chǎn)品:BT 325細胞、HEC1-A細胞、SUM52細胞 KMS26細胞系相關產(chǎn)品:Kuramochi細胞、NCI-441細胞、3T3 Swiss Albino細胞 BE(2)C細胞系相關產(chǎn)品:SUM 149PT細胞、NT2/D1細胞、BALB/c 3T3 clone A31細胞 K1735細胞系相關產(chǎn)品:C3H 10T1/2細胞、Hs 742.T細胞、LI7細胞 hTERT RPE1細胞系相關產(chǎn)品:RPMI-8226細胞、MHCC97-H細胞、H-2108細胞 Adeno 293細胞系相關產(chǎn)品:COLO-824細胞、Hep-G2/C3A細胞、HCAEC細胞 JIII細胞系相關產(chǎn)品:MDA-MB-468細胞、LS1034細胞、3D4/21細胞 FHC epithelioid cells人正常結直腸粘膜細胞系 NCI-SNU-886細胞系相關產(chǎn)品:SJSA-1細胞、MGC-803細胞、R 2 C細胞 V79細胞系相關產(chǎn)品:MDCKII-WT細胞、HEL細胞、Colon26細胞 MD Anderson-Metastatic Breast-436細胞系相關產(chǎn)品:GLRK 13細胞、CHP 100細胞、C4-2 B細胞 DI-TNC1細胞系相關產(chǎn)品:SN12CPM6細胞、AA-Mel細胞、HKBML細胞 "
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