"NCI-H1672 epithelioid cells人小細胞肺癌細胞系
細胞背景資料：小細胞肺癌；男性
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復(fù)蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結(jié)１：復(fù)蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題。總結(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實際上復(fù)蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復(fù)蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復(fù)蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當會事。
CLONE M3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63-Ag 8.653細胞、A3細胞、HPAF-II細胞
Vero E-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-AML4細胞、T84細胞、Walker/LLC-WRC 256細胞
H1755細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc_04_03細胞、ME180細胞、MDAPCa-2b細胞
細胞生長：貼壁
NCI-H1672 epithelioid cells人小細胞肺癌細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前，細胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細胞條件無血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存：計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應(yīng)該處于對數(shù)生長期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存：使用分離試劑從基層分離細胞，分離時盡可能溫和，使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細胞，確定有活力細胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細胞/ml密度，在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
NCIH1781細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jijoye細胞、NRK52E細胞、Sarcoma OSteogenic-2細胞
Human Corneal Epithelial cells-Transformed細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1755細胞、NCI H69細胞、WEHI-3B細胞
RT4-D6P2T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jiyoye(P-2003)細胞、IAR 20細胞、QSG-7701細胞
HL-7702細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ly3細胞、H508細胞、BPH1細胞
SW 527細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMUC-3細胞、H1435細胞、A375-S2細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
NCI-H1672 epithelioid cells人小細胞肺癌細胞系
細胞生長特性：貼壁
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細胞后，應(yīng)該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責(zé)免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復(fù)蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應(yīng)，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
U-138 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH196細胞、A549/DDP細胞、VMRCRCZ細胞
NUGC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-735細胞、MOLT 16細胞、HTR-8/SV neo細胞
K299細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL34細胞、H-2347細胞、NK-92細胞
PLB985細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pro-5WgaRI3C細胞、P30-OHKUBO細胞、Panc-05.04細胞
MNNGHOS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BIC1細胞、V 79細胞、H28細胞
NCIH508細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UACC893細胞、SUM-52PE細胞、Evsa T細胞
Hs729細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 08.13細胞、HONE1細胞、MC3T3-E細胞
H-2405細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lu-99A細胞、WiDr細胞、WM115F細胞
IFRS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-423細胞、GM06141細胞、TE13細胞
MDA MB231細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GS-9L細胞、T-ALL1細胞、KMST-6細胞
NCI-H1672 epithelioid cells人小細胞肺癌細胞系
KU-19-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM1.S細胞、SK-NEP-1細胞、HT細胞
CHL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MBMEC細胞、NCI-H220細胞、MDA157細胞
RLE-6TN細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H10T1/2CL8細胞、U-251MG細胞、RWPE-1細胞
E6-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRhK-4細胞、293 c18細胞、143 B細胞
THPI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE(2C)細胞、NBL-12細胞、HS940細胞
LCD細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-520細胞、ISHI細胞、GM12878細胞
HT 1080細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KG1A細胞、SKNBE(2)細胞、RMG-1細胞
MKN45細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-671細胞、MCMEC細胞、SVG(P12)細胞
RL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC90細胞、NCIH596細胞、C22細胞
MES 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCA38細胞、HLEB-3細胞、SUM 149PT細胞
L cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMC3細胞、M619細胞、MKN 28細胞
U266B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV433細胞、EO771細胞、OV1063細胞
SW1463細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H69細胞、SF539細胞、TE1細胞
LN299細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat1細胞、ROS 17/28細胞、EB-1細胞
HD11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM05887細胞、RPMI-6666細胞、SKNDZ細胞
A375細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LOUNH91細胞、NTC-200細胞、Lewis Lung Cancer細胞
SW527細胞系相關(guān)產(chǎn)品：R3/1細胞、P3/NS-1細胞、RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細胞
H184A1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：28SC細胞、Baby Hamster Kidney 21細胞、Hs888 Lu細胞
TEV-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：4175細胞、Pan02細胞、Normal fibroblast-10細胞
HMCB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Madin-Darby Bovine Kidney細胞、MDCKII-WT細胞、NPC-TW 01細胞
SU-DHL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs695細胞、HEC1B細胞、Mono-Mac-6細胞
HT144細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PCI-4.2細胞、COLO829細胞、HEK 293-H細胞
SUDHL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-M (TK-)細胞、SV-HUC細胞、NCTC929細胞
UCD-MLA-144細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-900細胞、L132細胞、SK MEL 5細胞
H-2405細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lu-99A細胞、WiDr細胞、WM115F細胞
RFL 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT 325細胞、HEC1-A細胞、SUM52細胞
SKMEL-24細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-134細胞、AE 1201細胞、MV4II細胞
Epstein-Barr-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHG44細胞、Roswell Park Memorial Institute 2650細胞、NEC-8細胞
SK BR 03細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3NIH細胞、KTC1細胞、Hs 739.T細胞
SKNEP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuLEC-5a細胞、KM-12細胞、786-O細胞
SUM52PE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AtT-20細胞、451Lu細胞、JM1細胞
R D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 120細胞、MDA-MB-175VII細胞、SUM 149細胞
NCIH446細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Medical University of Graz-Chordoma 1細胞、Ketr3細胞、HRA 19細胞
SUIT-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：K1735細胞、GalK 1細胞、HLCL9B10細胞
RPMI6666細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF/CEM-C7細胞、MPP89細胞、DH 82細胞
639-V細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PA-TU-8988S細胞、CAL27細胞、NCI-H1435細胞
KP-N-RT-BM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCIAML3細胞、KAT5細胞、578T細胞
Me Wo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB453細胞、SUM 159PT細胞、SW 1417細胞
Neukoplast細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HKF細胞、Laboratory of Allergic Diseases 2細胞、TOV21G細胞
HEK 293-EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIT clone T15細胞、NCIH211細胞、SUM-52-PE細胞
LICR-HN-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MB468細胞、38C-13細胞、Roswell Park Memorial Institute 6666細胞
MFD-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAPC-4細胞、JHH-7細胞、MC3T3-E1 Subclone 24細胞
MOLT-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL92.1.7細胞、RGC-5細胞、SNU668細胞
SU4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NW38細胞、MCA-38細胞、CAL-39細胞
Hs 737.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293 F細胞、BT細胞、Merwin Plasma Cell tumor-11細胞
CoCL3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1355細胞、H2228細胞、T-ALL1細胞
HEK 293FT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CBRH7919細胞、HBE細胞、IAR 20細胞
SK-SH-SY5Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QGY-7701細胞、SKO007細胞、RS4;11細胞
OCI-AML4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-94細胞、F36P細胞、Colo320細胞
VK2/E6E7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ESC細胞、H660細胞、C17細胞
OP-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MADB-106細胞、RERF-LCMS細胞、Y3-Ag1.2.3細胞
NCI-H1672 epithelioid cells人小細胞肺癌細胞系
MPC5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-HSR細胞、CCRF.CEM細胞、H-2052細胞
NCIH1437細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1385細胞、H735細胞、HCC1438細胞
1E8-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 7666細胞、SKNMC細胞、NTC-200細胞
K1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：McCoy B細胞、GM2219C細胞、C-4-I細胞
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